冻干牛血清白蛋白粉

骏德仪器实验型FD-503血液真空冷冻干燥机是针血液制品专业设计的一款冻干机，其凭借自己独特的设计优势：安卓系统加箱式外观，在血小板冻干再水化的条件及其凝血功能变化研究方向得到了广泛的应用和推广。原位预冻功能有效避免了 样品在转移过程中受到交叉污染。板层温度可控，可以设置梯度升温，进一步优化冻干方案，为客户冻干工艺的建设提供可行性数据。 目前国内血小板主要保存方式是22℃振荡保存，有效期为 5d。 此外血小板还可深低温冰冻保存， 但这种方法的保存效果和临床疗效不确切。 近年冷冻干燥技术已广泛应用于各种生物材料的保存， 冻干制品具有常温下保存、 性能稳定、便于运输的特点。 本研究以过期血小板为原料，探索血小板冻干再水化的条件，检测其冻干再水化后凝血功能的变化， 为过期血小板再利用及新鲜血小板冰冻或低温保存研究提供了依据。 骏德仪器实验型FD-503血液真空冷冻干燥机在市场上应用而生，成功助力各大科研单位，满足了各个客户的实验需求。冻干工艺介绍：1、 材料与方法　　1.1 实验材料　　1.1.1 血小板来源 实验组选择体检合格， 一周内未服用**林等抗血小板药物的自愿献血者，用血细胞分离机单采富含血小板血浆，22℃振荡保存 5d 过期；对照组选择新鲜机采血小板。　　1.1.2 主要试剂和溶液 海藻糖 (CH22O112H2O，北京经科宏达生物技术有限公司)； 牛血清白蛋白(BSA，上海生工生物工程有限公司)；磷酸盐缓冲液(PBS)； 血小板聚集诱导剂二磷酸腺苷(ADP，Sigma公司)；**酶(Sigma 公司)；胶原(Sigma 公司)；瑞斯托霉素(Sigma 公司)；CD62P-PE(Bioscience 公司)；PAC-1-FITC(BDIS 公司 )； 海藻糖加载缓冲液 ( 含50mmol/L 海藻糖，100mmol/L NaCl，10mmol/L KCl，10mmol/L EGTA，pH 为 6.8)；冻干保护剂(含 20%海藻糖 ，1% 牛血清白蛋白 ，9.5mmol/L HEPES，142.5mmol/L NaCl，4.8mmol/L KCl，1mmol/L Mg-Cl2)；复水溶液为 PBS 缓冲液和蒸馏水以 3:1 比例混合制成。 以上试剂和溶液均在有效期内。　　1.2 主要仪器 骏德仪器实验型FD-503血液真空冷冻干燥机（济南骏德仪器有限公司）、恒温振荡水浴、流式细胞仪等1.3 实验方法　　1.3.1 血小板的冻干保存 血小板浓缩液离心洗涤后重悬于海藻糖加载缓冲液中， 将上述悬浮液转移进入离心管中，并用聚四氟乙稀生料带密封，于37℃水浴中振荡孵化 4h。 将孵化后的血小板悬浮液 800g 离心 3min。 去除上层孵化液，得到沉淀的血小板块，加入冻干保护液打散重悬，使用血球**进行计数， 调节血小板在冻干保护液中的浓度为 1×109个/ml。 将制备好的血小板冻干悬浮液装入特制冻干血盒中，密封充注口。 将血小板冻干悬液先以 20℃/min 的速率冻结至-40℃， 预冻 2h后，再以 1.5℃/min 对搁板升温至-30℃，退火 0.5h，然后进入一次干燥，-38℃维持一次干燥条件 20h，zui后以 0.2℃/min 的加热速率使隔板温度升高至20℃，维持二次干燥条件 10h 直至冻干结束。 冻干的血小板密封保存在室温。　　1.3.2 冻干血小板的水化 将 PBS 缓冲液和蒸馏水以 3:1 的比例混合制成血小板冻干复水液，将1ml 复水液在室温下直接加入冻干样品瓶中，轻轻震荡直到样品完全溶解于复水溶液中。　　1.3.3 检测血小板回收率 用血球**分别对冻干前和冻干再水化后的血小板计数， 计算冻干再水化血小板回收率。冻干再水化血小板回收率(%)=冻干再水化后血小板计数/冻干前血小板计数×100%。　　1.3.4 检测血小板稳定性 冻干再水化血小板分别在室温放置 0h、2h、4h、6h、8h 后，用血球**测定血小板回收率。　　1.3.5 血小板形态及超微结构观察 用扫描电镜观察血小板的形态；分别以戊二醛固定、脱水、环氧树脂包埋后制作超薄切片， 用透射电镜观察血小板超微结构变化。　　1.3.6 血小板聚集反应检测 将冻干血小板复水后转入离心管中进行洗涤以去除细胞外保护剂，再用新鲜冰冻血浆重悬血小板， 调整血小板浓度为(0.2~0.3)×1012/L。 用 APACT-2 型血小板**冻干再水化后血小板对四种同浓度诱导剂—凝血酶、胶原、ADP 和瑞斯托霉素的聚集反应。　　1.3.7 血小板表面糖蛋白检测 用三色流式细胞仪分别检测冻干再水化血小板表面激活指标 CD62p和 PAC-1 的表达，经凝血酶激活后测定 CD62p 和PAC-1 的再表达。 再表达率=凝血酶处理后表达率-血小板表达率1.3.8 统计分析 数据以均数±标准差(x±s)表示，采用 SPSS16.0 统计软件进行数据分析处理， 组间差异比较用 t 检验，P0.05 为差异有统计学意义。　　2、 结果　　2.1 血小板回收率及稳定性 实验组和对照组间血小板计数有统计学意义(P0.05)，冻干再水化血小板回收率为 49.36%，见表 1；冻干再水化血小板稳定性随血小板放置时间的延长， 血小板回收率逐渐下降，见图 1。　　　　2.2 血小板形态及超微结构 扫描电镜显示新鲜血小板透光性较强，形态呈圆形或椭圆形，边缘光滑， 而冻干再水化血小板透光性较弱， 血小板变形，见图 2A 和 B。 透射电镜显示新鲜血小板着色较深，α 颗粒、致密颗粒、过氧化酶颗粒等分散、清晰，而冻干再水化血小板着色较浅，致密颗粒及 α颗粒不够清晰，且数目少于对照组，见图 2C 和 D。　　2.3 聚集反应 实验组和对照组间血小板同浓度诱导剂下的zui大聚集率均有统计学意义 (P0.05)，实验组血小板对凝血酶、胶原、ADP 和瑞斯托霉素的聚集功能较对照组均出现下降，见表 2。2.4 血小板表面糖蛋白 实验组 CD62p 表达率和再表达率分别为 50.25%、94.27%，均显著高于对照组的 8.12%、78.43%(P0.05)；凝血酶作用后 CD62p再表达率为 44.02%，显著低于对照组 70.31% (P0.05)。 pac-1="" p=""0.05)，PAC-1 再表达率为42.75%，显著低于对照组 67.29%(P0.05)，凝血酶作用后 PAC-1 再表达率为 38.90%，显著低于对照组 65.28%(P0.05)，见表 3。　　3、讨论　　血小板数目减少或功能不全所致出血性疾患的预防和治疗，临床多采用输注血小板制剂。 血小板保存技术的缺陷是血小板过期浪费和临床供不应求的两难处境的主要原因，因此，研究出一种能长期、、安全和方便的血小板保存方法一直是国内外输血工作者关注的热点和难题。　　将过期的血小板再利用及血小板的冻干保存有着广阔的应用前景。 本研究显示冻干再水化的过期血小板回收率及稳定性较差， 说明冻干和再水化过程对血小板功能造成一定影响， 应进一步改进冻干保存时搁板温度，复水液组分和比例，以及增加预复水步骤。 透射电镜下新鲜血小板着色相对较深， 可能为新鲜血小板生物活性较高或膜通透性相对较高，因而有较强吸附染料的能力。　　CD62p 和 PAC-1 分别为血小板表面活化晚期标志物和活化早期的标志物， 结果显示过期血小板对凝血酶、ADP、 胶原及瑞斯托霉素的zui大聚集率明显小于新鲜血小板，凝血酶作用后 CD62p 和 PAC-1 的再表达率低于新鲜血小板，说明过期以及冻干和再水化过程对血小板凝血功能有影响， 但冻干再水化的过期血小板仍具有一定的存活能力和功能活性， 因此选择血小板进行冷冻干燥保存是血小板长期保存切实可行的方法， 为新鲜血小板冷冻干燥保存提供理论依据。 但对该方法保存血小板的回收率、 稳定性以及凝血功能等还需做进一步研究与改进，以达到临床应用的要求。

蔬菜冻干机设备深加工原理是将新鲜的蔬菜、肉食、水产品速冻后,在真空条件下通过冻干机将物料的水分由固态冰升华成气,使物料脱水干燥。这种冻干蔬菜不需冷藏,在室温下可长期保存不变质,一加水就好似鲜品，是健康无添加绿色食品. 经蔬菜冻干机处理的蔬菜易于长期保存，真空冷冻干燥机加水后能恢复到冻干前的状态并保持原由的生化特性。【冻干机简介】 冻干机（lyophilizer或freeze dryer）起源于19世纪20年代的真空冷冻干燥技术经历了几十年的起伏和徘徊后，在20年中取得了长足进展。进入21世纪，真空冻干技术凭借其它干燥方法无法比拟的优点，越来越受到人们的青睐，除了在医药、生物制品、食品、血液制品、活性物质领域得到广泛应用外，其应用规模和领域还在不断扩大中。为此，真空冷冻干燥必将成为21世纪的重要应用技术。 【冻干机优点】 干燥的方法多种多样，如晒干、煮干、烘干、喷雾干燥和真空干燥等,但普通干燥方法通常都在0℃以上或更高的温度下进行。干燥所得的产品一般都存在体积缩小、质地变硬的问题，易挥发的成分大部分会损失掉，一些热敏性的物质发生变性、失活，有些物质甚至发生了氧化。因此，干燥后的产品与干燥前相比，在性状上有很大的差别。 　 冻干法则基本上在0℃以下进行，即在产品冻结的状态下进行，解析干燥的时候一般不超过60℃。在真空条件下，当水蒸汽直接升华出来后，药物剩留在冻结时的冰架中，形成类似海绵状疏松多孔架构，因此它干燥后体积大小几乎不变。再次使用前，只要加入注射用水，又会立即溶解。型号单位TF-FZG-30隔板面积㎡30散装溶液量L300隔板尺寸宽mm1400深mm2300隔板数量层10+1隔板间距mm65mm隔板温度范围℃-45~+70冷凝器温度℃≤-65冷凝器捕水量KG600极限真空Pa2.7装机功率KW120.0冷却水量m3/H42设备重量T161、冻干箱体和隔板严格按照GMP要求制作，筒体采用304级不锈钢材质，内部镜面抛光。制作工艺及要求高于目前国内常规食品冻干机厂家2、采用箱体冷阱一体式,前箱后阱设计，结构紧凑，设有观察窗，观察窗上配有照明装置，便于观察箱内情况。设计成易清洁， 无卫生死角的结构或形式；3、隔板根据客户需求进行定制板层，可选铝型材板层或者304不锈钢板层。铝板挤压拉丝成型，表面平整及光滑，传热性能好。304不锈钢板层采用表面拉丝方钢型材加工，平整且便于清洁、卫生性好。4、冷阱捕水用盘管采用洁净不锈钢加工。可根据客户需求选用整体式结构或者分体式结构。5、制冷系统零部件均按照高标准进口品牌配置，制冷能力强、降温速度快、性能稳定可靠；6、真空系统根据客户需求提供多样性的真空泵组组合；采用爱发科技术高品质真空泵。7、采用Omron PLC进口品牌控制系统、方便存储数据和操作更易掌握。具有自动/手动两种控制方式，控制方式可任意切换。工艺设定可设置多组；干燥过程中可随时对配方进行修改，并可以任意跳步；8、采用浸泡或者蒸汽化霜，快速化霜和清洁干净。 1、水果类:荔枝、龙眼、香蕉、草毒、水蜜桃、樱桃、苹果、梨、桔子、哈密瓜、菠萝等。2、蔬菜类:如蘑菇、香菇、香椿、黄花菜、芦笋、芹菜、青豆、荷兰豆、豌豆、胡萝卜、番茄、菜花、卷心菜、菠菜、洋葱、辣椒、香菜、玉米等。3、水产类:鱼翅、虾仁、蟹肉、甲鱼、鱿鱼、海参、干贝、海哲、海带、海菜等。4、禽肉类:猪肉、牛肉、蛇肉、羊肉、鸡肉、兔肉、火腿等。5、方便食品类:碗仔面、盒装便餐、婴儿食品、旅游食品、老年食品、军用食品、宇航食品等。6、饮品类:速溶咖啡、速溶茶等固体饮料，果汁、果茶、菜汁、保健茶、营养茶、营养冲剂、红绿茶等。7、调味料类:葱、姜、蒜、汤料、果酱、调理料、香料等。8、保健品类:人参、鹿茸、冬虫夏草、天麻、当归、三七、首乌、山药、蜂王浆、蜂蜜、花 粉、鳖粉、甲鱼、龟类等。9、食品工业原料类:蛋料、豆料、干果粉、植物蛋白粉等。

冻干食品设备TF-FZG-2产品特点：1.预冻与干燥在原位完成，冻干过程自动化，操作简便。2.板层内走循环介质，温度可调节，温差≤1℃，制冷加热效果更均匀。3.触摸屏操作，PLC控制系统，实时监控设备运行情况。4.可与电脑连接，远程操控，存储冻干曲线。5.整体式设计，便于运输及安装，节省空间。6.可连接CIP在位清洗，SIP在位消毒，液压加塞系统等功能。 技术参数：型号TF-FZG-2有效搁板面积(㎡)2搁板工作温度(℃)-30℃~80℃搁板温差(℃)±1℃冷凝器温度(℃)≤-35℃冷凝器捕水量(kg)25箱内极限真空(Pa)10冷却水(≤25℃)流量(T/H)3化霜方法喷淋+水淹使用环境温度5℃~-30℃ 相对湿度＜75%总功率(kw)22面积与高度(㎡x m)15x2.5应用领域：1)烹饪原料类:肉、蛋、鱼、虾、贝、海参、蔬菜；2)调味食品类:葱、姜、蒜、香料、色素、汤料；3)水果类:苹果、香蕉、菠萝、草莓、梨、桃、榴莲、树莓、菠萝蜜等；4)饮品类:咖啡、茶叶、果汁、菜汁；5)保健食品类:人参、山药、蜂蜜、甲鱼、冬虫夏草、枸杞、燕窝等；6)土特产品类:蘑菇、黄花菜、香椿等；7)食品工业原料类:蛋料、豆料、干果粉、植物蛋白粉等；8)特殊食品类:航天、航海、军事、登山、探险等野外作业用食品。