顺式氰戊菊酯

大家好，本周为大家介绍一篇发表在J. Am. Chem. Soc.上的文章，Transient Structural Dynamics of Glycogen Phosphorylase from Nonequilibrium Hydrogen/Deuterium-Exchange Mass Spectrometry，文章作者是英国埃克塞特大学的Jonathan J. Phillips。　　变构调节指在蛋白质的正构位点上的变化通过蛋白质内部传递，最终影响到变构位点的结构，从而调整白质功能。理解蛋白质功能转换背后的特定结构动态变化对于分子生物学和药物发现领域至关重要。尽管变构现象自从提出以来已有广泛的研究，但是关于信号如何在蛋白质内部长距离传递的具体机制仍然不甚清楚。很大程度上是由于缺乏能够在时间和空间上高分辨率测量这些信号的生物物理方法。糖原磷酸化酶(glycogen phosphorylase，GlyP)是研究变构调节常用的标准蛋白，GlyP与II型糖尿病和转移性癌症的治疗密切相关。GlyP作为一种典型的变构酶，其活性受磷酸化修饰、多种天然配体和药物的调控。本文旨在通过开发和应用非平衡毫秒级氢/氘交换质谱(neHDX-MS)技术，来精确定位GlyP在变构激活和抑制期间的动态结构变化。这项技术能够提供蛋白质在毫秒时间尺度上的局部结构动态信息，有助于揭示变构调节过程中的瞬态结构特征，从而为理解蛋白质的动态行为和设计变构调节剂提供重要的结构信息。　　作者首先确定了能够完全激活或抑制GlyP的条件。25 mM 的AMP能实现GlyPb的最大激活(图1A)。32 mM咖啡因足以完全抑制GlyPa(图1B)。并且观察到50ms内AMP和咖啡因能够达到最佳激活/抑制状态(图1C和1D)。　　图1.糖原磷酸化酶b的变构激活和糖原磷酸化酶a的抑制。　　随后作者通过neHDX-MS捕捉由AMP引起的GlyPb变构激活过程中的局部结构扰动。通过激活过渡态与未激活和激活状态之间的HDX差异，作者将这些肽段分成了七个类群。其中重点值得关注的类群是c、d(其他类群对应区域及趋势不在此详细介绍)，因为他们的HDX行为与未激活和激活时的稳定态都有明显差异，这些局部区域的结构变化是过渡态的独特体现(图2A)。其中，c类群主要涵盖了tower helix区(图2B)，说明该区域在从未激活到激活状态的过渡态中，表现出相较于前后二者皆较高的动态性。d类群涵盖活性位点，说明活性稳点结构在因结合发生了结构稳定化现象。为了从原子水平理解这些瞬态结构变化，研究人员使用了一种基于Energy Calculation and Dynamics(ENCAD)的方法，Climber，来模拟从非活性状态到活性状态转变过程中的过渡态内部作用变化。结果显示，tower helix在激活过程中经历了氢键先断裂后形成的变化，这与观察到的HDX增加相一致(图4A)。　　图2.GlyPB中表现不同结构动力学行为的类群。　　图3.局部区域HDX动力学。　　图4.GlyP在活性和非活性状态之间的结构插值。　　随后作者探讨了咖啡因如何通过变构抑制影响GlyPa的结构动态。同样作者也比较了抑制过渡态与未抑制和抑制状态之间的HDX差异，分成了七个类群。在这几组类群中，仅有m表现出较未抑制和抑制状态都较明显的氘代上升趋势(图2C、图3C&D)。m区域涵盖了tower helix区(图2D)，说明该区域在未抑制状态到完全抑制状态的过渡阶段内，发生了局部去结构化现象。此外，在280s loop和250′ loop区域也表现出类似的瞬时去稳定化现象。结合AMP激活实验中的现象表明，尽管咖啡因和AMP作用于GlyP的不同位点，但它们都可能通过类似的变构路径(即tower helix的去稳定化)来引起GlyP的变构调节，从而实现对该蛋白功能的调控。同样在Climber分析中，可以观察到对应区域发生了氢键重排，与neHDX-MS结果呼应(图4B)。　　本文讨论了GlyP的变构调节中间态涉及的局部结构动态变化，并通过毫秒级neHDX-MS揭示了这些变化。结果表明激活和抑制过渡态都涉及到tower helix的氢键断裂和局部结构重排，这是两个途径的共同特点。本研究的亮点在于开发了一种新的neHDX-MS方法，能够在毫秒时间尺度上观察蛋白质的变构结构动态。这种方法不仅对理解GlyP的变构机制具有重要意义，而且可以广泛应用于不同蛋白质的变构研究，为理解蛋白质的变构调节提供了新的视角和工具。　　撰稿：罗宇翔　　编辑：李惠琳　　文章引用：Transient Structural Dynamics of Glycogen Phosphorylase from Nonequilibrium Hydrogen/Deuterium-Exchange Mass Spectrometry　　参考文献　　Kish, M. Ivory, D. P. Phillips, J. J., Transient Structural Dynamics of Glycogen Phosphorylase from Nonequilibrium Hydrogen/Deuterium-Exchange Mass Spectrometry. J. Am. Chem. Soc. 2023, 146 (1), 298-307.

p　　近日，国家卫生计生委召开党组会议，听取国家中医药管理局党组工作汇报。会议提出，要乘势而上，顺势而为，推动中医药新的更大发展。/pp　　会议认为，2015年及“十二五”期间，全国中医药系统在国家中医药管理局党组的带领下，紧紧围绕中央关于深化医药卫生体制改革的部署要求，深入贯彻落实《国务院关于扶持和促进中医药事业发展的若干意见》，围绕中心、服务大局，深化改革、开拓进取，推动中医药各项工作取得了有目共睹的成绩。屠呦呦研究员获得诺贝尔奖，中医药科技创新登上新的高峰，中医药国内外影响力进一步扩大。《中医药法(草案)》提交全国人大常委会进行了首次审议，中医药立法工作有了突破性进展。《中药材保护和发展规划(2015-2020年)》、《中医药健康服务发展规划(2015-2020年)》等相继制定出台，中医药事业发展上升为国家战略。实践证明，中医药队伍是一支善于继承、勇于创新、求真务实、敢于担当、深受人民欢迎和依赖的队伍，为提高人民群众健康水平发挥了重要作用。/pp　　会议强调，2016年是“十三五”规划全面开启之年，也是全面建成小康社会决胜阶段开局之年。习近平总书记祝贺中国中医科学院成立60周年时指出“中医药振兴发展迎来天时、地利、人和的大好时机”，是对中医药发展形势的科学判断，意义深远。李克强总理对中医药在继承中创新发展、在发展中服务人民提出了殷切期望和明确要求。广大中医药工作者备受鞭策和鼓舞，要抓往难得机遇，乘势而上，顺势而为，推动中医药有新的更大发展。一是将中央领导同志重要指示精神贯彻落实好，国家中医药管理局党组已将2016年确定为“中央领导同志重要指示精神贯彻落实年”，要作为重中之重任务抓好落实。二是将“五大发展理念”坚决贯彻好，中医药改革发展要始终坚持继承创新、统筹协调、绿色生态、包容开放、共享惠民，要把中医药宝库挖掘工程作为“十三五”的重头戏。三是将中医药立法切实推进好。四是将中医药发展的各项规划制定实施好。五是将中医药在深化医改中的作用充分发挥好。六是将中医药传承创新统筹谋划好。/pp　　会议指出，中医药事业是我国卫生计生事业的重要组成部分，加快推进中医药振兴发展，卫生计生部门责无旁贷。一是切实贯彻好中西医并重的方针，这是我们党和国家新时期的卫生工作方针。二是进一步加大对中医药工作的支持力度。共同推动中医药立法工作，共同研究制定中长期发展规划，共同谋划实施重大项目和工程，在基层中医药服务能力建设、发挥中医药在医改中的优势作用、完善跨部门协调机制等方面继续取得新的进展。总之，加快推进中医药振兴意义重大，任务艰巨，要全面贯彻落实党的十八大和十八届三中、四中、五中全会精神，进一步解放思想、改革创新，求真务实、扎实工作，为推动中医药振兴发展，为提高人民健康水平做出新的更大贡献。/ppbr//p

2月1日下午，理化（香港）有限公司召开2023年度工作总结表彰大会，此次大会以“顺势而为、大展宏图”为主题，公司董事长作主旨演讲，大家回顾了2023年发展历程，确定了2024年工作总方针。在新的一年，理化（香港）公司踔厉奋发，谱写新的辉煌篇章！在总结大会上，公司董事长指出，2023年国内经济下行压力和国际形势复杂变化，“不确定性”深刻影响着广大民营企业。处在时代变局之下，挑战与机遇并存。一年来，全体员工坚守岗位，各项工作稳步推进，不负客户期待，圆满完成全年目标。展望2024年，战略目标清晰。公司董事长以“一盆三角梅”的的故事，揭示了一个公司应有的坚持和韧性，生动描绘了新的发展蓝图，确立了“旋转圆盘电极专家”和“精于燃料电池测试”的核心定位。燃料电池测试系统980pro充分发挥理化（香港）公司在“旋转圆盘电极”领域16年深厚运营服务优势，构建应用技术服务体系，赋能产品营销服务。聚焦“新能源”这个时代风口，顺势而为，主动作为，不断升级完善品质服务保障，助力新质生产力！会上还进行了年终表彰仪式，颁发了理化（香港）公司2023年度“最佳优秀员工”、“最佳服务部门”等荣誉证书奖励。在新的一年，理化（香港）公司将全力以赴，不负韶华，服务用户，开创未来！