高效破碎

破碎大量样品、低温破碎大量样品、破碎坚硬或韧性较强的样品时，人工手动研磨就成了实验猿的噩梦。当然，也有很多实验猿已经尝试过市面一些研磨机/超声波粉碎机，发现自己那顽固的样品依然无法被完全破碎/破碎过程损坏了目标成分而十分心塞。 分享个高通量高效破碎动植物组织和微生物的方法，别逗，当然不是靠徒手研磨能做到的，必须入手个神器——tissuelyser系列和JXFSTPRP系列多样品组织研磨机。对于动植物组织和微生物，包括一些难以破碎的组织样品，都可以使用这个研磨机对其进行完全粉碎。 特别地，一些尤其坚硬/韧性比较强的样品，或要求维持低温条件进行破碎提取的样品，需要结合液氮进行研磨，如：皮肤、硬骨骼、软骨、血管、结缔组织、种子等；使用普通机械研磨方法，很难既保证研磨破碎效果又保证样品一直处于低温状态，尤其是提取RNA、酶等对温度敏感的物质时，低温状态的控制显得尤为关键。入手一台上海净信的多样品组织研磨机，这些都不再是问题了。看招：注：由于样品的具体差异及实验要求的不同，下文数据部分请咨询厂家。第一部分 破碎动物组织1）样品：猪肌肉组织2）仪器：Tissuelyser多样品组织研磨机（品牌：上海净信）；耗材：***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠3）步骤：a.取***克左右肌肉组织样品，均匀地剪切成少量样品块，分别放入若干***毫升的研磨离心管中。b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠和800μLPBS裂解液，分别盖紧管盖后，置入24孔研磨适配器中，再将适配器固定在研磨机中。c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹，研磨***秒，启动研磨器。d.研磨完全停止后，拿出研磨离心管，旋开管盖，取出研磨好的肌肉组织样品。4）结果：研磨后的效果如图1，猪肌肉组织成很细腻的泥浆状，说明Tissuelyser多样品组织研磨机对猪肉组织的研磨效果良好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150947_546190_3397_3.jpg图1 猪肌肉研磨对比第二部分 破碎植物组织1）样品：水稻叶片2）仪器： Tissuelyser多样品组织研磨机（品牌：上海净信）；耗材：***毫升离心管和直径***毫米的研磨钢珠3）步骤：a.取***克左右叶片组织样品，均匀地剪切成少量样品块，分别放入若干***毫升的研磨离心管中。b.每个试管中放入***颗直径***毫米的研磨钢珠，分别盖紧管盖后，置入24孔研磨适配器中，再将适配器固定在研磨机中。c.将Tissuelyser多样品组织研磨机的参数设置为***赫兹，研磨***秒，启动研磨器。d.研磨完全停止后，拿出研磨离心管，旋开管盖，取出研磨好的叶片组织样品。4）结果：研磨后的效果如图2，叶片组织成很细腻的泥浆状，说明Tissuelyser多样品组织研磨机对叶片组织的研磨效果良好。顺带附上研磨黄豆（坚硬的植物种子）的研磨对比图。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150948_546191_3397_3.jpg图2 水稻叶片研磨对比http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2015/05/201505150948_546192_3397_3.jpg图3 黄豆研磨对比第三部分 结合液氮使用tissuelyser研磨机 当样品死活无法破碎完全/样品傲娇要低温环境时，Tissuelyser多样品组织研磨机+液氮=问题轻松解决。以血管和植物叶片为例，具体操作方法如下： 血管： 取0.1克新鲜血管，用剪刀剪成若干小块，然后放入2毫升离心管中，加入1颗6mm研磨钢珠，盖上管盖。将整个试管放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾，然后放入机器处理30秒钟。取出样品管可见样品被破碎成乳白色粉末，然后加入提取缓冲液，可以进行接下来的后续提取，加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。 叶片： 取0.2克植物叶片，清洁叶片表面后放入离心管中，加入1颗直径5mm不锈钢研磨钢珠，盖上管盖。将整个试管和适配器放入液氮中冷冻1分钟左右或直到液氮不沸腾，然后取出放入研磨机器中机器处理30秒钟。取出样品管可见叶片被破碎成绿色粉末，然后加入提取缓冲液，进行接下来的后续提取即可，加入缓冲液之前能保证样品温度一直处于-20℃以下。后记 想入手这个神器，但又对研磨效果有所犹疑的小伙伴，现在上海净信部分研磨机产品可申请试用，是时候下手了。激动人心的还有，近期研磨机好价，试用爽了直接入手一台也是毫不含糊的。