色谱图

p 　　LC-MS/MS作为蛋白组学分析的主要手段，所分析的样品分子过于微小肉眼不可见，需要借助色谱图、质谱图判断其表现，但你看到文章里的质谱图是否感觉迷惑不解，甚至色谱图和质谱图傻傻分不清呢?文章返修编审让补充的有注释信息的二级质谱图究竟是个什么东东?今天小编带你一起解密。 /p p 　　我们常说的图谱分为两类，色谱图与质谱图。色谱图评价的是母离子在色谱上的表现，质谱图则是一级母离子和二级碎片子离子在质谱里的信号表现。这里小编跟你分享一个区分两种图谱的秘密，那便是看横坐标，横坐标是时间轴的为色谱图，横坐标是质荷比的那就是质谱图了，不管色谱图还是质谱图，纵坐标都是信号强度! /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201706/insimg/d2a264a0-7451-4f84-98dc-0b5062ac709e.jpg" title=" 1.jpg" / /p p 　　常见的色谱图有Basepeak图、TIC图、XIC图 质谱图经常提到的是一级质谱图，二级质谱图，b,y离子匹配图(有注释信息的二级质谱图)，下面我们逐一看过来。 /p p 　　 strong 【色谱图】 /strong /p p strong 　　Basepeak 图： /strong /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201706/insimg/363edb6d-6fda-4948-81e5-4c0da2a627b5.jpg" title=" 2.jpg" / /p p 　　看到上图，做过LC-MS/MS实验的童鞋是不是有一种似曾相识的感觉?你肯定在哪里见过。 /p p 　　Basepeak图是色谱分离过程中将每个时间点质谱检测信号最强的肽段的强度值连续描绘得到的图谱。图中峰多信号强说明样品复杂度高量也足。由于上机的样品是蛋白质酶解后的肽段，所以如果你要问小编能否将鉴定到的蛋白质在basepeak图上标出来，答案是不能!!! /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201706/insimg/0e1dca0d-99a3-4c0d-83e6-259c06cc0fd8.jpg" title=" 3.jpg" / /p p strong 　　TIC图： /strong /p p 　　全称为Total ion chromatogram，即总离子流图，相比Basepeak图是用每个时间点质谱信号强度最高的母离子绘制的图谱，TIC是样品中所有离子的色谱图。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201706/insimg/8d76db07-faf1-4889-a7a7-d28156306780.jpg" title=" 4.jpg" / /p p strong 　　XIC图： /strong /p p 　　全称是Extracted ion chromatogram，即提取离子流色谱图,为某个特定母离子的色谱图，XIC图的峰面积可以用于蛋白定量分析。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201706/insimg/30b83abf-94dc-44f3-a7c4-305e22fc80fa.jpg" title=" 5.jpg" / /p p 　　 strong 【质谱图】 /strong /p p 　　一级质谱图是一次质谱全扫描内所有母离子的信号分布图，二级质谱图是特定母离子在高能碎裂后产生的二级离子的信号分布图，样品经质谱鉴定后生成的质谱文件实质是数万张一级质谱图和二级质谱图的叠加。 /p p 　　原始二级质谱图，如下图(m/z=377.54)，为实际检测到的二级离子的质荷比的分布图，只有一个个孤独的峰，代表一个个孤单的子离子，没有归属，只有将其大小与宗氏族谱(理论的肽段序列碎裂后生成的二级离子分布)匹配后，方能知道其名姓(肽段序列)。匹配后的图就是文章里提到的有注释信息的二级图，也叫做b,y离子匹配图。修饰组学及一段肽的蛋白发文章时可能会被要求提供b,y离子匹配图。 /p p style=" text-align: center " strong img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201706/insimg/741b86e1-6126-4e8e-a498-782c779009ae.jpg" title=" 6.jpg" / /strong br/ /p p style=" text-align: center " 　　B,y离子匹配图 /p p 　　将实际检测到的二级离子的质荷比分布与肽段序列断裂后理论形成的子离子匹配后的图谱。 /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201706/insimg/383ca26b-e241-4004-8430-5f9ab963f299.jpg" title=" 7.jpg" / /p p 　　肽段在能量作用下断裂后会生成一个个b,y离子对。左面的碎片为b离子，右边的碎片为y离子，以上图为例，KTQAASVEAVK理论生成的b,y离子对为： /p p 　　第一个氨基酸与第二个氨基酸中间断开(K|TQAASVEAVK)，则生成b1=K(从左往右数1)，y10=TQAASVEAVK(从右往左数10) /p p 　　第二个与第三个氨基酸中间断开(KT|QAASVEAVK)，生成b2=KT,y9= QAASVEAVK 其他位置断开，依次类推……。 /p p 　　本肽段中如果第一个氨基酸K上发生了泛素化修饰(已经标红)，我们应该如何找出该位点被修饰的证据呢?请往下看。(哎哎继续往下看，别走神儿!) /p p style=" text-align: center " img src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201706/insimg/e98257d8-53f4-496b-9f0e-c37fb645c9ce.jpg" title=" 8.jpg" / /p p 　　肽段碎裂后检测的b3(KTQ),b4(KTQA)离子可能带有修饰集团，以b3为例，如果K上发生修饰，则b3的分子量应该比不带修饰的b3(KTQ)理论分子量(376.22-18.01(QA连接是脱了水的)=358.21)多一个修饰集团glygly-的分子量(114.04)，即=358.21+114.04=472.25，而我们检测到的b3离子的分子量刚好为472.25，说明b3(KTQ)离子携带了泛素化修饰集团.因泛素化常发生在K上，推测应为K发生了泛素化修饰。 /p p br/ /p

2010年版《中国药典》及增补是新中国成立60年来组织编制的第九版药典，注重创新与发展，全面提升了我国药物质量控制的要求与水准，是国家药品标准体系的核心。作为色谱行业的领导者，沃特世（Waters® ）公司长期以来得到广大制药行业用户的支持与厚爱，其提供的优质色谱柱及消耗品为药品质量控制提供了强有力的保障和技术支撑。为答谢广大用户对沃特世公司的支持与帮助、进一步增进用户之间的交流，特向广大沃特世色谱柱制药领域用户征集2010版中国药典高效液相色谱图，并将汇编成册回馈客户。 一、征集对象 所有沃特世色谱柱制药领域终端用户。 二、征集要求1、所用的Waters色谱柱规格型号、色谱条件完整准确；图谱真实、清晰，基线稳定，目标成分峰型良好，分离度、保留时间、理论塔板数符合要求。三、评审与奖励1、沃特世将邀请专家为本次征集活动进行评审，所有被录用图谱的作者均将获得沃特世特制U盘一个。2、活动将选出前十名对图谱征集贡献最大的单位或个人成为VIP客户，将给予更低的优惠折扣。 四、征集时间及联系方式 征集时间：2013年1月1日-2013年5月31日 Word文件请电邮至info_chemistry@waters.com（请将附件粘贴到邮件中） 联系人：Anne 联系电话：021-61562630 五、附件 该活动解释权归沃特世科技（上海）有限公司所有 作者姓名： 单位名称： 部门/科室： 联系电话： E-mail： 邮编： 通讯地址： 样品名称： 色谱条件： 色谱图（若提供数个图谱数据，可另附页面）

最近，在新出版的2010《中国药典》第二增补版中，月旭科技的Ultimate® XB-C18色谱柱被列为颠茄片和颠茄酊品种的指定品牌参考色谱柱，进入药典&ldquo 指定品牌色谱柱&rdquo 之列。 您可能会问：药典指定色谱柱品牌到底有多罕见？ 答：根据药典相关规定：正常情况下，药典中规定用HPLC法作为质检方法的品种，只指定色谱填料的种类，不指定色谱柱品牌和厂家。但是，某些药品品种检测难度大，监控成分多（或杂质种类多），或要求对多组分进行定性和定量测定，例如颠茄片和颠茄酊等这样的中药特征谱图，这些品种对色谱柱的峰容量、选择性和重现性等都有非常高的要求，所以在选定符合条件的色谱柱后，其他品牌色谱柱无法相互替换或达不到药典的要求，在这种情况下药典指定色谱柱品牌。 据精确统计，药典中2000多个品种指定用HPLC法做为法规质检方法，但指定色谱柱品牌的品种比例不到1%！到目前为止这些指定品牌的色谱柱绝大多数是国际知名品牌。 您可能还会问：月旭色谱柱为何成为药典指定色谱柱？ 在制定颠茄片和颠茄酊特征谱图的过程中，药典委员会有数十个色谱柱品牌的选择，但是由于该品种技术难度大，对多组分有定性和定量的要求（保留时间和峰面积的要求），同时为了确保结果能得到重现，必须选择性能达到要求，在行业内有一定知名度，质量稳定的色谱柱品牌，最终选定月旭的XB-C18作为指定品牌参考色谱柱。月旭色谱柱也成为迄今为止只有国际知名品牌才享有的&ldquo 药典指定色谱柱&rdquo 之一。 颠茄片和颠茄酊是2010版中国药典第二增补版收录的样品，用HPLC方法测定其特征谱图。 药典截图&mdash &mdash 颠茄片（药典第二增补版172页） 药典截图&mdash &mdash 颠茄酊（药典第二增补版173页） 月旭Ultimate® XB-C18是2010版中国药典增补版中测定颠茄片和颠茄酊的指定品牌参考色谱柱，利用自主研发的独特键合工艺和双封尾技术，具有高柱效、高分辨率、产品质量稳定等特性。月旭科技生产的每一根色谱柱在出厂之前都经过严格的有针对性的质量控制，确保客户使用的满意度。 根据2010版中国药典方法，月旭Ultimate® XB-C18（颠茄浸膏专用柱）在不同HPLC仪器上，对颠茄浸膏样品进行测定的谱图及数据： 公司简介： 月旭科技专注于研发、生产和销售色谱分离材料，并为广大的色谱工作者提供完整的色谱分离分析解决方案。公司坚持自主研发核心色谱填料技术，坚持自主品牌，已经成功推出68种月旭品牌的各类HPLC键合相。公司3个系列11个品种的色谱柱已经列入美国药典（USP）数据库。公司在色谱填料领域拥有多项发明专利，色谱柱和SPE柱产品质量和性能都已达到国际先进水平，并得到广大色谱工作者的认可。经过八年的持续不断的努力，月旭已经占据中国自主色谱柱品牌国内市场份额第一的地位。我们的目标是成为中国色谱材料市场的领导者！ 月旭科技提供免费色谱柱试用和免费色谱分析方法咨询。 如需获得更多信息，请访问月旭官网：www.welchmat.com，或拨打月旭服务热线400-808-6760。