大鼠肝窦内皮细胞

大鼠肝窦内皮细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%胰蛋白酶

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肝窦内皮细胞采用混合酶灌流消化、反复低速离心、密度梯度离心法，并通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠肝窦内皮细胞经CD31、CD14免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

细胞简介：

大鼠肝窦内皮细胞细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。肝窦内皮细胞（SEC）是肝脏内所占比例最高的非实质细胞，位于肝窦腔与肝细胞之间，具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。SEC由于拥有一般细胞所没有的窗孔结构、细胞间连结松散、内皮下缺少基底膜而使其具有高度通透性，从而达到快速交换各种大小分子的目的。肝在遭到多种病原侵袭时，肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失，内皮下基膜形成，产生类似于连续型毛细血管的结构，这一过程称为肝窦毛细血管化。它由多种因素引起，其过程极复杂，在多种肝病的发病前期阶段均有出现，近年来受到广泛关注。

原代培养原理和应用：

一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞，置于合适的培养基中培养，在无菌、适当温度和一定条件下，使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数，是指细胞培养的次数，从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段，都属原代培养，一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。

二、原代培养细胞直接来源于活体组织，体外培养也尽量模拟体内环境，使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态，可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段，亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。

三、原代细胞的质量取决于多个因素：取材、培养条件的优化、无菌操作，特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言，想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍，但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心，已构建细胞培养和实验平台，可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞，并在此基础上提供相关细胞实验服务，包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
公司正在出售的产品：

Boc-Alaninol  79069-13-9  C8H17NO3

H-D-Tyr(3-I)-OH  25799-58-0  C9H10INO3

H-Phe(2-Cl)-OH  103616-89-3  C9H10ClNO2

H-D-Phe(4-Me)-OH  49759-61-7  C10H13NO2

9-Fluorenylmethanol  24324-17-2  C14H12O

Z-D-Arg(Mtr)-OH.CHA  210557-94-1  C24H32N4O7S.C6H13N

Fmoc-Chg-OH  161321-36-4  C23H25NO4

Boc-Hyp(Bzl)-OH.DCHA  54631-81-1  C17H23NO5.C12H23N

DHP Linker  3749-36-8  C6H10O2

Fmoc-Pen(Trt)-OH  201531-88-6  C39H35NO4S

Boc-Glu-OBzl.DCHA  30924-91-5   C17H23NO6.C12H23N

Z-D-Lys-OH  70671-54-4  C14H20N2O4

H-Threoninol(Bzl).HCl  160841-03-2  C11H17NO2.HCl

H-Phe(4-Cl)-OH  14173-39-8  C9H10ClNO2

Z-Asp(OBzl)-OH  3479-47-8  C19H19NO6

小鼠组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA试剂盒 ，英文名： TIMP2 ELISA Kit

鸭主要组织相容性复合体(MHC)ELISA检测试剂盒Duckmajorhistocompatibilitycomplex,MHCELISAKit 96T/48T

犬胰腺甘油三酯脂酶(PNLIP)免疫试剂盒 Dog Pancreatic iacylglycerol lipase,PNLIP ELISA kit

英文名称MouseAβ1-40proteinELISAKit小鼠Aβ1-40蛋白规格：96T/48T

同酸待测样品处理试剂盒20次

RatFibrinogenDegradationProduct,FDPELISA试剂盒大鼠血纤蛋白原降解产物(FDP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠肝窦内皮细胞小鼠α干扰素(IFN-α)ELISA试剂盒 ，英文名： IFN-α ELISA Kit

大鼠白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA检测试剂盒Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRαELISAkit 96T/48T

人MAP0酸酶双特异性0酸酶1(DUSP-1)免疫试剂盒 Human DUSP-1 ELISA Kit

英文名称MouseMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit小鼠巨噬细胞炎性蛋白-1α(MIP-1α)规格：96T/48T

冰冻切片NADH心肌黄酶活性染色试剂盒50次

Rabbitα2-Aiplasmin,α2-APELISA试剂盒兔子α2抗纤溶酶(α2-AP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

鱼脱酶1(DIO1)ELISA检测试剂盒 96T/48T ELISA 组装/原装

Human ai thyroid peroxidase aibody (TPO-Ab) ELISA Kit 人抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)ELISA试剂盒

PorcineSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1ELISAKit 猪可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

ADVIgGIII腺病毒IgGⅢ型(间接法二步法)

血液乙醇脱氢酶III(谷胱苷肽-依赖性甲脱氢酶)活性比色法定量检测试剂盒20次

MouseSolubleEndoglin,ENG/sCD105ELISAKit小鼠可溶性Endoglin(ENG/sCD105)ELISA试剂盒规格：96T/48T

贴壁细胞传代操作步骤：

用移液管或者巴氏吸管吸取培养液；

使用不含钙镁离子的平衡盐溶液（PBS）冲洗细胞1-2次；

弃PBS，加入胰蛋白酶-EDTA消化液（消化液浓度根据各细胞不同有调整），轻轻摇晃培养瓶，使胰酶与细胞表面充分接触，37 ℃孵育2-3 min，加入含血清完全培养基终止消化。

将细胞悬液移入离心管中，800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清，加入预热的完全培养基重悬细胞，轻轻吸打混匀，吹打过程中尽量不要出现气泡。

细胞计数，根据细胞量选择合适的传代比例，最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。

 悬浮细胞传代操作步骤：

悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮，无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离，整个过程较为迅速，对细胞损伤较小。悬浮细胞传代，通常有两种方法，直接传代法和离心传代法。

（1）直接传代法

①　悬浮细胞长满至80%-90%左右（细胞悬液变黄，最大细胞密度随细胞系不同而有所差异），即可传代；

②　用吸管吸弃细胞悬液1/2～2/3；

③　加入适量的新鲜培养基，继续培养。

（2）离心传代法

①　将细胞悬液转移到离心管内；

②　800 rpm-1000rpm离心5min，弃上清；

③　使用新鲜的培养基重悬细胞；

④　吸管吸取适量细胞悬液，装入新的培养瓶，再加入适量的新鲜培养基，继续培养。