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我实验室质谱是LTQ orbitrap, 主要用来做蛋白组学,最近有客户要做氨基酸代谢物定量分析,我建立分析方法,采用一级MS全扫,提取离子定量,做标准曲线(不含基质)发现6个物质只有一个线性在99%以上,其余在96-99之间,标曲6个点最高2ug/ml,最低2ng/ml, 在高浓度区域的点(2ug,1ug)总是在线性下面,响应偏差,形成往上抛物线状,高中低浓度的精密度均很好。是不是浓度过高造成离子抑制,做了些改进,在样品和流动相中均提高甲酸浓度,并在离子源部分提高气流,电压等,线性并未改善。我的样品采用5%DMSO溶解(含甲酸, 不好溶解,所以用DMSO), 流动相采取乙腈-水(含甲酸)。我看到很多文章在用此方法标曲线性均在99以上,可是我总是达不到。是不是离子阱不适合分析这类样品,或者确实是非线性,要用加权最小二乘进行处理。各位有什么建议,做哪些改进能提高线性呢?先行谢过。
噬菌体可以用质谱定量分析吗,不管是根据蛋白或者根据核苷酸。噬菌体的蛋白可以被酶切吗。酶切后定量特征肽段,可行吗?
[color=#444444]看了很多文献的报道,使用[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/Yp][color=#3333ff]液质联用[/color][/url]分析体液中未衍生化的氨基酸时,他们都使用离子对试剂全氟酸(例如全氟庚酸、全氟丁酸等),但是我现在希望不使用任何离子对试剂的帮助,通过反相液相色谱柱进行分离氨基酸,并通过质谱进行定性定量分析。我想问的问题就是我的方案的可行性有多大,有意义吗?(因为如果我的想法可行的话,国外为什么很多报道还是使用离子对试剂呢?)[/color][color=#444444]希望大家帮我多提宝贵意见,谢谢。[/color]