氮杂茂

近年来，随着人们对医疗健康行业需求的不断增长，生物制药行业也在随之蓬勃发展。近两年的新冠疫情quan球大流行，在改变人们日常生活的同时更是催生了生物制药行业对于先进分析技术的需求。蛋白质分离、纯化和分析是生物zhi疗药物开发中的关键组成部分，但该过程可能复杂且极具挑战性。而全柱成像等电毛细管电泳（whole column imaged capillary isoelectric focusing, WC-iCIEF）技术，可以根据蛋白质的等电点（isoelectric point, pI）差异将其分离，在此基础上，将iCIEF与高分辨质谱联用，可以借助质谱的高灵敏度、高分辨率和高质量精度使各种蛋白质变异体的鉴定更容易、更准确。从2021年6月开始，我们与蛋白质成像技术专家 Advanced Electrophoresis Solutions Ltd (AES)宣布达成协议，将蛋白质分离技术与质谱相结合，通过简化表征来推进zhi疗性蛋白质药物的开发。 到目前为止，通过将iCIEF技术与高分辨质谱联合使用，我们已经对单抗、ADC和融合蛋白等多种产品进行了各种层面的表征。下图1~3展示了iCIEF技术对单抗\ADC\融合蛋白的分离结果，可见对于不同种类的重组生物zhi疗性产品，均可根据pI差异将其电荷变异体进行分离，且系统具有优异的稳定性与重现性。图1 iCIEF-UV分析帕博利珠单抗电荷变异体，8针平行进样（点击查看大图）图2 iCIEF-UV分析恩美曲妥珠电荷变异体，3针平行进样图3 iCIEF-UV分析依那西普电荷变异体，3针平行进样我们使用的CEInfinite iCIEF平台（AES）除了高质量的iCIEF-UV功能外，还可以与高分辨质谱直接在线串联，直接测定电荷变异体的分子量，无需额外转换接口。下图4展示了我们使用iCIEF-MS直连技术分析帕博利珠单抗的结果，可见即使是pI仅差0.02的碱峰B1和主峰，也可以在iCIEF上得到基线分离，随后的高分辨质谱分子量测定结果显示该碱峰与主峰相比，主要差异是其中一条重链的N端未发生焦谷氨酸环化。另外观察原始质谱谱图不难发现，得益于Orbitrap高分辨质谱的灵敏度，即使是强度比主峰低2~3个数量级的碱峰B3，仍可得到糖型分布清晰的谱图。图4 iCIEF-MS在线直联分析帕博利珠电荷变异体。上，iCIEF-UV分离图谱。中，碱峰B1与主峰解卷积结果镜像图对此。下，主峰与所有碱峰原始质谱图对比。（点击查看大图） 与市面上其他供应商相比，AES的CEInfinite iCIEF平台具有一个独特优势：可以实现全自动的馏分收集。我们选择了帕博利珠单抗，对其电荷变异体的每个峰离线收集后进行酶解，随后上样至高分辨液质联用平台进行肽图分析。图5展示了酸/碱峰中各种CQA含量的变化，可见轻重链末端、重链糖型和侧链常见PTM的变化趋势。另外通过表1中分离之前/之后特定CQA含量对比可以很明显的发现，经iCIEF分离后，酸/碱峰中特定修饰的比率有明显zhen高，可见基于pI差异，将生物zhi疗性产品的电荷变异体进行分离后，接下来采用肽图进行深入表征的分析策略，能够帮助研究人员将导致电荷异质性的修饰精确定位到氨基酸位点的层面。

近年来，随着人们对医疗健康行业需求的不断增长，生物制药行业也在随之蓬勃发展。近两年的新冠疫情全球大流行，在改变人们日常生活的同时更是催生了生物制药行业对于先进分析技术的需求。蛋白质分离、纯化和分析是生物治疗药物开发中的关键组成部分，但该过程可能复杂且极具挑战性。而全柱成像等电毛细管电泳（whole column imaged capillary isoelectric focusing, WC-iCIEF）技术，可以根据蛋白质的等电点（isoelectric point, pI）差异将其分离，在此基础上，将iCIEF与高分辨质谱联用，可以借助质谱的高灵敏度、高分辨率和高质量精度使各种蛋白质变异体的鉴定更容易、更准确。从2021年6月开始，我们与蛋白质成像技术专家 Advanced Electrophoresis Solutions Ltd (AES)宣布达成协议，将蛋白质分离技术与质谱相结合，通过简化表征来推进治疗性蛋白质药物的开发。到目前为止，通过将iCIEF技术与高分辨质谱联合使用，我们已经对单抗、ADC和融合蛋白等多种产品进行了各种层面的表征。下图1~3展示了iCIEF技术对单抗\ADC\融合蛋白的分离结果，可见对于不同种类的重组生物治疗性产品，均可根据pI差异将其电荷变异体进行分离，且系统具有优异的稳定性与重现性。图1 iCIEF-UV分析帕博利珠单抗电荷变异体，8针平行进样（点击查看大图）图2 iCIEF-UV分析恩美曲妥珠电荷变异体，3针平行进样（点击查看大图）图3 iCIEF-UV分析依那西普电荷变异体，3针平行进样（点击查看大图）滑动查看更多我们使用的CEInfinite iCIEF平台（AES）除了高质量的iCIEF-UV功能外，还可以与高分辨质谱直接在线串联，直接测定电荷变异体的分子量，无需额外转换接口。下图4展示了我们使用iCIEF-MS直连技术分析帕博利珠单抗的结果，可见即使是pI仅差0.02的碱峰B1和主峰，也可以在iCIEF上得到基线分离，随后的高分辨质谱分子量测定结果显示该碱峰与主峰相比，主要差异是其中一条重链的N端未发生焦谷氨酸环化。另外观察原始质谱谱图不难发现，得益于Orbitrap高分辨质谱的灵敏度，即使是强度比主峰低2~3个数量级的碱峰B3，仍可得到糖型分布清晰的谱图。图4 iCIEF-MS在线直联分析帕博利珠电荷变异体。上，iCIEF-UV分离图谱。中，碱峰B1与主峰解卷积结果镜像图对此。下，主峰与所有碱峰原始质谱图对比。（点击查看大图）与市面上其他供应商相比，AES的CEInfinite iCIEF平台具有一个独特优势：可以实现全自动的馏分收集。我们选择了帕博利珠单抗，对其电荷变异体的每个峰离线收集后进行酶解，随后上样至高分辨液质联用平台进行肽图分析。图5展示了酸/碱峰中各种CQA含量的变化，可见轻重链末端、重链糖型和侧链常见PTM的变化趋势。另外通过表1中分离之前/之后特定CQA含量对比可以很明显的发现，经iCIEF分离后，酸/碱峰中特定修饰的比率有明显增高，可见基于pI差异，将生物治疗性产品的电荷变异体进行分离后，接下来采用肽图进行深入表征的分析策略，能够帮助研究人员将导致电荷异质性的修饰精确定位到氨基酸位点的层面。图5 iCIEF-MS离线收集馏分，酶解肽图分析酸/碱峰中各种CQA含量的变化。上，末端修饰变化。中，重链糖基化修饰变化。下，侧链修饰变化（点击查看大图）表1 iCIEF分离前/后特定CQA含量变化情况对比（点击查看大图）这部分工作已经在2021年的美国质谱年会上发表，有兴趣的读者扫描一下二维码下载原文：在精zhun医疗概念兴起的推动下，对生物治疗性产品表征的需求不断增长，将高分辨质谱与基于电荷异质性的iCIEF蛋白质分离技术相结合，将支持我们的客户实现更精确的分析，在持续开发生物治疗性产品的进程中发挥重要作用。如需合作转载本文，请文末留言

仪器信息网讯 一香定天下，一书揭秘诀。2024年3月28日，由茅台集团、中信出版集团、杭州蓝狮子文化创意股份有限公司主办，著名财经作家吴晓波撰写的《茅台传》新书发布会在茅台国际大酒店举行。（图源：吴晓波频道）发布会上，历时三年完成《茅台传》写作的吴晓波先生以“茅台酒的中国式秘籍”为题作主题演讲，围绕“向茅台学什么？”“茅台到底能不能学？”详细解读了他在书中总结出的茅台管理经验“六法十二式”的深刻内涵，阐述了茅台酒的标本价值在于茅台的独一无二，更在于茅台的普适性。他表示，茅台是中国传统手工业向现代制造企业演进过程中的一个样本，是中国文化元素在消费品市场上的一次价值体现，也是企业通过文化营销和价格锚定形成竞争优势的一个经典案例。茅台的成功，是长期主义者的成功，也标志着在文化复兴和K型消费时代（即消费者更愿意购买低价商品或奢侈品，但对于中端商品兴趣不高），中国正迎来创造超级品牌的时间窗口。发布会上，吴晓波将一幅以赤水河为背景，描述茅台酒320年发展历程的山水画卷赠予在茅台工作60年的酿酒大师季克良，在接下吴晓波的礼物后，季老的眼睛似乎略显湿润，分享到：“实际上，我盼望这本书起码有20年左右的时间了。我虽然总结了茅台的发展，但是我不晓得人家眼睛里头是怎么看茅台的，所以我一直盼一直盼。我很感谢你！”（图源：吴晓波频道）言罢，两人心有灵犀，竟不约而同地放下手中话筒，面对面站立，对视片刻，然后弯腰向对方缓缓鞠躬。在令人感动的现场，季老还提了两个不变：第一，科学的东西不能变。传承是要用科学的道理去审视传统的工艺。因此，工艺如果是科学的，那就要坚守好，传承下去。第二，微生物是茅台复杂工艺里最关键的因素之一。因此，凡是有关微生物生长发酵的，也不能变。在两个不变的前提下，季老笑言：“其他，都可以适度创新。能创新的，都创新。”季老所坚持的两个不变，是季老和所有茅台人在几十年实操中透彻出来的道理，这也是吴晓波关于茅台“笨人”战略总结下的又一体现。笨人战略的第一要义，是不跟着聪明人跑，以不变应万变。中国白酒业在产能扩张时期，从政策层到产业圈，有过一次“液态法白酒运动”,很多酒企通过人工香精和人造窖迅速提高产量。在这一浪潮中，茅台酒厂始终坚持最为传统的固态发酵，坚持“以酒兑酒”，绝不加水，坚持酒窖的自然养成，这一度被认为是落后模式的代表。季老的话揭示茅台酒的成功不仅得益于其厚重的历史积淀和出色的营销策略，而且得益于茅台集团对微生物产生的风味研究以及对科学的尊崇。据报道，茅台酒酿造过程中涉及到的微生物种类繁多，已明确的有1946种微生物，包括芽孢杆菌、乳酸菌、酵母菌等。这些微生物在酿造过程中产生的代谢产物，如酸、酯、醛、酮等化合物，对茅台酒的香气和口感有着决定性的影响。例如，乳酸杆菌在初始发酵中的作用，以及毕赤酵母和酿酒酵母在发酵过程中的主要作用，都是形成茅台特有风味的关键因素。茅台酒的独特风味是其成功的关键因素之一。茅台集团通过科学研究，准确地定性了茅台酒中的965种风味物质，并明确了其中730种对风味有贡献，361种起到关键作用。这些研究成果不仅丰富了茅台酒风味物质的数据库和实物标准库，还实现了风味物质的可视化表达，这对于保持茅台酒品质的恒定起到了至关重要的作用。不仅仅茅台，如今，众多酒企都在进行白酒的风味研究，白酒中的特征风味化合物及生物活性成分已成为科学研究的焦点，这些物质不仅影响口感，还可能具有药理活性，对健康有益。而科学研究离不开科学仪器。在科学仪器行业，安捷伦作为科学仪器行业整体解决方案提供商，在食品风味分析领域一直引领相关技术的创新与进步。多年以来，安捷伦通过自主研发结合与行业内专家、学者深入合作的模式，基于色谱、质谱、细胞分析等平台，开发出一系列整体化应用方案，助力食品风味与健康研究高质量发展。2024年4月10日，安捷伦科技（中国）有限公司与北京工商大学食品与健康学院将正式签署合作协议，共同建立“国酒风味研究联合实验室”。此实验室将致力于研究中国白酒的风味特性，推动中国传统酒的研究发展。同期，将举办第二届食品风味研究高峰论坛，邀请行业内专家、学者以及企业代表共同探讨中国白酒风味组分研究进展、风味组学对白酒风味的解析以及安捷伦风味分析整体化解决方案。诚邀关注国酒风味研究的专业人士点击图片预约直播：（点击图片即可预约直播）