查可必利

德国ibidi的ibiPore可以实时观察流动、剪切情况下的细胞侵袭、迁移、细胞相互作用等实验。对实验结果进行观察统计时，不需要将膜取下，也不需要将另一边的细胞擦掉（经常将膜擦破，导致实验失败），可直接将μ-Slide放于显微镜下观察统计。细胞可以通过两种方式，选择贴壁于氮化硅膜的上下两侧。可以把细胞种植在膜下边，避免自由落体的说法，大大提高了实验的准确性。21世纪注定是一个生命科学的世纪，科研工作者们如果想在这个世纪去决胜，能做到一点，不仅要好的idea，领先的技术，更需要得心应手的好工具。所谓工欲善其事必先利其器，今天为大家介绍德国ibidi的μ-Slide ibipore SiN (图1), 一款具有多孔氮化硅膜的μ-Slide载玻片，可用于实时观察流动、剪切力条件下的细胞侵袭、迁移以及细胞相互作用的可视化的“ transwell ”，更多应用请参阅文中（Intended Use的相关内容）。图1. ibipore及ibipore SiN氮化硅膜培养细胞的染色结果。图片背景为在ibipore氮化硅膜上培养细胞的荧光染色结果，规则排布的白色圆点为氮化硅膜的孔隙ibipore有上下两个独立的通道（见图2），两个通道 overlap 的区域由一个孔径大小均一的氮化硅膜隔离开（见图3）。两个通道可以分别培养细胞，通过两种方式，细胞可以贴壁于氮化硅膜的上下两侧。在细胞侵袭实验中，普通的transwell只能将细胞培养在上侧，这样所得到的实验结果并不能明确的说明是由于重力作用还是侵袭能力本身造成的。而ibipore考虑到这一因素，建议实验者在氮化硅膜的下侧进行细胞培养，检测细胞向上侧通道进行迁移的能力，进而巧妙的排除了重力作用对侵袭实验的影响。配合ibidi流体剪切力系统以及加热孵育系统，可以在流动、剪切力条件下实时的观察细胞的侵袭以及迁移等实验。德国ibidi公司为满足不同实验的需求设计了不同孔径的氮化硅膜（见图4）。ibipore与传统的transwell实验最大区别有三点：①. ibipore可以在上下两个通道中培养细胞，这样可以观察细胞向上的侵袭情况，排除以往实验中重力作用的影响；②. ibipore中间的氮化硅膜具有良好的光学特性，可以实时成像观察侵袭情况，也可以进行免疫荧光染色实验；③. ibipore可以配合ibidi流体剪切力系统，观察淋巴细胞等在流动状态下的侵袭情况。ibipore产品介绍ibipore产品特点：* 透过薄而多孔的薄膜获得卓越的光学性能* 有着广泛的应用，细胞可完全粘附到顶部-基底* 对于不同细胞类型有多种孔径大小可以选择应用：1.流动状态下跨内皮细胞迁移2.2D或3D凝胶内细胞层的共培养和传输分析3.顶部-基底细胞极性分析4.顶部-基底梯度的细胞屏障模型分析5.细胞迁移分析（例如，用于研究肿瘤侵袭或转移）在μ-Slide ibiPore IV型胶原涂层3μm孔径中人类内皮细胞的免疫荧光染色，相位对比度、DAPI（蓝色）、VE钙粘蛋白（绿色）和F肌动蛋白（红色）的叠加图像。技术特点：1.SiMPore的微孔氮化硅膜2.中间具有多孔光学膜的跨通道结构3.优异的光学性能，堪比盖玻片4.孔径大小0.5μm，3μm，5μm，8μm供选择5.中间膜0.4µ m（400 nm）6.使用工作距离0.5mm的物镜7.与ibidi泵系统（流体剪切力系统）完全兼容8.下部通道中明确的剪切力和剪切速率范围µ -Slide ibiPore SiN工作原理µ -Slide ibiPore SiN由插入两个通道之间的水平多孔膜组成。上部通道是膜上方的静态储液池。下部通道是灌注通道，用于对附着在膜上的细胞施加限定的剪切应力。上部通道和下部通道仅通过隔膜彼此连通。图2. ibipore组成示意图多孔膜由氮化硅（SiN）制成，这种材料具有非常高的化学和机械稳健性。400nm厚的氮化硅膜非常适合成像和显微镜观察，没有任何自发荧光或透明度问题（如玻璃）。SiN材料可以直接用于贴壁细胞培养，也可以选择用ECM蛋白包被。应用建议：孔径 & 孔密度什么是孔密度孔密度是指膜的空隙体积分数。是孔隙的体积除以膜的总体积。下面的图形为采用相同的放大倍数。图3. 不同孔径的氮化硅膜不同应用的建议孔径：不同的细胞大小和直径不同，根据具体实验请选择不同孔径图 4. 为不同应用推荐的不同孔径的氮化硅膜Intended Use经证实的应用这些应用已由ibidi研发团队或者我们的用户进行过试验。Endothelial Barrier Assays内皮屏障分析在膜一侧培养单层细胞。细胞可以在静止或者流动剪切力条件下培养。Co-Culture and Cell Barrier Assay共培养和细胞屏障分析在膜的两侧分别培养单层细胞。通过这种方法可以进行信号传递、共培养以及迁移实验（例如，分析药物通过上皮或内皮屏障的传递）。Apical-Basal Cell Polarity Assays顶端-?基底端细胞极性分析3D凝胶基质中的化学因子可以导向在膜另一侧培养的单层细胞的极性发生。Potential Use潜在应用以下示例将讲述该产品进一步的潜在应用。ibidi仍需在内部测试这些应用，因此我们无法提供特定的实验方案。但是，从技术角度来看，这些应用应该是可行的。Trans-Membrane Migration in 2D/2D跨膜迁移在膜的一侧培养单层细胞。可以观察悬浮的白细胞在流动状态下的滚动、粘附以及侵袭情况。Cell Transport in a 3D Gel Matrix细胞在3D凝胶基质中的传递3D凝胶基质中的细胞迁移：在流动状态下，观察白细胞的滚动、粘附以及向3D凝胶基质中肿瘤细胞方向的迁移情况。Application Examples 应用实例MDCK和NIH-3T3细胞的相差显微镜观察Madin-Darby犬肾（MDCK，左）和NIH-3T3（右）细胞在μ-Slide ibiPore SiN，孔径0.5μm的玻片中，无蛋白质包被。接种后，将细胞在静态条件下在培养箱中保持20小时。相差显微镜，4倍物镜。请注意，这张图像中的中心多孔区域看起来更暗，因为0.5μm的孔隙无法用低分辨率物镜分辨。流动条件下HUVECS的相差显微观察人脐静脉上皮细胞（HUVEC）在μ-Slide ibiPore SiN中，孔径3μm的玻片中，有纤连蛋白包被。将细胞接种并在具有ibidi泵系统/流体剪切力系统的流动条件（10达因/cm2）下在培养箱中保持12小时。固定后的相位对比显微镜，10倍物镜。流动下HUVECs F肌动蛋白细胞骨架的荧光显微镜观察人脐静脉上皮细胞（HUVEC）在μ-Slide ibiPore SiN，孔径5μm玻片中的免疫荧光染色，有纤连蛋白包被。将细胞接种并在具有ibidi泵系统/流体剪切力系统的流动条件（10达因/cm2）下在培养箱中保持12小时。绿色：肌动蛋白（鬼笔肽），蓝色：细胞核（DAPI）。荧光显微镜，20倍物镜。选择指南：ibidi跨膜分析实验解决方案参考文献：Salvermoser, Melanie, et al. "Myosin 1f is specifically required for neutrophil migration in 3D environments during acute inflammation." Blood, The Journal of the American Society of Hematology 131.17 (2018): 1887-1898. 10.1182/blood-2017-10-811851Rohwedder, Ina, et al. "Src family kinase-mediated vesicle trafficking is critical for neutrophil basement membrane penetration." Haematologica (2019). 10.3324/haematol.2019.225722Non-Recommended Applications不建议的应用因技术原因，本产品不适用于以下应用，应避免使用.本产品不适用于：1.上通道灌流2.两个通道的灌流3.跨膜流动4.筛选应用订购信息

p & nbsp & nbsp & nbsp & nbsp 近期，萧山卫生监督所执法人员在检查一家销售消毒、卫生用品的商户时，发现店内有14份客户登记表，登记表上记录有“双侧鼻腔粘膜红肿充血，鼻甲肥大，鼻道狭窄”“左侧苍白，鼻道狭窄，右侧凹凸不平，略有红肿充血，有溃疡面”等医学描述。 /p p 　　抓住这一线索，经仔细检查，在该店内查获了一台BR5000B电子影像检查仪。该店负责人承认使用这台仪器给来店客户检查鼻腔，并对鼻腔内病情进行描述、作出判断，达到推荐使用店内消毒、卫生产品的目的。更令执法人员震惊的是这台BR5000B电子影像检查仪的说明书明确记载“本仪器为光电设备，非医疗器械，” “用于人眼无法观察到的地方或无法拆卸分解的被测对象进行观察与检查，广泛用于机械工业、电子电器工业……”。也就是说商家使用了一台工业仪器，将探头伸入顾客鼻腔，用来检查鼻腔内的病情，这一情况令常年检查医疗机构的执法人员也非常震惊，决定对该商户立案查处。 /p p style=" text-align: center " img title=" edf9531cbd1755635214c7c2c7c9f48a_meitu_3.jpg" src=" http://img1.17img.cn/17img/images/201704/insimg/6dc3adee-cd7f-4ecc-a187-e5deaff62316.jpg" / p 　　经过调查核实，该商户的行为符合“《医疗机构管理条例实施细则》第八十八条—诊疗活动：是指通过各种检查，使用药物、器械及手术等方法，对疾病作出判断和消除疾病、缓解病情、减轻痛苦、改善功能、延长生命、帮助患者恢复健康的活动。”的定义 该商户未取得《医疗机构执业许可证》开展诊疗活动，依法予以没收器械，罚款等行政处罚。 /p p /p p /p /p

近两年贸易摩擦日益加重，由此引发的中美科技之争给世界分工带来了巨大冲击。宏观来看，“十四五”规划文件牵引、地方政策支持、国产采购倾斜，支持国产仪器发展似乎已经成为政府、市场以及公众的共识。巨浪之下，国产仪器企业的春天是否已经到来，进口品牌将如何更好地制定本地化策略？基于此，仪器信息网特别邀请广大科学仪器企业发表观点。本期，仪器信息网邀请到了北京莱伯泰科仪器股份有限公司董事长胡克博士发表看法。近两年，莱伯泰科的发展驶入快车道，公司于2020年成功登陆科创板，让更多行业外的人士知道了什么是实验分析仪器行业；紧接着又在2021年发布质谱新品，强势进军高端分析仪器领域，以发展高端仪器产业、助力中国制造腾飞为己任，锐意突破，不断进行产品革新。我们知道，发展国产高端分析仪器的道路必定不易，胡克博士是如何看待并规划的呢？北京莱伯泰科仪器股份有限公司董事长胡克高端产业的发展，离不开尖端分析仪器分析仪器，被称作科学家的“眼睛”，也被比喻为高端制造业皇冠上的明珠，是制造业发展中的咽喉行业。仪器仪表行业单从生产规模来讲，算不上大行业，但是它的重要性和战略性不能简单以生产规模来衡量。中国光学和仪器仪表及计量科教事业的奠基人之一、两院院士王大珩曾经指出，仪器仪表是认识未知世界的科学工具，也是控制生产过程的工具，是工业生产的“倍增器”。在制造业中，想要生产出合格的产品，从原料控制到成品质量控制，都需要仪器仪表进行测量。在高端产业中，要生产出尖端的产品，更是离不开最尖端的分析仪器，并且产业越高端，对于分析仪器的要求就会越严格，近乎苛刻。近几年来，随着我国产业升级速度的加快，各行各业对于高端分析仪器的需求亦不断增长。我们仅以理化分析仪器及装备（包含质谱）的进口额为例，从2017年到2021年，我国每年的进口额都在600亿元左右，而且逐年稳步增长，即便是疫情期间也丝毫未受影响。我国仪器仪表发展规模虽然不断扩大，但是一直存在基础研究薄弱、产品可靠性和稳定性低、以中低端产品为主等问题，高端仪器仪表、核心零部件等长期依赖进口。我国仪器仪表产品一直处于进出口贸易逆差的状态，逆差每年都在150亿美元以上，是机械制造业中逆差最大的行业之一。国产仪器在半导体行业举步维艰目前我国各行业中使用的质谱类仪器，几乎全部依赖进口。尤其是自中美贸易战以来全国上下共同关注的半导体行业，检测中必须具备的电感耦合等离子体质谱仪ICP-MS几乎百分之百来自于进口品牌。虽然国家在多个层面支持国内半导体行业的自主创新发展，然而，半导体行业中所用ICP-MS全面依赖进口依然是个不争的事实。在半导体行业中，ICP-MS被广泛应用于高纯材料、高纯化学品以及生产过程中杂质含量的监控。从应用角度来讲，半导体行业需要同时检测的元素范围非常广。因为无机元素杂质会对集成电路造成危害，比如碱金属与碱土金属（Li、Na、K、Ca、Mg、Ba等）污染会造成元器件漏电，造成低击穿；过渡金属与重金属（Fe、Cr、Ni、Cu、Au、Mn、Pb）污染会增大工作时的暗电流进而缩短元器件寿命；渗透元素（S、P、Si、As、Sb、B、Al等）污染具有扩散作用，会影响电子和空穴的数量。除了需同时检测轻、中、重元素外，随着集成电路对线宽的要求越来越严苛，对湿电子化学品的要求也越来越高，对有害粒子含量要求从10-6（ppm）发展到了10-9（ppb）甚至10-12（ppt），因此半导体行业需要检测仪器具有极高的灵敏度。由于行业具有的特殊性，半导体行业对ICP-MS仪器本身也具有极高的准入门槛要求，从仪器性能到仪器的安全可靠性，都有极为严格的规定。首先，在仪器性能方面，ICP-MS必须做到从Li到Pb，从轻元素、中元素到重元素的快速检测；能到达ppt级别的检出能力；针对高Si基体样品检测时的长期稳定性和重现性，每周7*24小时不间断运行；特殊情况下需要仪器冷焰、热焰快速稳定切换，高通量多元素准确检出；对整机及内部部件的洁净度、耐腐蚀性要求极高等等。其次，半导体行业对ICP-MS的安全可靠性方面也有着特别的要求。ICP-MS首先必须通过半导体工业的全球执行联盟（SEMI）的SEMI S2认证，这是一套适用于半导体及平面显示器制造设备的环境、安全及健康的效能的标准，半导体业者为了降低机械危害的风险，在采购设备系统时，将 SEMI S2 安规认证列为必备的规格要求。另一方面，半导体制造企业在水、电、气、化学溶剂、真空射频、微波、射线和高能粒子等方面也都提出了更高的要求。最后，半导体行业对于厂商服务水平的要求也远高于其它行业，例如必须24小时“on call”随叫随到，必要时需要工程师及时驻场；仪器出现故障必须在48小时之内修好，或者提供备用机服务；仪器安装时需要提供全部待检测化学品的分析方法，帮助用户提前建好分析方法；提供仪器与其它自动化进样设施的连接方法，包括硅片前处理装置、化学品在线进样装置等。 上述半导体行业对分析仪器及厂商的极高要求，最终体现在对仪器生产企业的生产技术、应用水平、售后响应速度等整体实力的要求上。而我国科学仪器行业整体技术实力与国外厂商相比还有明显差距，创新能力偏弱，这就造成了进口品牌在半导体行业独占鳌头的局面。 莱伯泰科潜心打造国产ICP-MS第一品牌，努力破局如何破局？如何打破进口品牌在半导体行业的垄断？莱伯泰科一直在行动，在努力发展自主创新，保持埋头苦干的同时，也密切关注着整个行业的动向，时刻保持着抬头看路的清醒。从2019年开始，莱伯泰科便着手组建了一支优秀的ICP-MS研发团队，投入大量资金和人员，努力以自有技术攻破壁垒，以打造国产ICP-MS第一品牌为目标，在仪器的智能化、系统化、自动化方面创新突破以实现差异化的发展。不论是技术储备还是对ICP-MS的深刻理解，莱伯泰科都有着得天独厚的优势。莱伯泰科董事长胡克博士师从ICP-MS发明人Houk教授，对于ICP-MS有十五年的深入研究，并且取得了很多成绩，例如他在全球率先采用了偏转型的离子透镜，抛弃了当年的挡光板，能更加有效地阻挡光子的进入，目前几乎所有的商用ICP-MS都采用偏转离子透镜的方法；其次，将进样锥口的孔径增大至1.1mm同时设计分级真空提高抽速，不仅使更多的离子进入质谱同时还降低了干扰，提高了检测灵敏度和适用性；最后一点，胡博士还设计了一种接口处加电压的方法，让进入离子本身具有更高动能，如今市场上的高灵敏质谱就采用这一技术。这一系列的开创性工作，为许多仪器公司开发质谱的技术提供了依据和参考。在这次ICP-MS的研发过程中，莱伯泰科对半导体行业进行了细致入微的研究和调查，并与多家国内著名半导体企业开展技术合作，终于，在2021年5月18日，莱伯泰科正式推出了首台LabMS 3000 电感耦合等离子体质谱仪。LabMS 3000 电感耦合等离子体质谱仪LabMS 3000在整机设计、进样系统材料、锥接口、锥材料以及碰撞反应池、冷热焰模式等方面都做出了独特的设计和改进。除了通过SEMI S2认证外，也能满足大部分Wafer Fab企业的高安全要求。LabMS 3000采用了高稳定性和高耐受性的质谱硬件，可以提供良好的基体耐受性，带来了新一代的高性能、长寿命检测器，采用脉冲、模拟双模式同时型电子倍增器，可在一次运行中实现常量元素（数百或数千 ppm）与痕量元素（ppt 或亚 ppt 级）的直接分析，简化分析方法和分析时间。LabMS 3000还具有三种高性能去除质谱干扰功能，包括质量校正方程、冷焰模式和第四代碰撞池技术，可消除棘手的多原子和双电荷离子干扰，避免降低数据质量，同时可减少高成本的样品重新测量需求。LabMS 3000配备的HiMass 软件，是软件团队专为中国用户打造的软件平台，拥有良好的逻辑性和便捷性。HiMass采用直观的任务导航栏和工具栏，把智能与流程化相结合引进到仪器控制与操作流程上，更符合中国人操作习惯，并可以确保高效、准确的运行与分析结果，支持中英文语言实时切换、数据上传、接入实验室管理系统和定制报告格式模版。HiMass软件，可以自定义质谱运行日程安排，自动化完成从等离子体点火、自动启动性能检查和优化、自动跳转至方法和序列，完成数据采集和自动生成报告，适用于实验室的各种分析需求。除了上述LabMS 3000各种软硬件的优势之外，莱伯泰科本身在应用方法的开发和售后服务上，也有自己独特的优势。在组建研发团队的同时也打造了一只技术过硬的应用团队，针对行业特点开发不同样品检测方法的同时，凭借已有的全自动前处理技术，定制化的开发了全自动进样系统。莱伯泰科历经近20年的发展，售后服务网络更是覆盖了全国，可以提供高质量的售后服务，以满足半导体行业的特殊需求。莱伯泰科LabMS 3000上市之初，首发行业选择的是半导体行业，很多人表示不理解，对于国产仪器进军半导体行业不看好。但是，胡克博士认为，困难的事情总得有人去做，在这个看实力的年代，需要的是破局的能力和决心，而不是原地踏步、固步自封。莱伯泰科有实力也有决心和信心，做就一定要努力做到最好，飞必冲天，鸣必惊人。“只要我们心存理想，脚踏实地，潜下心来打造国产ICP-MS第一品牌，赶上进口高端分析仪器不会只是一个遥远的梦。”胡克博士说道。