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[size=16px][b]揭示氮肥促进川贝母产量和品质提升的分子机制 01[/b] 1、[b]氮肥对川贝母的生物碱和核苷代谢物有明显影响[/b]。 2、适当施用氮肥后,与 C 和 N 循环相关的酶活性增加,并且有益微生物的比例已明显增加。 3、[b]最佳氮肥施用量(60–120 kg N ha? 1)提高了鳞茎产量。 02[/b] 川贝母被广泛应用于中草药和功能性食品[i][/i]中,具有止咳化痰的功效,并被大韩民国、加拿大、澳大利亚、马来西亚和新加坡批准为传统制剂中的草药活性成分。川贝母主要含有生物碱、核苷、皂苷和萜类化合物,具有止咳、祛痰和平喘作用,被广泛用于诊断和预防呼吸道疾病。当代药理学研究发现了它的抗肿瘤、抗炎和抗高血压作用,进一步扩大了它的用途。它的野生栖息地主要分布在青藏高原地区,包括中国的四川、西藏、甘肃、青海和云南等省。 遗憾的是,由于其自然繁殖能力低、生长周期长以及过度开发,野生川贝母正变得越来越濒危,无法满足日益增长的市场需求。 虽然人工栽培川贝母取得了初步成功,[b]但由于缺乏科学的栽培措施,尤其是合理的施肥策略,栽培川贝母的产量难以满足市场需求[/b]。因此,我们进行田间试验研究了不同氮水平对川贝母产量和质量的影响。此外,我们还评估了根际土壤酶[i][/i]和微生物群落对氮肥的反应,包括真菌和细菌的多样性、组成和共生网络,以及它们与产量和生物活性成分的关系。本研究的目的如下 (1) 优化氮肥管理,使川贝母的氮供应与氮需求同步,以提高产量并减少对环境的负面影响;以及 (2) 探讨六种氮肥施用水平下根际微生物群落多样性[i][/i]和潜在功能的差异。 [b]03 文章结论[/b] 田间试验表明,[b]氮肥施用量是影响川贝母鳞茎产量、生物活性化合物、土壤酶和根际微生物的关键因素[/b]。适度施用氮肥可明显提高贝母甲素和西贝母碱的含量,但会降低贝母素乙和贝母辛的含量。与碳和氮循环相关的一些酶的活性与适度氮肥呈正相关。[b]适度氮肥对微生物多样性和丰富度没有明显影响,但增加了微生物共生网络的复杂性[/b],提高了川贝母对生态环境的适应性。结构方程模型分析表明,氮肥塑造了根际微生物群和土壤酶,从而影响了川贝母的产量和生物活性成分。 [b]本研究结果为促进川贝母的可持续发展,[font=system-ui, -apple-system, BlinkMacSystemFont, &]缓[/font]解目前川贝母资源短缺,同时保护其环境效益提供了有价值的见解[/b]。[/size]
各位大佬,请问川贝母含量的稀释倍数是如何计算的,是多少呢?总感觉不对。
小序:市场上贝母类品种较多,相同品种之间的差异性较小,一般人员很容易混淆,2015年版药典规定川贝母的鉴别方法加入PCR测定法,这可以更有效更准确地鉴别川贝母的真伪。1 仪器与试剂PCR仪器(赛默飞),分析天平(岛津),纯水仪(密理博),电泳仪(北京市六一仪器厂),干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司),全自动凝胶成像系统,水浴锅(北京永光明仪器有限公司),植物基因组提取试剂盒,Taq DNA聚合酶及缓冲液,dNTP Mixture,Sma1限制性内切酶及缓冲液,DNA ladder,GelRed,琼脂糖,引物,对照药材(中检院)。2 实验方法2.1 供试品平行取样1份,没份约30mg,按照DNA 提取试剂盒说明书进行操作。2.2 PCR反应体系的制备25 μL反应体系:10×PCR缓冲液:2.5 μL;dNTP(10mM):0.6 μL;引物:上下游引物(20μM)各0.2 μL;Taq DNA聚合酶:0.5 μL;DNA模板:1μL;灭菌超纯水20.0μL;阴性对照为无模板DNA的反应体系。2.3 PCR扩增:以4000rpm离心10s后,将PCR管插入PCR仪中,进行如下反应:[align=center][img=,347,149]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908261131109559_5897_1858223_3.jpg!w347x149.jpg[/img][/align]2.4 限制性内切酶反应:2.4.1 酶切反应体系(20μL);Sma1 (20U/μL):0.5μL;10×酶切缓冲液:2μL;PCR产物:10 μL;灭菌超纯水7.5μL;阴性对照为未加PCR产物的反应体系。2.4.2 酶切反应条件:30℃反应6小时;2.5 琼脂糖凝胶电泳检测2.5.1 50×TAE电泳缓冲液的配制:取242 gTris碱,57.1 ml冰醋酸,37.2 g EDTA-Na[sub]2[/sub],加入去离子水,充分搅拌溶解,定容至1000 ml,作为贮存液,进行凝胶电泳时稀释50倍成工作液。2.5.2 1.5%琼脂糖凝胶的制备:称取1.5g琼脂糖,加入100ml 1×TAE电泳缓冲液,微波炉中火加热煮沸3次至琼脂糖全部融化,摇匀,冷却至65℃左右加入显色剂GelRed(1:100000),充分混匀,小心地倒入槽板上,使胶液缓慢展开,直到整个玻璃板表面形成均匀胶层,室温下静置直至凝胶完全凝固,垂直轻拨梳子,将凝胶及内槽放入电泳槽中,添加1×TAE电泳缓冲液至刚没过胶板为止。2.5.3 加样:在Parafilm上将μL扩增产物与μL 6×loading buffer混合,用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]分别将样品加入胶板的样品槽内。2.5.4 电泳:加样后的凝胶板立即进行电泳,电压5 V/cm,当溴酚蓝移动到距离胶板下沿约2cm处时,停止电泳。2.5.5 凝胶成像:用凝胶成像系统拍照并保存结果。[align=center][img=,559,305]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908261131351702_8940_1858223_3.jpg!w559x305.jpg[/img][/align][align=center][img=,690,920]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2019/08/201908261132249052_7201_1858223_3.jpg!w690x920.jpg[/img][/align][align=left]小结:PCR测定中,一定要防止试剂污染,假阳性干扰等,注意实验室环境。[/align]