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最近我养细胞发现小黑点现象很严重,原来对“黑胶虫”一说嗤之以鼻,认为那不过是自欺欺人的借口,觉得怎么也不会发生在自己身上。但是真的就碰上了:要来的细胞传代以后就出现细胞间黑点,细胞空泡化,很多类似凋亡、坏死的细胞,最终细胞漂浮,完全死亡。上述现象很像所谓的“黑胶虫”。我感觉实际是支原体感染以后细胞生长不好造成的碎片和感染原虫的混合体。这种现象的直接原因是支原体等原虫感染,间接表象是小黑点,被以讹传讹成为了“黑胶虫”。光镜下看不到支原体,但是可以看到支原体感染的终末现象——细胞凋亡坏死,释放出大量碎片,看起来就像小黑虫子。查找类似的帖子——很多人是更换血清后出现这种问题;说空气传播的可能是一个培养箱的人都用了同一种血清,而不是可以通过培养箱空气传播;感染最可能是牛源性的支原体,通过产道或血行感染,所以兽用的泰乐菌素比较有效。用plasmocin等抗支原体的药物有效;用巨噬细胞共培养有效(吞噬支原体);很多人更换进口血清就好了。感染也有个疾病谱,在质和量上从低烈度到高烈度,所谓“细胞生长不受影响”,其实是感染的烈度不高而已;烈度高的感染就出现细胞大量空泡形成,细胞间空旷地带出现大量黑点,细胞最终凋亡、坏死,漂起来。有些国产血清写着建议灭活,其实是挂羊头卖狗肉,那个56度30分钟更多的是为了杀杀支原体的。实际上也有杀不死的。但可以降低产品的风险。我用阿奇霉素(有针对支原体衣原体功效)75-100ug/ml的浓度洗了细胞和加入培养基中,小黑点确实明显抑制。不过我想根治就很难了。据说invivogen公司的plasmocin可以根治,不过就成本来说不如直接更换血清。以上是自己个人总结的一点看法。建议不要总拿子虚乌有的“黑胶虫”来说事。多考虑看不到的支原体,不要还停留在培根时代——只相信自己眼睛看见的。
本来今天应该上班的,可半夜孩子发烧了,今天去医院看了下,血常规一出来,医生怀疑是肺炎支原体感染。说是要做个支原体检测。收费70块哦。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012238_575900_1702689_3.jpg贫僧也做过支原体试剂盒的,一看取报告时间觉得不错,第二天就可以出结果,也就是最多培养24小时,只是不清楚他们只看阴阳性还是连同药敏一起做了。交了费用,从检验科领了支培养液。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012243_575901_1702689_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012243_575902_1702689_3.jpg去找护士做咽喉部取痰。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012244_575905_1702689_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012245_575906_1702689_3.jpg应该是碰到咽部了,孩子有点呕吐的感觉了。将取过痰的棉拭子放入培养液瓶中,折断,只留用棉拭子。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012247_575908_1702689_3.jpg将培养液交还检验科。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012248_575909_1702689_3.jpg时间仓促,未能找到该产品的说明书,但找到了相关资料。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012250_575910_1702689_3.jpg原先做过Uu和Mh的检测试剂盒,Uu是解脲支原体,24h时判读结果,Mh是人型支原体,48h时判读结果。原理是对N的利用不同,引起PH变化,最终从阴性(黄色)到阳性(红色)的变化。如下图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/12/201512012304_575913_1702689_3.jpg这次的培养液很少,估计1.5ml以内,所以拿去做药敏的可能性很小。肺炎支原体属于人型支原体,比较有意思的是在这种快速培养法中是如何排除Uu的影响的。难道是加入了美满霉素?这种红霉素的衍生物对Uu有较好的抑制作用,且敏感性好。但是如何把培养时间从48h缩短到24h就不得而知了,应该是加入了其他的促生长因子吧。如果能看到说明书就好多了。欢迎一起讨论,一只培养液70块,还是很有搞头的。
首先,我们要准备好硬件,既然是支原体微生物,肯定要用到培养箱。既然是培养的人体内微生物,培养箱肯定是37℃±1℃。再者,微生物培养用得到载体物,比如平板什么的,这里用的是孔。微生物也不能老饿着不是,还得有培养基。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/2015021011380401_01_1702689_3.jpg图中黄色液体就是培养基。板上的孔就是用来装支原体的。哇,原来这样啊,还以为是装13的呢!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09507.gif你下去!口味这么重!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif检验的标本都是什么啊?http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09511.gif尿,尿道分泌物,精液,前列腺液,宫颈分泌物。歪,我就是说说,你一大老爷们脸红个屁啊!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09501.gif采样又不用你管!采样可以用棉拭子,液体的话就用小杯子好了。这个可以吗?http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502101201_535093_1702689_3.pnghttp://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09510.gif准确的讲,只要是无菌的,也可以,但请你不要拿我的水杯来举例子!http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09504.gif杯子来啦!http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/02/201502101202_535094_1702689_3.jpg对嘛,这个才正常。先休息下,一会再讲操作