西那卡塞

畜牧业是我国经济发展的重要组成部分，对于基层养猪户来说，由于受多种外在因素的影响，养猪场会出现多种猪类相关疾病。对于猪场养殖户来说，猪仔患病，如果诊断治疗不及时，有可能带来巨大的经济损失。常见猪类疫病如口蹄疫等多是由病毒引起，塞内卡谷病毒（SVV）也是其中一种。 山东师范大学生命科学学院硕士研究生导师陈蕾教授课题组在《Analytical Biochemistry》新发表了题为Recombinase polymerase amplification assay for rapid detection of Seneca Valley Virus 的研究论文，探讨研究了重组酶聚合酶扩增 (RPA)快速检测SVV的方法。 摘要内容塞内卡谷病毒（SVV）的快速准确检测对于确定致病因素和启动控制措施的实施至关重要。 开发可在样品采集点使用的快速、简单、方便和低成本的分子（核酸扩增）测试方法已被确定为控制塞内卡谷病毒（SVV）的关键要素。作者研究团队描述了针对 SVV 保守区域的重组酶聚合酶扩增 (RPA) 测试的开发，以用于检测 SVV。 研究人员设计的引物和探针在RPA检测中表现出良好的敏感性和特异性，有助于RPA成为快速诊断SVV的有效工具。 背景介绍2002年，美国研究人员偶然从PER.C6细胞（转化的胎儿成视网膜细胞）培养基中首次发现并分离到一种新的病毒——塞内卡谷病毒（Seneca Valley virus，SVV，又称Seneca virus A，SVA）。塞内卡谷病毒（Seneca Valley Virus，SVV）属于小RNA病毒科塞内卡谷病毒属中的一员，临床症状与其他水疱病临床症状如口蹄疫类似，引起新生仔猪大量死亡和成年猪口部和蹄部出现水泡。自2002年确定以来，SVV主要在美国和加拿大零星散发，但自2014年年底后，SVV先后在多个国家大范围流行。2015年传入中国以后，SVV先后在福建、广州、湖南、湖北、安徽、江苏、浙江、河南、河北、辽宁、黑龙江等12个省份引发疫病。塞内卡谷病毒（SVV）传播特性与口蹄疫病毒类似，且与口蹄疫病毒存在混合感染，严重干扰了口蹄疫的防控。 目前多种分子技术手段已被用于检测塞内卡谷病毒（SVV），包括聚合酶链式反应 (PCR)、滚环扩增 (RCA) 和环介导等温扩增 (LAMP) 等。 在现有的等温扩增技术中，重组酶聚合酶扩增 (RPA) 可能是最适用于现场和即时诊断（point-of-need diagnosis）的方法。RPA利用低温孵育（37–42℃）进行反应 ，只需最少的样品制备，且扩增时间短（约20分钟），灵敏度高（每个反应1-10 copies）。本研究介绍了SVV保守区引物和探针的设计，并评估了其在RPA实验中的表现。 实验方法：试验中用到的塞内卡谷病毒（SVV）cDNA、口蹄疫病毒 (FMDV) cDNA、猪呼吸与生殖综合征病毒 (PRRSV) cDNA、猪瘟病毒 (CSFV) cDNA、猪流行性腹泻病毒 (PEDV) cDNA、传染性胃肠炎冠状病毒 (TGEV) cDNA和阴性猪cDNA均由山东省疾病预防控制中心提供。本研究中使用的病毒样本均在阴性猪cDNA 中稀释到一定浓度。经基因工程技术把靶标基因克隆装载到特定载体中，得到重组质粒 pET-32a SVV，重组质粒浓度为300 ng/μL。类似实验操作的得到其它病毒质粒 (pET-32a-FDMV, pET-32a-PRRSV, pET- 32a-CSFV, pET-32a-PEDV, pET-32a-TGEV)。之后设计并合成特定引物及探针，进行重组酶聚合酶扩增 (RPA) 测试，实验反应在等温扩增荧光检测仪（H1600，柏恒科技）上进行，在 42°C 温度条件下开始扩增，反应约20分钟。产生高于阴性对照阈值的指数扩增曲线的样品被认为是阳性的。后续研究团队对RPA进行了特异性、敏感性及重复性的分析，结果均显示良好。 结论：该研究描述了RPA法检测SVV的特异性引物和探针，具有良好的灵敏度和特异性，快至8分钟即可产生阳性结果，一般不超过20分钟。 塞内卡谷病毒（SVV）RPA检测是在柏恒科技的等温扩增荧光检测仪H1600上进行的，仪器体积小，重量轻，方便携带。实验结果表明，特异性引物和探针有助于RPA技术成为SVV快速检测的良好候选技术。它可以检测患病动物，以便及时治疗和控制感染传播。 实验中用到的等温扩增荧光检测仪H1600为柏恒科技生产，仪器检测快速，体积小，可用于便携式操作，适用牧场、林场、动物疫病检测等多场景。 此外柏恒还提供动物疫病检测解决方案，我们提供包括离心机、金属浴、PCR仪等全流程实验仪器，更多内容，欢迎咨询联系。 参考文献：[1] A.J. Bracht, E. O’Hearn, A.W. Fabian, R.W. Barrette, S. Abu, K. Bernhard, Real-time reverse transcription PCR assay for detection of senecavirus A in swine vesicular diagnostic specimens, PLoS One 11 (1) (2016), e0146211.[2] M.E. A, Y.W. B, O.N. C, O.P. C, F.T.H. A, M.W. A, Recombinase polymerase amplification assay for rapid detection of Rift Valley fever virus, J. Clin. Virol. 54 (4) (2012) 308–312.[3] M. Euler, Y. Wang, P. Otto, H. Tomaso, M. Weidmann, Recombinase polymerase amplification assay for rapid detection of francisella tularensis, J. Clin. Microbiol. 50 (7) (2012) 2234–2238.[4] J. Wang, Y. Zhang, R. Zhang, Q. Han, J. Wang, L. Liu, R. Li, W. Yuan, Recombinase Polymerase Amplification Assay for Rapid Detection of Porcine Circovirus 3, Molecular & Cellular Probes, 2017, S0890850817300890.

由岛津（上海）实验器材有限公司主办的药斯卡争霸赛（以下简称“药斯卡”），从2020年至今已经成功举办三届。围绕每届不同的药物分析主题，药斯卡共吸引了来自全国各地超过300多份优质投稿。往届的参赛老师们大显身手，纷纷提交分离分析检测优质作品，各路神仙打架，赢取丰厚礼品，好不热闹！现在“提速药分，高效前行！”第四届药斯卡争霸赛已经正式开启！点击下方链接，先报名，再投稿，就有丰厚好礼等你来拿！点击立即报名⬇ ️ 点击立即投稿上期我们一同回顾了部分历届作品，这次让我们继续回顾化药领域的优秀作品，希望它们能成为榜样，促进药物分析研究的进步。优秀作品01“异构体"的分离分析考验着色谱柱的性能和实验人员的技能。第三届药斯卡”寻找分离分析检测高手”，高手云集，各显其能。下面这位老师使用了岛津Shim-pack Scepter C8-120 (4.6mm×150mm, 3μm)色谱柱，优化色谱分析条件，成功解决异构体分离难题，峰型良好。《复方制剂中格隆溴铵异构体的分离》色谱条件：色谱柱：Shim-pack Scepter C8-120，4.6×150mm，3μm波长：UV222nm流速：0.6ml/min柱温：20℃流动相：20mmol磷酸二氢钠&20mmol六氟磷酸钾水溶液（pH6.5）-异丙醇（80:20）化合物有2个手性中心，USP与EP均采用手性色谱柱进行分离，但制剂样品磷酸盐吸附柱效下降较快，辅料和主成分降解产物易造成干扰，且批次干扰表现不同。尝试所有C18柱分离度及灵敏度均无法满足要求。此时发现Shim-pack Scepter C8色谱柱比C18具有更高的官能团密度，具有更好的立体选择性，并且C8柱也能解决C18上保留过强的问题！流动相选用了异丙醇改善分离，加入六氟磷酸钾获得了更好的峰形。最终解决了制剂干扰及保留时间过长的问题。优秀作品02第二位老师遇到的是气相分离的问题，筛选对比了多家气相柱，最终选择了分离最优的岛津SH-Wax(30mx0.53mm, 1.0um) 气相色谱柱，该色谱柱可以分离山嵛酸甲酯和芥酸甲酯。《山嵛酸甘油酯中6个脂肪酸的分离》色谱柱：SH-Wax（30m×0.53mm,1.0μm）起始温度：70°C，维持2分钟，以每分钟5°C的速率升温至240°C，维持24分钟进样口温度： 220°C检测器温度： 260°C按照药典通则0713中脂肪酸组成规定测定条件下，在检测山萮酸甘油酯时山嵛酸甲酯和芥酸甲酯分离很难满足要求。通过筛选发现使用岛津SH-Wax 的两峰分离度大于2、峰型较好，不同批号色谱柱重现性较好，耐用性也较好（改变测试参数仍有很好分离效果）。但其它品牌的相同规格Wax的色谱柱山嵛酸甲酯和芥酸甲酯分离效果较差，不符合要求，各脂肪酸峰型较宽。大赛开启看了上面老师们优秀的药物分析作品后，您是不是也有灵感了呢？岛津第四届药斯卡争霸赛——“提速药分，高效前行”已经火热开赛！快点击下方通道先报名再投稿吧！2024年7月5日23:59前，提交报名表后还可参与答题有奖活动，好礼多多不容错过！点击立即报名⬇ ️ 点击立即投稿更多优秀作品由于篇幅有限，我们把更多优秀的参赛作品整理成册，希望大家能从各位参赛老师们的作品中获得启发，一同促进药物分析行业的繁荣发展。点击查看完整往期精选集

德国IKA 闪耀赞助“兰州大学第九届全国大学生化学竞赛”2014年7月12日，第九届全国大学生化学实验邀请赛开幕式在兰州大学学生活动中心报告厅隆重举行。作为国家高等学校化学学科最高级别的赛事，历届大学生化学竞赛都承载了全国各高校本科生教学专家及学生们的诸多期待，甚至越来越具有一种风向标式的影响力。本次比赛共有来自全国42所高校的126名选手及200多名教授专家参与，除了紧张刺激的比赛之外更有各位专家奉上的精彩绝伦的演讲报告。作为化学前处理领域的国际领军企业，IKA一直以来都致力于参与高校尤其是本科生教育事业的发展与壮大。除了在很多重点高校设立专项奖学金，进行仪器设备支持之外，IKA更是历届大学生化学竞赛上不可或缺的一份子，从实验设备，到赞助支持，每一步我们都希望参与其中，为越来越现代化的教学模式、越来越高端的实验条件、越来越优秀的化学人才贡献来自IKA的一份力量。本届大学生化学竞赛，IKA全程参与了活动的赞助，无论是在比赛现场，还是校园内外，随处都可以见到IKA的logo，“IKA的磁力搅拌器”、“IKA的各项福利赞助”也成为了这几天兰州大学校园里最常听到的话题。庄严肃穆的开幕式会场，有了IKA的点缀，是不是多了些许的温馨与体贴？在大会主席台，在报告厅门口，在茶歇处，在实验室，在每个老师触手可及的位置上，IKA的关怀随处可见，唯愿在这个炎炎夏日，可以给每一个人带去一份清爽，一份温馨。福州大学的郑主任同我们开玩笑说，“这几天脑子里印象最深的就属IKA这三个字母了”，这样的评价对我们来讲，实在是莫大的骄傲。如每一次展会一样，IKA的展台也是一直人头攒动，不少是来自天南海北的老用户，如同一个个熟悉的老朋友一般来聊一下近期使用IKA仪器的感受，也有很多慕名而来的新朋友，但是不管是第一次接触IKA还是已经使用多年的老用户，无一不对我们全新推出的全球顶级磁力搅拌器以及可以实现全自动蒸馏的旋转蒸发仪赞不绝口，连连感慨当今仪器设备发展的日新月异以及IKA在产品创新上的强大和前卫。无论是在其他展台驻足的客户，还是不经意在某个转角遇见的聚在一起讨论问题的实验专家，似乎到处都是IKA的身影和标志。真心感谢各位老师，分分钟都是宣传IKA的节奏. 当然，这所有的风景中，最不能缺少的就是实验中的IKA设备了。无论是有机化学实验还是无机化学实验，IKA的磁力搅拌器都无疑是每个通风橱中最主要的设备，清新明媚的蓝色也成了本次实验比赛中最醒目的颜色。学生们比赛之后的都纷纷反馈仪器设备非常先进。在赛后的实验室参观中，每一个通风橱前都有老师们在讨论着IKA的磁力搅拌器的各项强大功能。各高校的领队老师们也盛赞本次比赛的实验室从装潢到设备，无一不体现了高端大气的风格，甚至有老师特意来要求与我们一起进行参观，咨询我们能否按照本次比赛的风格，在他们的学校共建一个类似的样板实验室。这个，真的让人有些受宠若惊，又有些骄傲呢在所有的比赛都结束后，本次比赛的主办方，兰州大学化学化工学院院长及本次大赛的负责主任，连同下届大学生化学竞赛的承办方也专程来到了IKA的展台，表示感谢之余，也同我们市场部的同事详细交流了本次赛事的多方面感受。兰大的各级领导对IKA的产品和各项服务给予了极高的评价，并将其一一介绍给了下一届的主办方，其化学实验中心张主任表示一直以来都是IKA的忠实用户，并且保持着密切的合作，也希望我们有机会可以再去实地拜访，同他们一起把下一届的大学生化学竞赛也做到如此细致温暖、尽善尽美。在此，忠心感谢兰州大学化学化工学院各位领导给予的这次机会，谢谢全国所有老师学生一直以来的信任与支持。 IKA势必会将服务于高校的理念继续保持与发扬下去，为化学领域的本科生教学及研究生教育做出我们自己的贡献！全国大化赛，我们两年后之后见！ 关于 IKA? ( www.ika.cn ) IKA 集团是实验室前处理, 量热分析, 混合分散工业技术的市场领导者. 磁力搅拌器, 顶置式搅拌器, 分散均质机, 混匀器, 恒温摇床, 研磨机, 旋转蒸发仪, 加热板, 恒温循环器,量热仪, 实验室反应釜等相关产品构成了IKA实验室分析的产品线, 而工业技术主要包括用于规模生产的混合设备, 分散乳化设备, 捏合设备, 以及从中试到扩大生产的整套解决方案. 集团总部位于德国南部的Staufen, 在美国,中国, 印度, 马来西亚, 日本, 巴西等国家都设有子公司. IKA成立于1910年，IKA集团现在可以自豪地回顾过去100年的历史。