青椒中还原型维生素C 含量检测方案(离心机)

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渤海大学学报(自然科学版)Journal of BohaiU niversity Natural Science Edition)Vol27No.2Jun. 2006第27卷第2期2006年6月 112渤海大学学报(自然科学版)第27卷 青椒中还原型维生素C含量的测定 马占玲，马占彪，夏云生，陈 阳 (1.渤海大学化学化工学院，辽宁锦州121013；2锦州石化公司，辽宁锦州121001) 摘[要：主要介绍了钼蓝比色法测定青椒中还原型维生素C含量的基本原理和方法。并对最大吸收波长和最佳显色条件进行了探究，实验结果是在波长839mm 处有强吸收，维生素c含量在0004-0 024mg/mL 范围内呈线性关系，方法的变异系数小于251%，回收率为97.2%。该方法简单、快速、准确，用此法测得市售青椒样品中的还原型维生素C的含量为0.2390mg/gc 关键词：分光光度法；维生素C；青椒 中图分类号：065 文献标识码：A 文章编号：1673-0569(2006)02-0111-03 维生素C是维持人体正常生理代谢不可缺少的一类有机化合物.。：维生素C在人体内参与氨基酸和神经传递、胶原蛋白合成，具有降低毛细血管的通透性，刺激凝血功能、增加对感染的抵抗作用等2]人体缺少维生素C会引起多种疾病，如坏血病就是人体缺乏维生素C引起的疾病。然而人体所需的维生素C大多数由新鲜的蔬菜供给，新鲜的青椒中维生素C的含量很高。 因此，测定包括青椒在内的新鲜蔬菜中维生素C的含量是营养分析的重要内容。 还原型维生 的测定方法很多，有荧光分光光度计法[3，过氧化物酶法[4]，2，6-二氯靛酚法I5]2等。由于它较易被空气中的氧所氧化，上述方法存在着各种各样的缺陷。本实验选择钼蓝比色分光光度法，因为磷钼酸铵经还原剂维生素C还原后，可以生成亮蓝色的络合物，通过分光比色可以测定青椒中还原维生素C16。。本法快速、准确、灵敏度高。 1 实验部分 1.1 仪器与实验材料 紫外-可见分光光度计(UV-1600，日本本津)；6%的钼酸铵溶液：准确称取角酸铵30 0000g，加适量蒸馏水溶解后定容至500mL；草酸- EDTA溶液：准确称取含结晶水的草酸6 5000g，EDTA 0 0600g，充分溶解定容至1000mL；偏磷酸-醋酸溶液：溶解20g片状偏磷酸于40mL醋酸中，稀释至500mL，用滤纸过滤，取滤液备用；标准Vc溶液：准确确取Vc0 0500g；用上述配好的草酸-EDTA溶液定容于100mL 的容量瓶中，使标准液浓度达到05mg/mL；6%的硫酸溶液。 12 实验方法 准确称取一定量的市售青椒，加入草酸- EDTA 溶液，用搅碎机捣碎后移入250mL容量瓶中，定容，过滤，滤液即为待测样品的提取液。吸取上述青椒的提取液lmL 于25mL 的容量瓶中，加入900mL草酸- EDTA 溶液100mL偏磷酸-醋酸溶液和3.00mL 的硫酸，最后再加入3.00mL 钼酸铵，显色 ( 收稿日期：2006-03-08 ) ( 作者简介：马占玲(1970-)，女，讲师，从事分析化学教学科研工作 ) 后，以蒸馏水为参比测其吸光度。 2 结果与讨论 21 最大吸收波长的确定 取一定量的Vc05mg/mL 标准溶液，采用1.2所述的方法进行显色后，在波长600mm-1100nm范围内用UV-1600紫外可见分光光度计进行波长扫描，结果见图1. 由图1可见钼蓝的络合物在839mm处有最大吸收值，本实验选择839mm 为测定波长。 22 钼酸铵用量的影响 图1 钼蓝络合物的吸收曲线 固定硫酸和Vc标准溶液的用量，改变钼酸铵的用 量，测其吸度。结果见图2。由图2可见随着钼酸铵用量的增大，吸光度也随之增大，在3.00mL 左右吸光度达到最大值，本法选用3.00mL 钼酸铵。 图2 钼酸铵用量对吸光度影响的曲线 图3 硫酸用量对吸光度影响的曲线 23 酸度的影响 其他条件固定，改变硫酸的用量，测其吸光度。以硫酸的用量为横坐标，吸光度为纵坐标，做曲线，结果见图3。由图3可见硫酸的体积在400mL以内，吸光度比较稳定，但大于400mL 后随之减小，超过5.00mL 后吸光度骤然下降。所以本实验硫酸的体积选用3.00mL. 24 显色时间的确定 吸取1.00mL标准溶液Vc 于25mL 容量瓶中，在上述最佳实验条件下进行显色后，在不同的显色条件下测其吸光度，结果表明该体系在草酸- EDTA 介介中于室温下13m in 后反应达到稳定，本实验选择室温下显色时间为13m in。 25 标准曲线的确定 分别吸取020、040、060、080、1.00、1.20mL 的标准Vc(0 5mg/mL)溶液于25mL的容量瓶中，分别加入草酸-EDTA 9 80、960、940、9 20、900、8 80mL，再分别加入1.00mL偏磷酸-醋酸溶液，3.00mL 的硫酸溶液和3.00mL 的钼酸铵溶液，显色后测定其吸光度。绘制出以溶液浓度(C)为横坐标，吸光度A为纵坐标的标准曲线。，通过实验方法测定Vc浓度与吸光度之间的标准曲线方程为： 13.580C+ 0 002，相关系数 r= 0 999。Vc浓度在0004-0024mg/mL 范围内服从比耳定律。 26 样品，回收率和变异系数的测定 准确称取市售青椒176 7914g，经过处理后配成溶液，用上述方法平行测定6次。测得吸光度，在标准曲线上查出对应浓度，并从实验结果计算出相对平均偏差，回收率和变异系数，见表1。 表1 样品的测定结果序号 序号 吸光度 对应浓度 平均浓度 加入Vc量 测定平均 回收率/% RSD/% mg/L /mg/L /mg 值/mg/L 1 0 0906 689 2 00848 645 3 00885 673 6 76 20 852 97.2 251 4 00889 676 5 00898 683 6 00910 692 经过计算市售青椒样品中的还原型Vc的含量为Q 2390mg/g，回收率为97.2%。变异系数为251%。 3 结论 本文选用钼蓝分光法测定青椒中Vc的含量。并通过实验确定最大吸收波长，硫酸和磷钼酒铵的最佳用量和最佳的显色时间。并在最佳条件下测定样品中Vc含量，该方法简便、快速、准确。 ( 参考文献： ) ( [1]王喜生人体营养状况的评价方法M]天津：天津科学技术出版社，1987：323-326 ) ( [2]南京药学院药物分析M]北京：人民卫生出版社，1980. ) ( [3]杨新斌维生素C含量的测定[J]四川化工与腐蚀控制，2001，4(12)：17 ) ( [4]翟永信现代食品分析手册[M]北京：北京大学出版社，1988 ) ( [5]刘福岭，戴行钧.食品物理与化学分析方法M]北京：轻工业出版社，1987. ) ( [6]王占文，陈玉銮磷钼杂多酸光度法测定药物和食品中抗坏血酸[]分析化学，1991，19(3)：357-361. ) Detem ination of content of reduction-l-type vitam inC in green pepper MA Zhan-ling ，MA Zhan-biao，XIA Yun-sheng，CHEN Yang (1. College of Chem istry and Chem ical Eng ineering，Bohai U niversity，Jinzhou 121013，China；2 Jinzhou Petrochem ical Company， Jinzhou 121001，China) Abstract In this paper， the method that the content of reduction- type type vitam in C in greenpepperis detem ined w ith molybdenum blue co lorim etry is introduced.The max im um of abso rp tionwavelength and the optim um technical conditions are detemm ined in the experim entThere is a strongabsorption at 839nm . The linear range of detem ination is 0 004-0 024mg/mL.. The coefficient ofvariation is less 2 51%.The recovery is 95. 1%~ 96 7%. Key words： vitam in C； ultraviolet- visible spectropho tom eter， green pepper ◎China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http：//www.cnki.net