牛血清白蛋白中分子量检测方案(生物质谱)

智能文字提取功能测试中

SSL-CA20-394Excellence in Science Excellence in ScienceMALDI-021岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterTel：86(21)34193996Email： sshzyan@shimadzu.com.cnhttp：//www.shimadzu.com.cn 使用 MALDImini-1紧凑型 MALDI 数字离子阱质谱仪高灵敏检测牛血清白蛋白的分子量 MALDI-021 摘要：本文展示了应用 MALDImini-1紧凑型基质辅助激光解吸电离数字离子阱质谱((MALDI-DIT)对低浓度牛血清白蛋白 (BSA) I(上样量100 fmol) 进行分子量检测的案例，表明 MALDImini-1检测蛋白质分子量的灵敏度较高，结果准确，可以满足 m/z 650-70000以内蛋白质分子量检测的要求。 关键词：数字离子阱质谱 MALDImini-1分子量检测 牛血清白蛋白 基质辅助激光解吸电离(MALDI)是一种适用于生物大分子质谱分析的软电离方法，岛津的田中耕一先生由于对该技术的发明贡献于2002年被授予诺贝尔化学奖。MALDI 离子源与飞行时间质谱(TOF)技术联用，即 MALDI-TOF 质谱，被广泛应用于生物大分子的分子量检测。相对于传统体型较大的 MALDI-TOF质谱，岛津又开发了整合 MALDI 离子源和数字离子阱(DIT)(岛津原创技术)的紧凑型 MALDI-DIT质谱仪——MALDImini-1，该质谱仪小巧轻便，操作简单，仅需微量样品和极短的抽真空时间，即可快速实现 m/z 650-70000 Da 内的多肽/蛋白质样品的高灵敏分子量检测 分析。为了对 MALDImini-1检测蛋白质的性能进行验证，考虑到市场上主流的 MALDI-TOF 质谱产品蛋白质检测灵敏度参数为100-500 fmol BSA(牛血清白蛋白)，本文以 100 fmol BSA 为例，应用 MALDImini-1紧凑型MALDI-DIT 质谱仪对样品进行了分子量检测考察，结果显示质谱信号清晰可见、信噪比良好，检测到的分子量与理论值相符，表明 MALDImini-1检测蛋白质分子量的灵敏度较高，分子量准确，与传统 MALDI-TOF相比毫不逊色，可以满足 m/z 650-70000 以内蛋白质分子量检测的要求。 实验部分 1.1仪器 MALDImini-1紧凑型 MALDI数字离子阱质谱仪 图1岛津 MALDImini-1质谱仪 1.2仪器参数 调谐模式：线性正离子模式 激光器：349nm 固态激光器 扫描范围：m/z 10000-70000 激光能量：60 1.3样品前处理 取5 pmol/uL 的 BSA 样品原液加入含有0.1%三氟乙酸的乙腈水溶液(乙乙：水=30：70)稀释50倍，配置为 100 fmol/uL的样品工作液。取1uL样品工作液和1uL芥子酸基质(SA， 浓度为20 mg/mL) 点靶，自然干燥后将靶板放入质谱进行分析。 结果与讨论 100 fmol(上样量)牛血清白蛋白的一级质谱检测结果如图2所示。从结果来看，样品质谱信号清晰可见，检测到单电荷(约 m/z 66400))、二电荷(约m/z33200)和三电荷(约m/z 22100)的信号峰，与理论值m/z66430(单电荷)、m/z33215)((二电荷)、m/z22144(三电荷)i)一致。 图2100 fmol BSA 的一级质谱图 结论 本文应用紧凑型 MALDI 数字离子阱质谱仪 MALDImini-1检测 100 fmol 牛血清白蛋白的分子量，质谱图信噪比良好，检测结果与理论值相符。MALDImini-1作为紧凑型基质辅助激光解吸电离数字离子阱质谱仪，体积小巧、功能强大、性能卓越，是进行蛋白质分子量检测的有力工具。 岛津应用云 基质辅助激光解吸电离（MALDI）是一种适用于生物大分子质谱分析的软电离方法，岛津的田中耕一先生由于对该技术的发明贡献于2002年被授予诺贝尔化学奖。MALDI离子源与飞行时间质谱（TOF）技术联用，即MALDI-TOF质谱，被广泛应用于生物大分子的分子量检测。相对于传统体型较大的MALDI-TOF质谱，岛津又开发了整合MALDI离子源和数字离子阱（DIT）（岛津原创技术）的紧凑型MALDI-DIT质谱仪——MALDImini-1，该质谱仪小巧轻便，操作简单，仅需微量样品和极短的抽真空时间，即可快速实现m/z   650-70000   Da内的多肽/蛋白质样品的高灵敏分子量检测分析。为了对MALDImini-1检测蛋白质的性能进行验证，考虑到市场上主流的MALDI-TOF质谱产品蛋白质检测灵敏度参数为100-500   fmol BSA（牛血清白蛋白），本文以100 fmol BSA为例，应用MALDImini-1   紧凑型MALDI-DIT质谱仪对样品进行了分子量检测考察，结果显示质谱信号清晰可见、信噪比良好，检测到的分子量与理论值相符，表明MALDImini-1检测蛋白质分子量的灵敏度较高，分子量准确，与传统MALDI-TOF相比毫不逊色，可以满足m/z   650-70000以内蛋白质分子量检测的要求。