核酸扩增检测仪

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核酸扩增检测仪相关的厂商

  • 科电检测仪器
    18916787161 作为无损检测行业的专业制造商，科电仪器技术为先导，为客户提供高效、上等的检测解决方案。我们的检测技术涵盖超声波测厚仪、涂镀层测厚仪、防腐层检漏仪、电火花检测仪、led观片灯、红外线检测等领域。 服务范围广阔，石油、化工、航空，造船、电力、军工、钢铁、机械、冶金、汽车、锅炉压力容器、玻璃及金属加工等，安全有效的提供您无损及环境检测服务 Te l 18916787161
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  • 洛阳海纳检测仪器有限公司 银牌6年
    400-860-5168转3814
    洛阳海纳检测仪器有限公司多年来致力于从事高温实验室设备，试剂生产，公司主要产品有HNJC系列X荧光专用全自动熔样机、ATW系列全自动称量仪、黄金首饰检测专用灰吹炉、高温材料检测设备及XRF分析用无水四硼酸锂、无水偏硼酸锂试剂。公司通过了ISO9001:2015质量管理体系认证、被认定为河南省科技型中小企业、洛阳市企业研发中心，HNJC系列熔样机设备运行稳定，受到国内外X荧光厂家一致好评，并成为了热电、布鲁克、理学、帕纳科、岛津、钢研纳克等X荧光用户的可信赖配套产品，并先后与宝武集团、中检集团等建立合作关系。黄金首饰检测专用灰吹炉是火试金分析专用产品，大大提高了试验效率，环保系数更高，性能更稳定，是火试金分析法的理想选择。 我们时刻关注用户需求，技术不断升级，产品品质不断提升，不断推进企业转型，增强核心竟增力，以更优质的品质和更优质的服务赢得客户的信赖和支持！ 真诚欢迎社会各界宾朋莅临海纳公司共谋发展、共创辉煌！
    主营产品： 马弗炉   熔样机   光谱部件   色谱纯  
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  • 高铁检测仪器（东莞）有限公司 金牌9年
    400-860-5168转3509
    高铁检测仪器，1977年创立于台湾，专门从事各类材料物性检测仪器的研发和生产。产品包括：拉力强度试验机、万能材料试验机、硫化仪、制鞋皮革、橡胶轮胎、高分子/塑胶、纸业包装、电工器材、家具/办公桌椅、纺织、运动器材、混凝土、口罩检测及防护用品检测等行业所使用之质量检测仪器。高铁检测仪器自1998年在东莞奠基建厂以来，先后在青岛、上海、温州、泉州、宁波、天津、成都、沈阳、广州、深圳等地设立分公司。并于2009年再建东莞第二生产基地---东城分厂，扩大生产阵容，提升技术产能，满足业界广大客户需求。 　　 高铁一直以国际水平的质量与世界先进同业同步竞争；产品创新的能力与速度，保持了在行业中的领先优势。在科技创新领域，高铁获得多项殊荣：「高新技术企业证书」、「企业创新奖」、「省重点新产品奖」、「市专利金奖」、「市专利重点企业」、「台湾十大杰出企业金鼎奖」、「台湾优良外销产品国际金球奖」等；另获得「准确度一级制造许可证」、「计量样机试验合格证」、「计量标准合格证」、「计量保证体系合格证」、「CE证书」…等资质证书。 　　 高铁凭着自主创新理念，相继获得市级高分子材料物性检测设备工程研发中心、直属校准实验室被CNAS认定为国家级实验室、2008年奥运会《篮球、足球、排球》等产品八项国家标准方法审定成员单位资质。同时，高铁公司注重产学研合作，先后与华南理工大学、青岛科技大、沈阳化工大学、徐州工业技术学院等高校建立联合实验室，集高校科研力量和自身技术实力，推进我司产业升级。 　　 高铁检测仪器，以其精确度、可靠度以及优异的软件功能为海内外广大产业界及科研机构所选用。在研发、设计方面精益求精，世界规范：ISO、ASTM、DIN、EN、GB、BS、JIS、ANSI、UL、TAPPI、AATCC、IEC、VDE、CSA.....均为所用。 　　 40年的研发实力，巩固了高铁在检测仪器领域中的领航地位，产品所发挥的贡献无可计量，对产业界研发高质量、高价值的商品更是影响深远。展望未来，高铁将继续秉持科技创新、诚信经营之理念，在稳固提升的基础上实现进一步飞跃的发展。
    主营产品： 塑性计   维卡软化点   门尼粘度计   流变仪  
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核酸扩增检测仪相关的仪器

  • QIAamplifier 96 PCR扩增仪 400-873-7896
    PCR实验已然成为生物实验室的日常，坚固耐用和低噪音排放才能成为实验室的永恒。结合QIAGEN在PCR试剂领域多年的精耕细作，最新上市的QIAamplifier 96助您找到PCR实验成功的捷径，带您享受QIAamplifier与AllTaq PCR Kits 联手获得一击即中的实验结果。QIAamplifier 96——为性能而生 简单易用：直观的软件和7 英寸彩色触摸屏 快速升降温：快达4℃/秒的升降温速率 快速扩增：45分钟内完成30个循环 高性能智能热盖：压力控制确保高可重复的结果 轻声细语：低于45分贝的噪音排放 线性梯度功能：20–99℃线性范围（高达20℃梯度及最小0.1℃精准调控）AllTaq PCR Kits——一种试剂涵盖所有扩增需求AllTaq PCR 是经反复优化的可超快速扩增的PCR反应试剂盒，45分钟内即可完成30个循环。试剂盒中含有小分子锁扣保护的热启动酶，提供了超高的特异性和卓越室温稳定性。使用过程无需优化反应条件，不同目标片段，不同模板含量，不同GC含量，可用同一退火温度，同一实验流程进行扩增。还能实现9kb的长片段扩增和双重扩增，结合超高灵敏度及可视化移液监测染料全方位助力实验成功。
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    厂商： 凯杰企业管理（上海）有限公司
    品牌： QIAGEN
    型号： 9002991
    价格： 7万 - 10万元
  • TAdvanced Twin双槽基因扩增仪 400-860-5168转2376
    l 双槽设计，每个槽的样品模块和热盖都可独立控制，相当于两台仪器，为多个用户的灵活使用提供方便；l 标准配置是双48孔模块（0.2ml），还有满足大体积反应的双30孔模块（0.5ml）以及双混合型模块（0.2ml和0.5ml PCR管都适用）。一台仪器可配多个反应模块，以满足各种不同的用户需求；l 采用具有多年制造经验的瑞士高端PT100传感器，配合先进的电子元件能为PCR仪带来±0.1 ℃的温度准确性，优异的温度准确性带来优异的温度均一性；l 线性温度梯度（Linear Gradient Tool，LGT）功能，各行温度呈线性分布，极大地方便了用户优化退火温度的过程，能让用户快速找到合适的退火温度，获得好的扩增结果；l 采用特殊的气流流动方式和高品质的静音风扇，仪器运行时的噪音不超过 45 dB，为用户提供安静舒适的工作环境；l 高性能智能热盖（High-Performance Smart Lid，HPSL）技术，热盖内有离合装置，能提供持续稳定的特定压力，对于使用的PCR耗材高度和形状没有特殊要求；l 具有先进的用户管理系统（Advanced User Management，AUM），根据使用权限不同，可将用户分成三个账户等级，每个用户账户可设置密码，可设置特定的权限内容，方便用户信息的管理，并保护用户信息的安全；l 提供智能的程序设计功能，用户只需要输入引物序列、产物长度、循环数等信息，仪器会自动给出一个推荐的程序，用户可直接使用；l 为用户提供方便全面的仪器自检功能，检测项目包含升温、降温、热盖、温度梯度等所有主要的功能，以便用户随时监控仪器的运行状态；l 超大的7英寸彩色触摸屏，无反光，可戴手套操作；
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    厂商： 耶拿分析仪器（上海）有限公司
    品牌： 耶拿/JENA
    型号： TAdvanced Twin
    价格： 10万 - 30万元
  • 恒温核酸扩增检测仪 400-860-5168转3452
    恒温核酸扩增检测仪深芬仪器厂家生产的CSY-ZW恒温核酸扩增检测仪集恒温扩增与荧光信号检测于一体可实现扩增过程的实时监测，仪器内置人性化操作系统，可自动判读结果；恒温核酸扩增检测仪可用于各类等温扩增反应体系试剂，具有高特异性、高敏感性、简单、便捷及成本低的特点，恒温核酸扩增检测仪可用于肉类动物源性成分检测、食源性致病菌检测、转基因检测、动物病害检测、科研实验等领域。恒温核酸扩增检测仪技术参数：1、显示屏：7寸触摸屏；2、操作软件：Android；3、样品通量：16x0.2ml兼容单管和8联管；4、加热方式：半导体制冷片结合电性电阻热红外技术；5、温控范围：室温～85℃；6、控温精度：±0.1℃；7、温度准确度：±0.4℃；8、模块温度均匀度：±0.4℃；9、激发光波长：470nm±10nm；10、检测光波长：520nm±10nm；11、荧光强度检测重复性：变异系数为CV≤15%；12、荧光强度检测精密度：变异系数为CV≤15%；13、反应体积：开放式恒温荧光检测试剂，10～100 μl；14、检测器：新型光学检测器，结合数字电路控制，光信号稳定；15、检测试剂：开放式恒温荧光检测试剂；16、数据分析：可对被检指标进行定性或半定量检测，并可导出数据绘制标准曲线；17、结果显示：1）扩增曲线； 2）检测结果；18、判读方式：1）根据扩增曲线判读；2)仪器自动判读；19、通讯接口：USBA型、USB型、全网通卡槽、TF内存扩展卡槽、网口等；20、支持模块定制、程序定制等整机定制解决方案。恒温核酸扩增检测仪产品特点：1、60分钟以内可判断阴阳性结果；2、集成恒温扩增、实时荧光检测、智能数据判读；3、检测结果可通过内置热敏打印机打印；4、不同孔板对应不同曲线，由不同颜色表示，方便用户查看；5、易学易懂操作步骤，无专业背景也可快速上手；6、可用于肉及肉制品动物源性成分检测；乳品及乳制品、饮用水等食品致病菌检测；鱼虾等水产品动物病害检测；动物饲料及农产品转基因检测；7、具有高特异性、高敏感性、简单、便捷及成本低的特点；8、检测兼容性强，可同时检测5个项目；9、16个检测位置，一次最多可检测14个样品。
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    厂商： 深圳市芬析仪器制造有限公司
    品牌： 深芬仪器/CSY
    型号： 恒温核酸扩增检测仪
    价格： 7万 - 10万元
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  • 新一代恒温扩增|先达基因自主研发New ERA技术，助推现场化核酸即时检测
    随着全球新冠疫情爆发，原本只能在专业实验室开展的核酸检测逐步为大众所认知，而对于疫情控制所需要现场快速检测紧迫的需求，也驱动着全球诊断企业加速技术的革新。近两年越来越多的体外诊断企业开始探索居家检测，让传染病检测、癌症早筛等体外诊断项目逐步落地至家庭场景。体外诊断项目如何实现小型化、便捷化、家庭化，如何跳过样本流转和实验室检测环节，居家完成整个检验流程，一直是国内外相关体外诊断企业研发的重点。2020年底，随着Cue Health公司的家用新冠分子POCT检测产品的FDA获批及应用，将分子POCT检测从实验室带入了全程家庭化的全新场景。New ERA技术助推现场化核酸即时检测在此背景下，苏州先达基因科技有限公司将自主开发的新一代核酸检测技术（New ERA），配套微型核酸荧光检测仪（基因镜 GENEYE®），建立了先达基因New ERA核酸检测一体化解决方案，革命性地实现了全程10分钟现场化检测，极大提升了现有检测诊断技术水平。New ERA技术产品与基因镜（GENEYE®） “10分钟一体化核酸检测解决方案”流程图凭借该方案的技术优势，未来有望广泛用于医院床旁、基层诊所、野外、学校、机场、家庭等检测场景，甚至可应用于肿瘤、老年痴呆等早筛领域。基因镜搭配有独立APP及微信小程序，在手机上便可查看相应检测结果，满足了对便捷、私密的检测需求。基因镜（GENEYE®）图底层技术创新是打造行业差异化竞争力的关键PCR技术凭借着优异的敏感度和特异性，被认为是现阶段用于病原微生物检测等项目的理想方法。但PCR技术需要精密昂贵的仪器设备、专业的技术人员，且对实验室环境及标本处理要求较高，检测时限长达两个小时甚至更久，难以实现快速检测的要求。近年来，快速、准确、便捷地进行核酸检测成为行业的迫切需求。先达基因CEO于继彬在PCR扩增技术和基因工程领域有20余年经验，有着深厚的技术和管理积淀，对行业痛点和发展趋势有着更为切身的体会和敏锐的感知。于继彬本人在读研究生期间便开始了PCR法合成基因的尝试，并早在2002年工作期间，在国内率先建立了以PCR扩增法为基础的基因合成工业化流程。2005年加入南京金斯瑞，任职副总裁，负责公司生产与研发业务，成为公司核心管理成员之一。曾领导包括基因合成、蛋白工程、抗体工程、新药筛选、引物合成、基因测序等业务板块。任职金斯瑞高管的十年间，公司实现从初创到成为全球最大的PCR实验基地与基因合成中心的跨越。2017年，于继彬借POCT行业萌发的契机创立了先达基因，旨在创新核酸快速检测技术。并组建了富有工业界管理经验的分子生物学专家、分子诊断用酶工艺专家、生物制药工程专家以及医疗器械营销专家的核心管理团队。利用计算机分子设计（Molecular Design）、定向进化(Direct Evolution)、亲和力成熟(Affinity Maturation)等制药领域高端技术对PCR和生物体遗传物质自身扩增复制所必需的聚合酶、核酸内切酶、单链结合蛋白等进行了多次改造筛选，先达基因开发了新一代恒温扩增（New ERA）技术，在恒定温度条件下，5-8分钟即可将DNA/RNA扩增数亿倍，配合独特的引物与探针自环化结构，使全程检测仅需10分钟左右即可完成。灵敏度特异性可与常规荧光定量PCR媲美。同时，先达基因团队还设计了超大的检测反应体系，虽然成本有所增加，但对于用户操作便利性带来极大优势，同时也能容纳更多的样本。这也使得检测装置可以实现简易化的关键之一。一切从用户角度出发，快捷流畅的用户体验是先达基因产品设计的基本逻辑。New ERA技术开发路线图
    时间： 2022-10-26
    作者： YOLO
  • 芯片式恒温扩增核酸检测技术|苏州医工所获授全国科技系统抗疫先进集体
    近期，科技部印发了《关于表彰全国科技系统抗击新冠肺炎疫情先进集体和先进个人的决定》，授予全国163个集体“全国科技系统抗击新冠肺炎疫情先进集体”称号，314人“全国科技系统抗击新冠肺炎疫情先进个人”称号。中国科学院苏州生物医学工程技术研究所生物医学检验技术重点实验室（以下简称苏州医工所医学检验室）被授予先进集体称号。苏州医工所医学检验室在其高灵敏传感器及分子诊断核心技术基础上，开展相关技术攻关，研制出基于芯片式恒温扩增技术（LAMP）核酸即时检验（POCT）仪器。这款手持式核酸即时检验仪能够在芯片封闭的通道里迅速提取出冠状病毒核糖核酸（RNA）标的物，15分钟便能出检测结果，成本低，适用于急诊、ICU、救护车、社区、家庭、火车站等环境下快速识别感染人群，产品交付给一线检测机构和国际合作医院。针对新冠核酸检测工作样本量大、工作繁琐、接触易感染等问题，苏州医工所团队结合海关、口岸、“应检尽检”等场景，开展“超高通量全自动核酸检测系统”研制工作。该系统可以实现从“核酸样品管”至“检验报告”全流程、全自动化、生物安全型检测，单个小时内完成1000个样本的超高通量检测，超过国外相关公司产品指标。在团队的不懈努力下，各单元技术模块均打磨成熟，他们研发出的全自动开盖分杯、全自动核酸提取（96样本、16样本）以及6色qPCR检测仪等系列仪器真正实现了“分可独立作战，聚可联合攻关”。目前，该项目正申报医疗器械注册证进行产业化，为疫情防控提供创新技术支撑，助力苏州打赢疫情防控阻击战。
    时间： 2022-04-14
    作者： YOLO
  • 快速通关有妙招！全自动封闭式核酸扩增分析仪提供海关检测新思路
    近日，北京新闻中心召开科技冬奥专场新闻发布会，重点介绍“科技冬奥”有关情况。本届冬奥会共有200余项技术，500多家单位，超过万名科研人员参与研发，为办好一届“简约、安全、精彩”的冬奥会提供有力保障。而其中也包含了海关科技人员的积极参与和贡献，由中国海关科学技术研究中心会同北京海关、石家庄海关、广州海关、宁波海关、青岛海关所属技术机构等10余家单位联合承担科技部国家重点研发计划“科技冬奥”重点专项项目“冬奥会口岸快速通关智能监管技术及装备”开发60余种传染病快速检测方法、17台套口岸监管装备，部分装备在冬奥会期间在10余个冬奥场馆和海关监管场所测试应用，有效助力了冬奥会口岸快速通关、智慧监管和疫情防控等工作。为进一步推动相关成果应用落地，《中国口岸科学技术》公众号将推出系列报道，对相关成果进行介绍，以供各界参考。全自动封闭式核酸扩增分析仪“科技冬奥”是2022年北京冬奥会赛场外最亮眼的主题，世界盛会不仅为大家呈现了精彩纷呈的体育赛事，也让全世界领略了科技带给北京冬奥会的独特魅力。在当今新冠疫情全球大流行的形势下，为确保北京冬奥会和冬残奥会的安全顺利举办，众多炫酷科技在本届冬奥会赛场内外大显身手，展现了我国科技创新的硕果。针对预防冬奥会期间输入性传染病口岸快速筛查的需求，国家重点研发计划 “科技冬奥”重点专项“冬奥会口岸快速通关智能监管技术及装备”项目，基于微流控芯片核酸检测技术，建立可快速检测25种传染病病原体的现场快速检测装备——全自动封闭式核酸扩增分析仪，由中国海关科学技术研究中心联合海关总署（北京）国际旅行卫生保健中心、北京中科生仪科技有限公司共同研发承担。该装备可在1小时内完成病原微生物样品的检测，对出入境人员、交通工具、运输设备、以及可能传播传染病的行李、邮包、货物等物品进行现场快速检测，迅速识别传染源，防止检疫传染病的传入或者传出。全自动封闭式核酸扩增分析仪及其配套检测卡目前，虽然有多种全自动核酸检测系统能够实现“样品进－结果出”，但具备全自动化核酸提取和实时荧光PCR精准检测能力的大多数仍是“实验室内”桌面型”设备，无法适应现场化的检测要求。CarryOn P1000Q采用高度集成化的设计理念针对以上短板，项目团队通过大量的研发和测试，将复杂的功能结构高度集成于比手掌略大的仪器上，采用快速升降温、超声控制、纯化温控、微型化多通道荧光检测、微流控液路驱动、锂离子蓄电池等模块，实现完善的使用功能和手持式的小型化设计。并采用了微流控技术的一体化芯片设计，将进行样本处理、核酸提取和纯化、荧光PCR反应的体系集成在8cm×6cm的芯片上，替代了传统意义上的实验室功能，使传统的核酸检测时间从3~4小时缩至1小时以内，突破了制约分子检测快速化的关键技术瓶颈，而且全封闭自动化检测过程解决了传统分子检测技术易发生环境交叉污染而难以在口岸现场应用的技术难题。简单的操作流程现场检测替代传统意义的实验室检测本系统凭借简单、便捷、快速的性能特点，全封闭无污染的反应过程以及精准、可靠、直观的实验结果，非常适合应用在冬奥会和冬残奥会等重大国际活动中。如得以最终应用，将大幅度简化通关流程，减少通关人员的等待时间，满足快速通关需求，解决大型国际活动现场快速筛查和确诊技术缺乏的问题。同时，有利于提高我国口岸传染病筛查的效率，更早、更准确地发现传染病携带者，识别传染病跨境传播风险，尽早进行传染病预警，以防止传染病发生扩散，维护国家公共卫生安全和人民健康。这将为疫情常态化下我国举办大型国际活动口岸疫情防控提供新的解决方案，在服务口岸现实需求的同时，也可充分展现口岸公共卫生检疫体系的高效性、准确性和人性化。
    时间： 2022-02-22
    作者： 筱婕
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  • 【参数解读总结篇】基因扩增仪(PCR)的技术参数解读与使用

    【参数解读总结篇】基因扩增仪(PCR)的技术参数解读与使用

    【参数解读】基因扩增仪(PCR)的技术参数解读与使用PCR技术的基本原理PCR技术的基本原理 类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程，就可获得更多的“半保留复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2～4分钟， 2～3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍。请您来解析：1、普通PCR仪，梯度PCR仪，原位PCR仪，实时荧光定量PCR仪四类仪器有何异同？http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502251536_536341_1608710_3.png2、我们应该如何根据检测需求来选购PCR的四类仪器？根据检测的定量要求来选择仪器类型。3、PCR的核心参数都有哪些？核心参数是温度控制。4、梯度PCR仪可以分离不同DNA的片段吗？与普通PCR的异同在哪？梯度PCR可以分离不同DNA片段,与普通PCR仪不同的地方在于。可以设置一系列的梯度退火温度进行扩增，从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。主要用于研究未知DNA退火温度的扩增，这样可节省试验时间、提高实验效率，又节约实验成本。5、使用过程中常见的问题PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性，但令人头痛的问题是易污 染，极其微量的污染即可造成假阳性的产生. 一、污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于 密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中，由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染. (二)PCR试剂的污染:主要是由于在PCR试剂配制过程中，由于加样枪、容器、双蒸水 及其它溶液被PCR核酸模板污染. (三)PCR扩增产物污染.这是PCR反应中最主要最常见的污染问题.因为PCR产物拷贝量 大(一般为1013拷贝/ml)，远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产物 污染，就可造成假阳就可形成假阳性. 还有一种容易忽视，最可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染;在空气与液体面摩 擦时就可形成气溶胶，在操作时比较剧烈地摇动反应管，开盖时、吸样时及污染进样 枪的反复吸样都可形成气溶胶而污染.据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝，因而由 其造成的污染是一个值得特别重视的问题. (四)实验室中克隆质粒的污染:在分子生物学实验室及某些用克隆质粒做阳性对照的 检验室，这个问题也比较常见.因为克隆质粒在单位容积内含量相当高，另外在纯化 过程中需用较多的用具及试剂，而且在活细胞内的质粒，由于活细胞的生长繁殖的简 便性及具有很强的生命力.其污染可能性也很大. 二、污染的监测 一个好的实验室，要时刻注意污染的监测，考虑有无污染是什么原因造成的污染，以 便采取措施，防止和消除污染. 对照试验 1.阳性对照:在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照，它是PCR 反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志.阳性 对照要选择扩增度中等、重复性好，经各种鉴定是该产物的标本，如以重组质粒为阳 性对照，其含量宜低不宜高(100个拷贝以下).但阳性对照尤其是重组质粒及高浓度阳 性标本，其对检测或扩增样品污染的可能性很大.因而当某一PCR试剂经自己使用稳 定，检验人员心中有数时，在以后的实验中可免设阳性对照. 2.阴性对照:每次PCR实验务必做阴性对照.它包括①标本对照:被检的标本是血清就用 鉴定后的正常血清作对照;被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照.②试剂 对照:在PCR试剂中不加模板DNA或RNA，进行PCR扩增，以监测试剂是否污染. 3.重复性试验 4.选择不同区域的引物进行PCR扩增 三、防止污染的方法 (一)合理分隔实验室:将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定 等步骤分区或分室进行，特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其它步骤严格分开. 最好能划分①标本处理区;②PCR反应液制备区;③PCR循环扩增区;④PCR产物鉴定区. 其实验用品及吸样枪应专用.实验前应将实验室用紫外线消毒以破坏残留的DNA或RNA. (二)吸样枪:吸样枪污染是一个值得注意的问题.由于操作时不慎将样品或模板核酸吸 入枪内或粘上枪头是一个严重的污染源，因而加样或吸取模板核酸时要十分小心，吸 样要慢，吸样时尽量一次性完成，忌多次抽吸，以免交叉污染或产生气溶胶污染. (三)预混和分装PCR试剂:所有的PCR试剂都应小量分装，如有可能，PCR反应液应预先 配制好，然后小量分装，-20℃保存.以减少重复加样次数，避免污染机会.另外，PCR试剂，PCR反应液应与样品及PCR产物分开保存，不应放于同一冰盒或同一 冰箱. (四)防止操作人员污染，使用一次性手套、吸头、小离心管应一次性使用. (五)设立适当的阳性对照和阴性对照，阳性对照以能出现扩增条带的最低量的标准病 原体核酸为宜，并注意交叉污染的可能性，每次反应都应有一管不加模板的试剂对照 及相应不含有被扩增核酸的样品作阴性对照. (六)减少PCR循环次数，只要PCR产物达到检测水平就适可而止. (七)选择质量好的Eppendorf管，以避免样本外溢及外来核酸的进入，打开离心管前 应先离心，将管壁及管盖上的液体甩至管底部.开管动作要轻，以防管内液体溅出. 常见问题分析与对策 PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消 化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时，不出现扩增带，极有可能是标本的消化处 理，模板核酸提取过程出了毛病，因而要配制有效而稳定的消化处理液，其程序亦应 固定不宜随意更改。 酶失活：需更换新酶，或新旧两种酶同时使用，以分析是否因酶的活性丧失或不够而 导致假阴性。需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。 引物：引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称，是PCR失败或扩增条带不 理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题，两条引物一条浓度 高，一条浓度低，造成低效率的不对称扩增，对策为：①选定一个好的引物合成单 位。②引物的浓度不仅要看OD值，更要注重引物原液做琼脂糖凝胶电泳，一定要有 引物条带出现，而且两引物带的亮度应大体一致，如一条引物有条带，一条引物无条 带，此时做PCR有可能失败，应和引物合成单位协商解决。如一条引物亮度高，一条 亮度低，在稀释引物时要平衡其浓度。③引物应高浓度小量分装保存，防止多次冻融 或长期放冰箱冷藏部分，导致引物变质降解失效。④引物设计不合理，如引物长度不 够，引物之间形成二聚体等。 Mg2+浓度：Mg2+离子浓度对PCR扩增效率影响很大，浓度过高可降低PCR扩增的特 异性，浓度过低则影响PCR扩增产量甚至使PCR扩增失败而不出扩增条带。 反应体积的改变：通常进行PCR扩增采用的体积为20ul、30ul、50ul。或100ul，应用多 大体积进行PCR扩增，是根据科研和临床检测不同目的而设定，在做小体积如20ul 后，再做大体积时，一定要模索条件，否则容易失败。 物理原因：变性对PCR扩增来说相当重要，如变性温度低，变性时间短，极有可能出 现假阴性;退火温度过低，可致

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