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1 实验目的 (1)了解HPLC在食品中的应用。 (2)理解缓冲溶液在流动相中的作用。 (3)掌握用内标法对组分进行定量分析的方法。 2 实验原理 在食品中,主要的有机酸是乙酸、丁二酸、苹果酸、柠檬酸、酒石酸等,它们可能来自原料、发酵过程或是添加剂。这些有机酸在水溶液中有较大的解离度。在反相键合相色谱中易发生色谱峰拖尾现象。苹果汁中的有机酸主要是苹果酸和柠檬酸。在酸性流动相条件下(如pH 2~5),上述有机酸的离解得到抑制,利用分子状态的有机酸的疏水性,使其在键合相色谱柱中能够保留。由于不同有机酸的疏水性不同,疏水性大的有机酸在固定相中保留强,较晚流出色谱柱,否则较早流出,从而使各组分得到分离。
用0.02moL/L磷酸二氢钠作流动相测有机酸,苹果酸标品有两个峰(保留时间2.4和4.0),而柠檬酸标品保留时间4.1,柠檬酸与苹果酸第二个峰分不开,看文献上说第一个峰是天然存在的L型苹果酸,第二个峰可能由于苹果酸原样品中含有苹果酸衍生物。那测样品怎么定量呢?哪位朋友能帮忙回答下
各位朋友好,我想用毛细管电泳测定苹果酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸等有机酸,所用电源为正电压(0-30KV),总是不出峰。查文献,测定以上各酸都是负电源,缓冲溶液中一般加了阳离子表面活性剂。另有一些文献如测定水杨酸、丁香酸、苯甲酸、咖啡酸、儿茶酸、绿原酸等有机酸的电源为正电源,缓冲溶液中一般加了阴离子表面活性剂。我们实验室只有正电源,能不能测定苹果酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸等酸呢?不都是酸吗,用正电源,阴离子表面活性剂能否分离苹果酸、柠檬酸、草酸、琥珀酸等酸呢?