产氨短杆菌

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  • 解读产志贺毒素大肠杆菌O26

    一、背景信息  近日,据美国食品安全新闻网消息,由美国墨西哥风味连锁餐厅Chipotle食物中毒引发的产志贺毒素大肠杆菌O26疫情在美国蔓延,导致20人住院。美国疾病预防和控制中心(CDC)称,近两年来由产志贺毒素大肠杆菌O26引发的食物中毒事件明显增多,在未来可能引发更多的疫情,尤其是引发溶血性尿毒综合症的病例数量可能会远超过产志贺毒素大肠杆菌O157。二、专家解读  (一)产志贺毒素大肠杆菌是全球最重要的新发高致病性食源性病原菌。  产志贺毒素大肠杆菌(Shiga toxin-producing Escherichia coli,简称STEC)是一类携带了前噬菌体编码一种或两种志贺毒素基因的新发高致病性食源性病原菌,包括大肠杆菌O26,以及O157、O45、O103、O104、O111、O121、O145等150多种其它血清型的大肠杆菌。该菌为革兰氏阴性杆菌,无芽胞,有鞭毛。可以在10—65℃生长,最适生长温度为33—42℃,具有较强的耐酸性(pH 2.5—3.0),可以抵抗胃酸的消化作用。  据不完全统计,美国1983—2002年发生的非O157的STEC感染者中,70%是由O26、O45、O103、O121、O111 和O145血清型所致;2011年9月,美国农业部食品安全检验局曾发布通告,强调大肠杆菌O26是美国最常见的非O157 STEC。爱尔兰对肉和乳制品中非O157 STEC的分布特征研究发现,血清型O26也是引起人类食源性疾病最主要的非O157血清型。STEC O26已逐渐成为美国、日本及部分欧盟发达国家引起暴发事件的主要病原菌。  (二)肉制品是引发食源性STEC感染的主要高危食品。  牛、羊等经济型动物是STEC的天然宿主,国际相关研究发现牛和羊中STEC携带率可高达71%甚至以上。美国农业部(USDA)和欧盟食品安全局(EFSA)也证实养殖场中存在高风险污染的STEC,并且可以通过环境、粪便、野生动物、土壤等在一定范围内循环存在,最终造成肉制品等污染。1982—2006年多个国家STEC暴发事件的归因分析表明,最主要原因是肉制品污染(42.2%),其次是乳制品(12.2%)。除此之外,生鲜果蔬及其制品等也可能是STEC O26重要的传播介质。通过对美国1992—2002年期间24起STEC暴发事件统计发现,67%的疫情是由牛肉制品导致的,其中O26是最主要致病血清型。  (三)国际组织及部分国家和地区已对肉制品中STEC污染给予高度重视。  1999年第32届食品卫生法典委员会(CCFH)会议上,各国政府对食品中的微生物风险应按“食品—病原”组合进行风险管理达成共识,其中就包括“牛肉中大肠杆菌O157”。联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)食品微生物风险评估联合专家组(JEMRA)于2011年发布了风险评估会议报告(Enterohaemorrhagic Escherichia coli in raw beef and beef products: approaches for the provision of scientific advice),为如何控制生牛肉及牛肉制品中的出血性大肠杆菌提供了科学建议。但是,迄今CCFH尚未对如何应用食品卫生通则控制牛肉中的出血性大肠杆菌制定相关科学导则,也未制定相关产品的限量标准。  2012年3月,USDA宣布强制执行在初加工的牛肉制品中不得检出六大类非O157 STEC(O26、O45、O103、O121、O111 和O145)。2011年德国发生STEC O104暴发事件后,欧盟也加强了对STEC的监测和评估工作,已连续5年对食品和病人中的STEC进行监测。

  • 革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌

    革兰氏阳性芽孢杆菌和球菌,该类群中与食品关系密切的菌属如下。1.芽孢杆菌属(Bacillus)该属可形成芽孢,对不良环境条件有很强的抵抗力。需氧或兼性厌氧,绝大多数菌种产生过氧化氢酶。该菌广泛分布于土壤、植物、腐殖质及食品上。其中包括人和动物的病原性细菌炭疽芽孢杆菌(B.anthracis)、食物中毒性细菌蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、昆虫的病原菌苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、可用于食品工业生产的枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。此外,也包括一些可引起食品腐败变质和食物中毒的菌种。(1)蜡样芽孢杆菌(B.ccrcl2S):该菌广泛分布于土壤、水、调味料、乳及咸肉中,污染牛乳后可产生卵磷脂酶,破坏脂肪球膜,使得脂肪不能很好地乳化,还可以产生类似凝乳酶的酶,使乳在酸度不高时即可发生凝固。蜡样芽孢杆菌的生长温度为10~48℃,pH值为4·9~9·3,发芽温度范围为1~59℃。该菌污染食品后,可以引起食品腐败变质,并且产生下痢性毒素、肠毒素、溶血素、呕吐毒素及肠管坏死毒素等,引起人食物中毒。(2)枯草芽孢杆菌(B.subtilis):该菌菌落呈圆形或不规则形状,表面粗糙或有皱纹,呈奶油色或褐色,菌落形态与培养基成分有关。枯草芽孢杆菌污染面粉后,可以使发酵面团产生液化黏丝状现象,使烤制的面包**头出现斑点或斑纹,并且伴有异味。在肉类表面可产生黏液并有异味。在肉类罐头及其他肉制品上经常可以分离到该菌,但在密封的罐头中较少引起变质。在牛乳中生长,可以使牛乳变稠,有时在不变酸时使牛乳凝固,即产生所谓的甜凝乳现象。(3)巨大芽孢杆菌(B.megaterium):该菌可以在含氨的环境中生长,不需要生长因子,无卵磷脂酶活性。在厌氧条件下,于葡萄糖肉汤中不生长,多数菌株可在培养基中产生黄、粉红、褐或黑色色素。适宜生长温度为28~37℃。该菌可以从鲜乳、消毒乳、于酪、肉类等食品中分离到,可使浓缩乳凝固并产生干酪味和气体,使肉类罐头变质胀罐。(4)嗜热脂肪芽孢杆菌(B.stearothermophilus):该菌菌落为圆形或不规则圆形小菌落,表面光滑或粗糙,能在49~65℃范围内生长,对热的抵抗力很强。该菌在pH值5.0以下的培养基上不生长。该菌主要可引起罐藏食品和淀粉类食品的腐败。(5)凝结芽孢杆菌(B.coagulans):该菌菌落为不透明的小菌落,生长温度范围为18~60℃,可在酸性条件下生长。在有氧条件下于葡萄糖肉汤中生长,产生醋酸、乳酸和CO2。在厌氧条件下主要产生乳酸,不产气。该菌能在pH值3.5~**5的食品中生长,引起食品变质,罐头食品变质后外观不膨胀。在炼乳罐头中,通常使乳形成坚实凝结,偶尔呈碎片状凝结,并有乳清析出。此种变质亦常发生于含有蔗糖的乳制品中。2.梭菌属(Clostridium)该属的绝大多数种为厌氧菌,只有少数种可在大气条件下生长,但在大气中不形成芽孢。该属菌形成的芽孢多呈球形,位于菌体中央,使菌体呈梭状。对不良环境条件具有极强的抵抗力。该属菌对营养的需要因菌种不同而异。可耐受2.5%~6.5%NaCl浓度的渗透压,对亚硝酸钠和氯敏感。梭菌广泛分布于土壤、下水污泥、海水沉淀物、腐败植物、食品、人和其他哺乳动物的肠道内。该属中的一些菌种如丁酸梭菌(C.butyricum)可分解碳水化合物产生各种有机酸(乙酸、丙酸、丁酸)和醇类(乙醇、异丙醇、丁醇),在食品加工上可用于生产某些酸、醇和酮类。一些菌种如腐化梭菌(C.putrefaciENs)分解蛋白质和氨基酸,产生H2S、硫醇、甲基吲哚(粪臭素)等具有恶臭味的腐败产物,在乳中生长时可使乳中酪蛋白完全胨化,在熟肉上生长使肉变黑,在罐头中生长时,因产气使罐头发生膨胀。肉毒梭菌(c.botulinum)在食品中增殖时可产生肉毒毒素,当人们食入含有该毒素的食品时,可发生毒素型食物中毒,早期症状为全身无力、头痛、头晕,继而出现眼睑下垂、视力模糊、瞳孔散大、吞咽困难等症状直至死亡。此外某些梭菌如破伤风梭菌(C.terni)是人和动物的破伤风病病原菌。

  • 大肠杆菌O157:H7

    一、概述及分类肠杆菌科是由多个菌属组成,生物学性状相似,均为革兰氏阴性杆菌,这些细菌常寄居在人和动物的消化道,并随粪便排出体外,广泛分布在水和土壤中,大多数肠道杆菌属于正常菌群。当机体免疫力降低或侵入肠道外组织时,成为条件致病菌而引起疾病。部分肠道杆菌是致病菌。例如:产毒大肠埃希氏菌、伤寒沙门氏菌、各种志贺氏菌可使人患肠道传染病。肠杆菌科细菌种类繁多,主要根据细菌的形态,生化反应,抗原性质以及核酸相关性进行分类。肠杆菌科的细菌分为20个属。1、 什么是大肠菌群?大肠菌群名称并非细菌分类命名,而是卫生细菌领域的用语,它不代表某一个或某一属细菌,而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,这些细菌在生化反应及血清学方面并非完全一致。大肠菌群:需氧及兼性厌氧,在37℃能分解乳糖,产酸,产气的革兰氏染色阴性无芽胞杆菌。一般认为该菌群细菌可包括:大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷白氏菌和阴沟肠杆菌等。目前已被国内外广泛应用于评价食品卫生质量的重要指标之一。2、 什么是大肠杆菌?埃希氏菌属的代表菌种是大肠埃希氏菌。大肠埃希氏菌俗称大肠杆菌,它是人类和动物肠道正常菌群的成员,随粪便排到自然界,并污染食品,本菌是组成水、食品中大肠菌群成员之一,其数目多少代表粪便污染和程度。能引起肠道感染的大肠埃希氏菌有下列五个病原群(1)肠产毒性大肠埃希氏菌(ETEC)产生ST、LT、引起婴儿、旅游者腹泻。(2)肠致病性大肠埃希氏菌(EPEC)寄居十二指肠、回肠、空肠。引起婴儿腹泻。(3)肠侵袭性大肠埃希氏菌(EIEC)有侵袭力,痢疾样症状。(4)肠出血性大肠埃希氏菌(EHEC)引起出血性结肠炎,主要菌型O157。(5)肠粘附性大肠埃希氏菌(EAEC)损害肠细胞外毒素,引起小儿顽固性腹泻。3、 什么是大肠杆菌O157:H7? EHEC O157:H7属于肠杆菌科埃希氏菌属。它是肠出血性大肠杆菌(EHEC)的主要血清型。

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  • 华端生物基于GB/T 5750-2023《生活饮用水标准检验方法》的产气荚膜梭状芽孢杆菌整体解决方案
    2023年3月17日经国家市场监督管理总局(国家标准化管理委员会)批准发布GB/T 5750-2023《生活饮用水标准检验方法》系列标准,代替实施16年之久的GB/T 5750-2006 《生活饮用水标准检验方法》。新标准将于2023年10月1日起正式实施。 GB/T 5750-2023标准历时5年,经过了3轮意见征求,有280+单位参与研制与验证,有超过500名行业专家参与的GB/T 5750修订工作,最终大功告成。本次修订微生物指标主要内容:新增肠球菌和产气荚膜梭状芽孢杆菌两个检测指标、3种检测方法和增加菌落总数酶底物法新方法。其中产气荚膜梭状芽孢杆菌是新增检测指标,有些老师不清楚检测过程中需要用到哪些设备,我们根据标准的要求做个简单介绍。根据标准要求我们需要准备以下仪器和耗材:1. 电子天平:实验室常用仪器2. pH计或精密pH试纸:实验室常用仪器或耗材3. 恒温培养箱:实验室常用仪器4. 冰箱:实验室常用仪器5. 恒温水浴箱:实验室常用仪器6. 显微镜:实验室常用仪器7. 无菌吸管:实验室常用耗材或仪器8. 无菌试管:实验室常用耗材9. 无菌平皿:实验室常用耗材10. 厌氧培养装置:华端生物HD-AN系列智能厌氧微需氧培养系统11. 过滤设备:华端生物HD-F系列水中微生物膜过滤装置12. 滤膜:实验室常用耗材13. 无齿镊子:实验室常用耗材其他会用到的设备:HD-C系列菌落计数仪、HD-DT系列自动样品稀释仪、HD-GM系列全自动革兰氏染色仪、HD-S系列自动培养基分装仪、HD-MA系列自动微生物生化鉴定系统产气荚膜梭状芽孢杆菌检测流程图一、 样品1. 污染较轻的水样,可直接取100 ml水样进行检验。2. 污染严重的水样,可使用0.1%缓冲蛋白胨水将水样按10倍系列稀释,取100ml进行检验。使用华端生物HD-DT系列自动样品稀释仪:自动称重,自动按比例稀释。二、 过滤水样先用无菌镊子夹取无菌滤膜边缘部分,将滤膜正面朝上贴放在已灭菌的滤床上,固定好滤器,将100 ml水样注入滤器中,打开滤器阀门,在-5.07X104Pa(-0.5 个大气压)下抽滤。每次试验均需要用100 mL0.1%缓冲蛋白胨水讲行空白对照。使用华端生物HD-F系列水中微生物膜过滤装置:配备直排泵,无需废液瓶,直排废液;火焰灭菌支架和滤杯,提高实验效率。三、 厌氧培养过滤完水样后,关上滤器阀门,取下滤器,用无菌镊子夹取滤膜边缘部分,移滤膜倒置在SPS琼脂培养基上,滤膜截留细菌面与培养基完全贴紧,避免气泡产生,然后将平皿倒置于厌氧培养装置内,于36℃±1℃厌氧培养18 h~24 h,计数黑色菌落数。使用华端生物HD-AN系列智能厌氧微需氧培养系统:使用灵活、成本低,培养效果有保障,操作简单、智能。四、菌落计数对滤膜上证实为产气荚膜梭状芽孢杆菌的菌落进行计数使用华端生物HD-C系列菌落计数仪:手动菌落计数器辅助计数,操作方便;全自动菌落计数仪:软件自动计数,计数快捷、准确。五、 细菌鉴定用上述培养液涂片,革兰氏染色、镜检。产气荚膜梭状芽孢杆菌为革兰阳性粗大杆菌,其耐热菌株可能形成卵形芽抱,位于菌体中央或近端,其宽度一般不超过菌体宽度。使用华端生物HD-GM系列全自动革兰氏染色仪:自动化的染色仪使革兰氏染色实验自动化、标准化,批量大时可节约大量时间。使用华端生物HD-MA系列自动微生物生化鉴定系统:标准化的试剂操作,仪器自动判读结果,避免人工判读偏差。六、其他仪器使用华端生物HD-S系列自动培养基分装仪:自动分装培养基或者其他微生物试剂,方便、快速。使用华端生物HD-M系列微生物质谱快速鉴定仪:相比传统鉴定方式更快出结果、准确性更高、操作更简单、检测范围更广。杭州华端生物科技有限公司创始团队十多年来一直专注于为用户提供有竞争力的食品、药品、医疗及科研微生物实验室的整体解决方案与服务。2021年我们开始运营品牌“华端生物”,品牌寓意中华之端,华端人不断创新研发,提升产品竞争力,打造新国货。在企业发展过程中,我们始终秉持这一理念,不断引进、培养高科技人才,加大研发力度,并通过对产品持续创新、服务坚持初衷和团队共同成长的持续投入,不断推出符合市场需求的解决方案和服务。我们坚信,“更好的产品、更好的服务和更好的团队”是我们能够赢得客户青睐的核心竞争力,我们会始终不忘初心、砥砺前行,实现“与客户共同保障食品安全、药品安全和公共卫生安全”的社会使命。以史为鉴、开创未来。杭州华端生物科技有限公司诚挚期待与广大用户深入交流,与想要加入团队共同奋斗的同仁,携手前行,共创美好未来。核心价值观:拼搏、专注,突破、创新!企业愿景:提升国产微生物检测设备的竞争力!公司使命:为食品、药品和公共卫生安全提供保障。
  • 《产酸克雷伯杆菌PCR检测方法》等3项团体标准征求意见
    各有关单位及专家:根据广东省动物学会团体标准制修订计划安排,由华南农业大学负责起草的《产酸克雷伯杆菌 PCR 检测方法》和《奇异变形杆菌 PCR 检测方法》、由中山大学等担负负责起草的《鸡内金渣水产饲料添加剂原料》3项团体标准已完成了征求意见稿的编写。按照《广东省动物学会团体标准管理办法(试行)》相关规定,现印发给你们,请研究提出修改意见,并填写《广东省动物学会团体标准征求意见反馈表》,于2023年4月17日前通过邮件反馈至gdsdongwuxuehui@163.com。附件下载鸡内金渣水产饲料添加剂原料(征求意见稿).pdf产酸克雷伯杆菌PCR检测方法(征求意见稿).pdf奇异变形杆菌PCR检测方法(征求意见稿).pdf广东省动物学会团体标准征求意见反馈表.doc
  • 新西兰乳品巨头产品中检出肉毒杆菌
    新西兰乳制品巨头恒天然集团3日宣布,旗下部分婴儿奶粉和运动饮料等产品可能 &ldquo 受到污染&rdquo ,含有肉毒杆菌。暂不清楚&ldquo 受污&rdquo 产品的具体名称和销往国家或地区。   早已发现?   恒天然2日发布这次污染消息,3日举行新闻发布会,公布更多详情。   这家企业新西兰奶制品公司执行董事加里· 罗马诺介绍说,检测显示,新西兰本地一家工厂2012年5月生产的3批浓缩乳清蛋白含有肉毒杆菌。这些&ldquo 受污&rdquo 产品总量38吨。   浓缩乳清蛋白作为基本原料,通常被用于生产婴儿奶粉、儿童成长奶粉和运动饮料等一系列产品。至于一般乳制品,例如鲜奶、酸奶、奶酪和经过高温消毒的牛奶产品,不会受影响。肉毒杆菌是一种生长在常温、低酸和缺氧环境中的革兰氏阳性细菌。肉毒杆菌食物中毒的主要临床表现是恶心、呕吐及中枢神经系统症状如眼肌、咽肌瘫痪,中毒者如抢救不及时,致死率较高。   按恒天然的说法,早在今年3月,企业便发现潜在质量问题,当时对某一产品的检测发现梭菌属细菌。只是,这一菌属许多菌种属于无害,因而企业在接下来几个月里对产品样品实施进一步检测。   直至7月31日,检测中发现了可能引起食物中毒的肉毒杆菌。问及为何耗时这么久才发现问题,罗马诺回应,这一时间符合现代标准。   罗马诺说,这次污染源是恒天然在新西兰北岛怀卡托地区豪塔普工厂的一根受污染的管道。&ldquo (发现受污染后)我们立即寻找源头,确定一小段管道没有像本应该的那么卫生。&rdquo   可瑞康中招   恒天然说,已于2日告知8家客户这次质量问题。这些客户现正紧急调查,以确定产品是否受到影响。如有必要,将召回产品。恒天然拒绝提供8家企业和相关产品名称,拒绝说明&ldquo 受污&rdquo 产品销往哪些国家和地区。   《新西兰先驱报》3日报道,新西兰初级产业部认定,在新西兰销售的5批婴儿奶粉产品可能受到污染。这一部门说,涉及的品牌是可瑞康(Nutricia Karicare)、产品是针对6个月以上婴儿的第二阶段配方奶粉。   恒天然被视作全球第四大乳制品企业,占新西兰国内大约9成市场份额,年收益大约160亿美元。   这是这家企业今年以来第二起产品&ldquo 受污&rdquo 事件。今年1月,新西兰初级产业部宣布,恒天然生产的奶粉中被检测出含有微量双氰氨。   初级产业部3日说,已把恒天然这起最新&ldquo 污染&rdquo 事件通报主要海外市场的政府监管机构。同时,这一部门将与恒天然及相关客户合作,加紧调查核实。   恒天然集团全球首席执行官(CEO)西奥· 史毕根斯说,企业将竭尽所能帮助8家受影响客户,确保&ldquo 受污&rdquo 产品从市场下架以及让公众知情。   我国高度重视   中国是新西兰奶粉的主要进口国之一。暂不清楚这次是否有&ldquo 受污&rdquo 奶粉进入中国市场。   中国国家质检总局高度重视这件事,2日立即与新西兰驻华使馆取得联系,要求新方立即采取措施,防止问题产品影响中国消费者健康。   同时,中国国家质检总局要求进口商立即召回可能受污染产品,要求各地检验检疫机构进一步加强新西兰输华乳制品的检验监管。   恒天然一名发言人说,恒天然集团全球首席执行官史毕根斯定于3日从欧洲前往中国,向相关机构和客户通报最新情况。   《新西兰先驱报》报道,就在这次肉毒杆菌污染事件前,恒天然正准备在中国市场推出自己品牌的婴儿奶粉&ldquo 安曼&rdquo (Anmum)。这家企业6月说,新品牌奶粉将首先在北京、上海和广州销售,如果开局顺利,将扩至中国其他地方市场。

产氨短杆菌相关的仪器

  • 主要特点:可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本;样本在检测时无需任何的前处理过程,直接丢入检测瓶即可;可自动控制孵育温度和孵育时间检测样本只需1ml/1g;8个检测位各自独立可检测不同的样品;灵敏度高达可检测到1目标微生物;特异性高达99.999%;独立、持续的检测并记录瓶中的微生物数量(CFU)简单三个操作步骤,傻瓜型,无需专业操作人员;仪器便携式,可随时随地进行检测、100%定量分析,并可直接连接电脑出定量分析检测报告。通过ISO 16140:2003 “食品和动物饲料的微生物学 – 代替法的认证”。 RVLM微生物检测仪 检测范围:活细菌总数大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌O157, O111, O104...等肠道杆菌科金黄色葡萄球菌铜绿假单胞菌;绿脓杆菌 沙门氏菌李斯特菌肠球菌曲霉属真菌;曲霉菌属酵母菌乳酸杆菌 应用范围:卫生控制:-食品(HACCP)-厨房、工具、表面(HACCP)-水质-(CDC)疾病控制、进出口检验检疫-药品及 化妆品 与我们的生活息息相关,例如:咖啡馆、餐厅 水源检测、制水厂分析实验室和HACCP诊断农产品及相关加工公司药厂、药房、化妆品厂环境监测机构水配送公司消费者保护团体、工商管理机构室内空调调节公司 微生物检测瓶尤其能应用于军事、大型展会等等的食品快速检测 集传统检验方法优点于一身:-培养皿法-酶法(β-葡萄糖苷酸酶分析) -免疫法(抗原搜寻)-基因法(基因搜寻) 检验样本无需任何前处理-液态样本,固态样本和表面样本均无需前处理定性和定量分析-搭配检测机:100%的定量分析-肉眼判读:定性或半定量分析简单便捷-简单的三个步骤得到检测结果检验迅速-是传统检验方法速度的2~5倍 高灵敏性-可以检测到1目标微生物(理论极值)高特异性-特异性高达99.999%(理论极值)检测瓶就是实验室-微生物检测瓶随时可用-未受过严格专业训练的检测人员也可随时随地进行检测使用后安全丢弃-和过期药物同样处理 检测步骤:(简单三个步骤得到100%定量检测结果) 第一步:放入样本 -打开瓶盖,加入11ml无菌水-放入液态(固态/表面)样本0.1~1.0ml(0.1~1.0g)-盖紧瓶盖 第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合(充分溶解或混合如右图所示) -若使用振荡器,需时20秒左右;或用手用力摇,需时2~3分钟左右。 第三步:在适当时间判读结果(请查右表) -使用RVLM微生物检测仪:-充分溶解混合后立即放入检测仪-得到100%定量分析结果 *若没有RVLM微生物检测仪: -待充分溶解混合后,放入恒温器孵育 (在适当温度下孵育适当时间,请查下表)-肉眼判读定性或半定量分析结果以大肠菌群为例:若菌落数>108CFU/ml:2小时内颜色即变成黄色;若菌落数<102CFU/ml:14小时内颜色不会变成黄色;若菌落不存在:18小时后颜色仍保持开始颜色或其他中间色(不变成黄色) 使用后无菌处理 -按下RVL微生物检测瓶的瓶盖上方-放心安全丢弃(与过期药物同样处理) 微生物快速诊断 RVL@产品 Q&A1. 微生物检测瓶除可以检测活菌外,死菌可以检测么?答:不能检测死菌。2. 微生物检测瓶可以检测厌氧菌么?答:检测瓶的检测范围即包括厌氧菌(亚硫酸盐梭状芽胞杆菌 Sulphite reducing Clostridia,产气荚膜杆菌 Clostridium perfrigens),也包括需氧菌。 检测不同种微类生物的检测瓶中试剂不同。对于厌氧菌,我们有特殊的试剂,如检测产气荚膜杆菌 Clostridium perfrigens。3. 检测瓶的检测原理都分别用到了哪些检测方法?答:培养皿法、酶法、免疫法、基因法。4. 对于第 3 题,你能简要叙述这些方法的优劣势么?答:与传统的培养基法、胶体金、酶免法和 PCR 法不同,德国皇家微生物检测仪是多种方法的集合。单独使用一种检测方法都有自己的缺点:比如, PCR 法需要专业技术人员和昂贵设备; 培养基法操作复杂; 胶体金法灵敏度低; 酶免法特异性捕捉不充分。 德国皇家微生物检测瓶快速检测系列产品是以上多种方法的综合运用,吸收了每种方法的优点,弥补了各种方法的不足。5. 用微生物检测瓶进行微生物检测时,第一步是先放样本还是无菌水?答:都可以。6. 对样本进行微生物接种时,需要在无菌环境下进行么?答:检测瓶是通过捕捉特异性,结合多种检测法进行分析。无菌环境与否均可(临检的场所大都是非无菌环境)。7. 检测瓶可以检测表面样本和固态样本么?答:可以检测固态、液态、表面样本(用所配棉棒沾湿无菌水后涂抹表面)。纸浆等膏状、糊状、粘稠状昂本都可以检测。8. 检测瓶在检测固态样本时需要对进行研磨、稀释等前处理过程么?答:直接将样本放入检测瓶,无需任何前处理。 9. 每次检测的无菌水用量是多少?答:一般是 11ml。如果是检测液态样本或水样本,建议加样 1ml,加无菌水 10ml。 10. 放入样本和无菌水后,“摇匀使其充分溶解和混合”这一操作步骤,无论定性分析还是定量分析,都是必要的步骤么?答:是的,摇匀无论是定性还是定量分析都是必要步骤。11. 不同的微生物对应的孵育温度是一样的么?请举例说明。答:不一样。37 摄氏度居多:活菌总数、沙门氏菌、李斯特菌等,大肠杆菌 44 摄氏度等,详细请参考对照表。12. 若是检测冷菜或者冰欺凌这样的样本,孵育是否应该低温进行?答:对检测样本自身的温度没有限制,检测样本中微生物,请严格遵照所检测微生物对应的孵育温度,依然根据对照表。13. 如果想加快检测时间,孵育温度可以调至高于所检测微生物对应的孵育温度?答:不可以,严格遵照对照表。14. 操作手册规定放入的样本量为多少?答:0.1g‐1.0g 或 0.1ml‐1.0ml。15. 若放入的样本量高于规定的样本量,检测结果会不同,或者检测结果(定量时)增加么?答:样本量多一些或少一些,定量分析结果不会有变化。 原因:传统的微生物学检测方法,包括官方参考方法,即基于固体选择性培养基的菌落计数法内在的统计分散度(统计名词,也称为统计变异,是变量或概率分布蔓延,常见的例子是方差,标准差和四分位距。)大于 50%。很多实验室已经证实皇家生物检测法与其他检测方法比统计分散度低,可信度高。但不管怎样,25‐30%的统计分散度还是有的。另外,由采样产生的统计分散度同样应该考虑在内,尤其是微生物经常容易繁殖的固态的肉制品类。 因此,加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的(和其他任何方法获得的结果相等)。16. 对于面粉这类低密度的散装样本,可以照常检测么?答:可以。 17. 对于酱油这样的深色样本,会影响定性检测结果的判读么?您有什么好的建议?答:如果搭配检测仪进行定量分析,不存在这个问题;如果只是通过肉眼观察变色进行定性分析,深色样本如果担心肉眼不能够清晰的辨认,建议进行稀释后再进行检测。还记得第 15 题得答案么?加样是 0.5g 或 1.5g 所得的结果在统计上是等价的和其他任何方法获得的结果相等)。稀释同样的道理。18. 如果是检测水样,还需要加入无菌水么?加多少?答:建议加水样 1ml,无菌水 10ml。19. 不同的微生物对应的开始颜色和呈阳性的颜色都相同么?请举例说明。答:不同。例如,沙门氏菌孵育 10 分钟左右出现的开始颜色为红色,阳性颜色为黄色;李斯特菌,开始颜色为蓝色,阳性颜色为黄色。具体请参考对照表。20.微生物检测仪兼备孵育机的功能么?答:是的。将检测瓶充分摇匀后立即放入检测仪,在软件上进行检测菌类设置后。检测仪会自动进行孵育,并自动给出定量分析检测报告。21. 微生物检测仪兼备振荡器的功能么?答:不具备。需用手用力摇 2‐3 分钟,或振荡器摇 20 秒左右,直至充分溶解或混合。22. 微生物检测仪的判读原理是什么?答:微生物检测仪是一款精密的光学判读仪。通过光学原理精密探测检测瓶中的颜色变化,并给出精确的定量分析检测报告。23. 微生物检测仪是外接电源,还是自带充电电池?答:外接电源。24. 微生物检测仪可以同时、独立地检测多少个检测瓶?答:8 个。同时、独立的探测,并分别给出定量分析报告。25. 微生物检测仪定量分析,需要在电脑上安装分析软件么?答:需要按照配套分析软件。26. 怎样的计算机操作系统对该分析软件兼容?答:XP, Vista, Windows 727. 如果检测仪是初次开机,接通电源后需要稍等多少时间再进行下一步操作?答:若初次开机,开机后停留 40 秒左右继续操作为宜。28. 检测仪进行定量分析时,充分混合后的检测瓶是应该立即放入检测仪,还是稍等片刻后再放入?答:充分混合后立即放入检测仪。29. 检测瓶放入检测仪后,在检测仪分析软件点击开始,软件界面上对应检测孔的灯会变成什么颜色?答:在所检测检测瓶对应的操作界面上点击“Start”(开始),对应孔的指示灯由绿色变为红色。表明检测开始并进行中。30. 当检测结束后,分析软件界面对应孔的灯光会恢复为什么颜色,说明检测结束,可以放入新样本?答:在检测进行时,指示灯为红色。当检测结束后,指示灯变为绿色。此时在对应的检测仪检测孔放入新的检测瓶开始下一轮检测是可以的。检测时间由细菌的存在量决定(当微生物含量较高时),或由对照表对应的检测时长决定(当微生物含量很低时,应超过对照表中检测 1CFU 对应的检测时间)。31. 微生物检测瓶的分析时间和检测瓶中微生物含量之间是什么关系?答:反比关系。即微生物含量越多,对应的检测时间越短;微生物含量越少,对应的检测时间越长。 如果样本中微生物含量过高,几分钟甚至几秒钟内检测仪的定量分析结果就会显著变动;如果微生物含量很低,(由于 RVLM 是非常精密灵敏的仪器)有经验的使用中可以通过几小时甚至几分钟的数据变化初步判断微生物目标含量是否达到规定要求。32. 分析检测前是否应该有明确的实验目的以确定你要检测的微生物含量(根据国家标准规定微生物的存在量。)?答:这样是最好的。例如,根据国家 GB 标准,或根据国际 EC 标准等,都有明确(或部分明确)地注明微生物在不同家禽、畜牧物种中的允许最大存在量。具体地说,在进行微生物检测时,我们首先要明确检测目的。如、国际 EC 2073:2005标准中规定,大肠杆菌在鲜肉中允许的最大存在量为 CFU 10^2/g,即每克鲜肉中大肠杆菌的含量不允许超过 CFU 10^2。此时我们根据对招表,找到大肠杆菌所在列,查 log CFU 10^2=2,即在大肠杆菌行中找到数字 2 所对应第一列的数字为 14。无论是肉眼进行定性分析,还是检测仪进行定量分析,要检测样本中大肠杆菌含量是否超过 CFU 10^2,最长在 14 小时即可得到严格精准的分析结果。如果是检测瓶进行定量分析,有经验的实验员会在很短时间内(譬如十几分钟)根据定量分析数据的动态变化情况,初步判断出检测瓶中的微生物含量。33. 明确要检测微生物含量的目的是什么,对照表起到什么作用?答:是确定所检测微生物对应的孵育温度、开始颜色、分析时间、阳性颜色的标准对照的依据。具体的使用方法请参考上一题答案。34. 什么是 CFU?答:colony‐forming unit,菌落形成单位。 经培养所得菌簇形成单位的英文缩写。 细菌(可见)和真菌的测量单位。CFU:colony‐forming unit,菌落形成单位,将稀释后的一定量的菌液通过浇注或涂布的方法,让其内的微生物单细胞一一分散在琼脂平板上,待培养后,每一活细胞就形成一个菌落。与常规利用显微镜对微生物数量进行测量不同,主要是对可见(即多数情况下形成菌落)的细菌数量进行测量的单位。 意思就是每毫升菌液中含有多少单细胞! 传统上就叫“个”。但是,我们知道,一个菌落并不一定是一个细菌所生成,也可能是由一簇细菌(一个细菌团)所生成,这时候再叫“个”就不太准确啦,准确的叫法就是“菌落形成单位”,英文缩写“CFU”。就像“公斤”和“千克”,只是叫法不同,数量上没有变化。 CFU 代表“colony forming units”。CFU/mL 指的是每毫升样品中含有的细菌群落总数,也有用 CFU/g 即对应固体培养基。35. 假如我要检测样本中大肠菌群的菌落含量不得超过 106CFU/g 或 106CFU/ml, 用肉眼观察瓶中颜色变化进行定性分析,请对照“孵育温度和比色对照表”详细叙述检测步骤。答:第一步:放入样本 放入所要检测的样本(0.1‐1.0g,或 0.1‐1.0ml),加入 11ml 无菌水(根据检测物情况,若为液体,建议加样 1ml,加无菌水 10ml。差别不大),盖紧瓶盖。 第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合。 如果用手需有力摇 2‐3 分钟左右;或用振荡器摇,需时 20 秒左右。 第三步:在适当时间判读检测结果 (1)若肉眼定性分析。根据对照表确定大肠菌群对应的孵育温度、开始颜色、检测时间、阳性颜色等信息。 孵育温度:根据对照表为 37℃; 开始颜色:即摇匀后放入 37℃恒温箱孵育 10 分钟左右会呈现的颜色。根据对照表为红色; 检测时间:我们要检测标准为大肠菌群含量不超过 106CFU/g 或 106CFU/ml。根据对照表,对应列log 106=6,找数字 6 对应行的数字为 6,即检测时间为 6 小时。即,观察时间确定为 6 小时。 阳性颜色:根据对照表,大肠菌群的阳性颜色为黄色。 确定了以下信息后,我们把充分混合后的检测瓶放入 37℃恒温箱,这样一直放置。孵育 10 分钟左右,我们观察会发现检测瓶会呈现检测大肠菌群对应的开始颜色——红色。继续放置,到 6 个小时的时候进行观察,如果颜色变为黄色,说明样本中大肠菌群含量超过 106CFU/g 或 106CFU/ml,样本为不合格品;若没有变为黄色,而是始终保持开始颜色红色,或其他中间颜色,说明样本中大肠菌群含量未超过 106CFU/g 或 106CFU/ml,样本为合格品。 (2)若检测仪进行定量分析 此步骤请参见下一题。第四步:无菌处理最后别忘记按下检测瓶的瓶盖上方对检测瓶进行灭菌处理。按下瓶盖后摇一摇,好了,可以安全丢弃了。注意:在进行实验操作时,不要碰到检测瓶的瓶盖顶部,以免在不当的时候进行了无菌处理,影响试验结果。36. 若第 34 题搭配检测仪进行精确的定量分析,请详述操作步骤。答:(2)若检测仪进行定量分析 将充分混合后的检测瓶立即放入检测仪。 启动检测仪软件,点击“Station”(状态)录入相关信息(包括:检验员姓名、检测、检测样本所属客户、检测时间等信息);在软件操作界面“analysis type”(检测种类)下拉菜单中勾选所检测的微生物种类,点击 ok,点击开始,指示灯变红,开始进入分析状态。观察检测仪的定量分析数据变化,进行判断。37. 为什么在检测结束之前,不能按下检测瓶的瓶盖?答:无菌处理。瓶盖中还有无菌处理物质,按下瓶盖,瓶盖中的无菌处理物进入瓶内,与瓶内溶剂进行反应,完成无菌处理。因此,实验过程中请不要轻易触碰检测瓶的瓶盖。 技术人员选答题,销售人员必答题:1. 检测瓶可以检测多少种微生物,分别是什么?答:活菌总数、大肠菌群、大肠杆菌、肠道杆菌科、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、沙门氏菌、李斯特菌、肠球菌、亚硫酸盐还原梭状芽孢杆菌、产气荚膜梭菌、曲霉属真菌、曲霉菌、酵母菌。 以后还有陆续有其他微生物菌种的检测瓶相继面世。包括军团菌等。2. 检测瓶在检测大肠杆菌时,可以检测到所有的大肠杆菌菌株么(包括目前流行的 EHEC?)答:是的,可以检测到全部的大肠杆菌菌株,包括 EHEC 肠出血性大肠杆菌(E.coli O104, O111, O157 等)3. 检测瓶的应用范围有哪些?答:卫生控制:食品(HACCP),厨房、工具、表面(HACCP),水质,(CDC)疾病控制、进出口检验检疫、药品及化妆品。 与我们生活息息相关的:环境监测机构,农产品及相关加工公司,水源检测和制水厂,水配送公司,药厂、药房、化妆品厂,分析实验室和 HACCP 诊断,奶制品厂,咖啡馆、餐厅,消费者保护团体、工商管理机构,室内空调调节公司,尤其能应用于军事、大型展会等的食品快速检测。4. 你认为大肠杆菌检测瓶、李斯特菌检测瓶、沙门氏菌检测瓶除了是用于食品安全检测外,适用于医疗么?答:大肠杆菌(EHEC)、李斯特菌、沙门氏菌,这三款检测瓶可用于体外临床检测。 Royal 微生物检测瓶系列的全球定位依然是食品安全。在欧洲,对人体进行微生物的临床体外检测是非常少的,欧洲的各方面安全控制的很好。然而,在发展中国家,以上三款微生物的人体体外临床检测经常发生。而以上三款检测瓶用于体外临床检测的安全性和准确度都可以保证。4 合 1 试纸片和检测瓶市场定位的区别 1)4 合 1 试纸片和检测瓶比较 4 合 1 试纸片配合其分析仪,一台分析仪可以同时检测 48 个试纸片。因此,从经济成本的角度考量,最好一开机就是 48 片同时检查。对于医院,攒够 48个粪便样本后,一次性进行分析。检测瓶,一个样本就可以进行检查。而且更大的优势在于,这款产品会非常受医生的欢迎。因为医生可以不用接触样本,这是目前大多数的医院检测无法做到的。把瓶子给病人,让病人自己将粪便样本放入后送回给医生。医生拿到检测瓶,在医院的振荡器上摇匀后,放入孵育机,等待结果判读即可。2)检测瓶与医院目前传统检测法的比较 ?目前医院的检测方式依然是培养皿法居多。这种方法最令医生反感的地方是医生要接触样本。如果医生处于怀孕期,接触到李斯特菌的后果就是流产。如果检测台没有处理干净,也容易导致微生物的传播。 检测瓶,医生完全不用接触样本。样本放入检测瓶的的这个过程交给病人在卫生间去操作就可以。医生要做的就是简单的摇匀和放入孵育器孵育(振荡器和孵育器都是医院的常规设备)。5. 无论固态、液态还是表面样本,在检测时是否都无需进行前处理?答:是的6. 检测仪的特异性是多少?答:99.999%(理论极限值)7. 检测仪的灵敏度是多少?答:可以检测到 1 个活菌的理论极限值。8. 做定性分析时,检测需要几步,分别是什么?答:三步:加样;摇动瓶子直到充分溶解和混合;在适当时间判读结果(根据对照表)。最后不要忘记按下瓶盖上方进行无菌处理。9. 做定量分析时,检测需要几步,分别是什么?答:同上。具体请参考检测仪操作文档。10. 检测后按下检测瓶瓶盖的目的是什么?答:无菌处理,请参考上第 45 题。11. 检测瓶的储存温度是多少?答:在 20℃-25℃左右既可以储存,这个温度下很方便运输,对于临检来说是有利的。但随着大气温室效应,夏天时还是要注意储存温度不要超过 25℃,负责会影响检测瓶检测的灵敏度。然而,如果可以放到 4℃进行储存,保质期可以延长近一倍。12. 如果预延长检测瓶的有效期,储存温度最好为多少?答:4℃,具体见下表。
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  • 9006流感嗜血杆菌9007流感嗜血杆菌NCTC 11931流感嗜血杆菌NCTC 12699流感嗜血杆菌NCTC 13377流感嗜血杆菌NCTC 4560流感嗜血杆菌NCTC 8143流感嗜血杆菌NCTC 8468流感嗜血杆菌10014副溶血嗜血杆菌49146副流感嗜血杆菌49917副流感嗜血杆菌700025睡眠嗜血杆菌51815蜂房哈夫尼亚菌6258东方伊萨酵母33394反硝化金氏菌13182产酸克雷伯菌43086产酸克雷伯菌43165产酸克雷伯菌43863产酸克雷伯菌49131产酸克雷伯菌51817产酸克雷伯菌700324产酸克雷伯菌8724产酸克雷伯菌BAA-1144肺炎克雷伯菌QQ:
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  • 德国进口微生物快速检测仪RVLM:大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪主要特点:1) 可检测固态、液态、表面、膏状、浆状样本;2) 样本在检测时无需任何的前处理过程,直接丢入检测瓶即可;3) 可自动控制孵育温度和孵育时间4) 检测样本只需1ml/1g;同一温度下可同时检测8个样品;5) 灵敏度高达可检测到1目标微生物;特异性高达99.999%;6) 独立、持续的检测并记录瓶中的微生物数量(CFU)7) 简单三个操作步骤,傻瓜型,无需专业操作人员;8) 大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪器便携式,可随时随地进行检测、100%定量分析,并可直接连接电脑出定量分析检测报告。大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪检测范围:活细菌总数大肠菌群/大肠杆菌/大肠杆菌O157, O111, O104...等肠道杆菌科铜绿假单胞菌;绿脓杆菌沙门氏菌李斯特菌肠球菌酵母菌大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪应用范围:卫生控制:-食品(HACCP)-厨房、工具、表面(HACCP)-水质-(CDC)疾病控制、进出口检验检疫-药品及 化妆品大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪与我们的生活息息相关,例如:咖啡馆、餐厅水源检测、制水厂分析实验室和HACCP诊断农产品及相关加工公司药厂、药房、化妆品厂环境监测机构水配送公司消费者保护团体、工商管理机构室内空调调节公司集传统检验方法优点于一身:-培养皿法-酶法(β-葡萄糖苷酸酶分析)-免疫法(抗原搜寻)-基因法(基因搜寻)检验样本无需任何前处理-液态样本,固态样本和表面样本均无需前处理定性和定量分析-搭配检测机:100%的定量分析-肉眼判读:定性或半定量分析简单便捷-简单的三个步骤得到检测结果检验迅速-是传统检验方法速度的2~5倍高灵敏性-可以检测到1目标微生物(理论极值)高特异性-特异性高达99.999%(理论极值)检测瓶就是实验室-微生物检测瓶随时可用-未受过严格专业训练的检测人员也可随时随地进行检测使用后安全丢弃-和过期药物同样处理微生物检测瓶尤其能应用于军事、大型展会等等的食品快速检测RVL微生物快速检测瓶微生物快速检测仪RVLM :-简单、便捷,100%定量分析-在同一温度下可容纳8个样品。-可自动控制孵育温度和孵育时间-独立、持续的检测并记录瓶中的微生物数量(CFU)使用后无菌处理-按下RVL微生物检测瓶的瓶盖上方-放心安全丢弃(与过期药物同样处理)大肠杆菌检测仪 水质大肠杆菌检测仪若没有RVLM微生物检测仪:-充分溶解混合后,放入恒温器孵育(在适当温度下孵育适当时间,请查上表)-肉眼判读定性或半定量分析结果以大肠菌群为例:若菌落数>108CFU/ml:2小时内颜色即变成黄色;若菌落数<102CFU/ml:14小时内颜色不会变成黄色;若菌落不存在:18小时后颜色仍保持开始颜色或其他中间色(不变成黄色)简单三个步骤得到100%定量检测结果:第一步:放入样本-打开瓶盖,加入11ml无菌水-放入液态(固态/表面)样本0.1~1.0ml(0.1~1.0g)-盖紧瓶盖第二步:摇动瓶子直到溶剂充分溶解或混合(充分溶解或混合如右图所示)-若使用振荡器,需时20秒左右;或用手用力摇,需时2~3分钟左右。第三步:在适当时间判读结果(请查左表)-使用RVLM微生物检测仪:-充分溶解混合后立即放入检测仪-得到100%定量分析结果
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    JCM 10556产酸拟杆菌知识解析! 一、菌种简介平台编号:bio-107054规格:冻干粉拉丁属名:Bacteroides acidifaciens中文名称:产酸拟杆菌拉丁名称:Bacteroides acidifaciens来源历史:JCM原始编号:DSM 15896=JCM 10556原产国:日本模式菌株:否主要用途:AB021164生物安全级别:GR1培养基编号:35培养温度:37℃培养时间:24-48h需氧类型:严格厌氧分离基物:小鼠盲肠采集地:日本保存方法:冷冻干燥管保藏注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用 二、培养基(血琼脂平板) 三、保藏条件冻干菌种应在 2-8°C 保存,活化好的菌种要放厌氧环境下保存。 四、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.5-1ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 1-2 个平板上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和中国微生物菌种查询网联系。 五、单层冻干管打管说明书1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。2、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功;3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成;有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。4、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。5、冻干管打开后需一次用完,不能留存。6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。
  • 大肠杆菌测试片(美国3M)
    7.Petrifilm&trade 大肠菌群/大肠杆菌测试片 &bull 一个测试片同时检测大肠杆菌和大肠菌群 &bull 24-48小时确认大肠杆菌数,节省时间2-3天 &bull 大肠杆菌显示为蓝色带气泡 &bull 其他大肠菌群为红色带气泡 AOAC OMA标准:991.14, 998.08 SN行业标准: SN/T 1896-2007 编号:6414 规格:25片/包,20包/箱 大肠杆菌和大肠菌群快速检验测试片 一、操作方法 二、判读手册 Petrifilm ColiformTM Coliform测试片含有VRB培养剂 (Violet Red Bile),一种冷水可溶性的凝胶剂和四唑翁(tetrazollium)指示剂,可增强菌落计数效果。绝大多数E .coli(约占97%)能产生-葡萄糖甘酸酶与培养基中的指示剂反应,产生蓝色沉淀环绕在大肠杆菌菌落周围,表面覆盖的胶膜,可留住发酵乳糖的大肠菌群产生的气体,约有95%的大肠杆菌产生,形成蓝色或深蓝上菌落并有气泡相连接,气泡大小约为1个菌落直径。 AOAC和FDA细菌学分析手册(RAM)规定大肠菌群为革兰氏阴性杆菌,发酵乳糖产酸产气。大肠菌群菌落在Petrifilm EC测试片上生长产酸,PH指示剂使培养基颜色变深,在红色菌落周围有气泡者,为大肠菌群细菌。大肠杆菌鉴定,在不同国家可以有变更(见培养时间和温度部分指示)。 样品制备 4、制备1:10和更大稀释的食物样品稀释液,称取或吸取食物样品,置入适宜的无菌容器内,如均质袋、稀释瓶、WhirlPak bag或者其他灭菌容器内. 5、加入适量的无菌稀释液,包括Buffered peptone Buffer(IDF phopsphate buffer ,用0.0425g/L的KH2PO4调PH7.2) 、0.1%的蛋白胶水(ISO方法6887) 、缓冲蛋白胶水(ISO方法6579) 、盐溶液(0.85-0.90%)、bisulfite-free letheen broth或蒸馏水. 但不可用含有枸橼酸盐、bisulfite or thiosulfate的缓冲液. 因为它能抑止菌生长。 6、搅拌或均质样品,酸性样品的稀释液用INNaoH调PH6.5-7.5,对碱性样品的稀释液用IN HCL调PH6.5-7.5。
  • 嗜酸乳杆菌的用途及使用方法!
    嗜酸乳杆菌的用途及使用方法! 嗜酸乳杆菌属于乳杆菌属,革兰氏阳性杆菌,杆的末端呈圆形,主要存在小肠中,释放乳酸,乙酸和一些对有害菌起作用的抗菌素,但是抑菌作用比较弱。早在20世纪70年代,北卡罗来纳州立大学从人体粪便中最先分离出LactobacillusacidophilusNCFM,它是唯一一株进行了基因测序和注释的嗜酸Chemicalbook乳杆菌。嗜酸乳杆菌是目前乳酸菌家族中广泛研究与开发的益生菌之一,被视为第三代酸乳发酵剂菌种,也是人体中重要的微生物。嗜酸乳杆菌不仅在胃中,它还是人体小肠内的主要益生菌。 一、菌种简介平台编号:bio-67309提供形式:冻干物拉丁属名:Lactobacillus acidophilus中文名称:嗜酸乳杆菌拉丁名称:Lactobacillus acidophilus其它保藏中心编号:=AS 1.2686来源历史:←中科院微生物所收藏时间:2010/10/15原始编号:LA-14资源归类编码:15131319101模式菌株:非模式菌株用途:研究;生产;奶制品(美国菌种)。主要用途:研究;生产具体用途:奶制品(美国菌种)。生物危害程度:四类培养基编号:CM0006培养基名称:MRS培养基培养基成分:酪蛋白胨 10.0g,牛肉膏 10.0g,酵母粉 5.0g,葡萄糖 5.0g,乙酸钠 5.0g,柠檬酸二铵 2.0g,Tween 80 1.0g,K2HPO4 2.0g,MgSO4.7H2O 0.2g,MnSO4.H2O 0.05g,CaCO3 20.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH6.8。*培养CICC 10774时pH需调至5.0.培养温度:37℃需氧类型:厌氧保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。 二、嗜酸乳杆菌的功效1、抑制病原菌、抗病害:嗜酸乳杆菌能有效调整动物肠道的菌群平衡,调节机体肠粘膜的免疫活性,增强免疫力,提高动物存活率。2、促进动物生长:能分泌乳酸,并产生蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶等消化酶,有利于物质的分解;合成B族维生Chemicalbook素,氨基酸、未明促生长因子等营养物质,促进动物生长。3、净化养殖水体:明显降低养殖水体氨氮等有害物质的含量,分解鱼类残饵、粪便及水中有机质,改良水体环境,抑制水体中有害菌的繁殖生长,调节藻相平衡,控制有害菌藻,净化水质,促进鱼虾类健康生长。 三、嗜酸乳杆菌的用途嗜酸乳杆菌作为益生菌家族中的重要成员更是被广泛的应用于各种功能性食品当中,如瑞典研发的发酵燕麦粥,其产品中的益生菌能寄生于胃肠道壁上,有效地改善人体的免疫系统,增强免疫力。 四、嗜酸乳杆菌的使用方法嗜酸乳杆菌可与其它添加剂混合作预混料使用,经预混合后添加到粉料中或直接与其他饲料原料一起制粒;也可投于饮用水中饲喂。 五、嗜酸乳杆菌的获取方式嗜酸乳杆菌在胃中存活率一般能达到80%,但是若不经包埋处理,口服嗜酸乳杆菌后,它们的活力仍是会受到影响的;而如果将它们全部包埋,又无法发挥其在胃中的有益作用。因此我们首先选择由菌母直接繁育出的一代活菌,再将它们的一半应用双层包埋技术,不仅胃、肠同养,还保证了活菌在肠道中的活性。双包埋技术的优势还在于,外层的胶质在肠道内溶解后,内层的蛋白质还可帮助活菌定植在肠壁上,让它们代代繁殖,有效调节肠道微生态。根据卫生部公告2011年第25号,嗜酸乳杆菌是可用于婴幼儿食品的菌种。嗜酸乳杆菌的性状:冷冻干燥粉末,嗜酸乳杆菌活菌数:≥3.0×10cfu/g,水分:≤4.0%,如菌液,则水分80%。 六、嗜酸乳杆菌的增殖方式在营养丰富的MRS培养基巾,添加低聚糖对3株乳酸菌增殖的影响,如低聚异麦芽糖对嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌、乳酸链球菌均有一定的增殖作用。低聚糖是由2~10个单糖单位通过糖苷键而连接的小聚合体,介于单体单糖与高度聚合的多糖之间。国外已有报道,低聚糖可以促进肠道双歧杆菌和乳酸菌的增殖,抑制大肠杆菌等的生长,还可以稳定肠道环境,提高肠黏膜免疫功能等。也有报道低聚果糖仅可提高粪便中微生物的数量,不能促进肠道中双歧杆菌的数量。通过本实验可以看出,低聚异麦芽糖和低糖均可一定程度的促进禽源嗜酸乳杆菌、乳酸乳杆菌和乳酸链球菌的增殖。低聚糖作为双歧因子,不能被消化道和病原菌利用,仅能被益生菌利用,从而可使益生菌大量繁殖,作为益生菌的增殖因子,增强益生菌的竞争优势。本实验进行了不同营养条件下异麦芽低聚糖对3株乳酸菌体外增殖的观察。本实验结果显示,在营养贫瘠的培养基中,低聚糖可以明显的促进乳酸菌的增殖,这对于临床上人和动物机体的肠道恢复具有积极的意义。乳酸杆菌和双歧杆菌等肠道有益菌群的生长增殖需要较高的营养水平,而大肠杆菌等条件致病菌对于营养的要求相对较低,在肠道内繁殖时,获得其生长的营养要求较容易。正常健康的机体肠道环境下,有益菌群获得足够的营养,生长增殖比较旺盛,对有害菌群亦起到了一定的抑制作用;而当机体肠道紊乱,有害菌群大量增殖消耗营养,有益菌群此时营养条件不够,生长增殖受到影响,从而更加加剧了肠道环境的恶化。而此时服用低聚糖,可有效的发挥其对于乳酸杆菌的增殖作用,加之其不被有害菌群所利用的特性,决定了它可以特异的促进双歧杆菌、乳酸杆菌生长,从而达到调节肠道菌群平衡的效果。北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

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