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孔雀石绿、隐性孔雀石绿中主要成分含量检测方案

检测样品杀菌剂

检测项目主要成分含量

方案详情文

有机色素孔雀石绿用作观赏鱼的白点病或烂尾病的治疗药物（抗菌剂），但在日本国内不允许用于养殖鱼。2004年12月16日，日本厚生劳动省颁发了食安监发第1216002号[关于养殖鱼的孔雀石绿分析法]的通知，定量试验采用HPLC法，确认试验中采用LCMS法。另一方面，孔雀石绿在体内代谢为隐性孔雀石绿，因此，需要对这2种成分进行同时分析。本文介绍了孔雀石绿以及隐性孔雀石绿的LC-MS同时定量法。

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LCMS 分析孔雀石绿隐性孔雀石绿有机色素孔雀石绿用作观赏魚的白点病或烂尾病的治疗药物(抗菌剂)，但在日本国内不允许用于养殖鱼。2004年12月16日，日本厚生劳动省颁发了食安监发第1216002号「关于养殖鱼的孔雀石绿分析法」的通知，定量试验采用HPLC法，确认试验中采用LCMS法。另一方面，孔雀石绿在体内代谢为隐性孔雀石绿，因此，需要对这2种成分进行同时分析。本文介绍了孔雀石绿以及隐性孔雀石绿的LC-MS同时定量法。孔雀石绿具有铵离子基团，隐性孔雀石绿具有二甲胺基，因此离子化采用正离子ESI法。在这些化合物的分析中，流动相的pH值很重要，对于离子化效率、谱图模式以及保留时间都有影响。本文中采用流动相为5mM甲酸铵(pH3.0)/乙腈=20/80。并且，隐性孔雀石绿会因紫外线照射而使离子化效率下降，对检测和定量造成不良影响，因此，在分析时不通过UV检测器。本分析条件高灵敏度地检测出0.8 ppb的孔雀石绿以及隐性孔雀石绿，两个成分在0.8-40 ppb范围内线性良好。图1 孔雀石绿以及隐性孔雀石绿的SIM色谱图图2 孔雀石绿以及隐性孔雀石绿的正离子ESI质谱图图3 孔雀石绿以及隐性孔雀石绿的工作曲线表分析条件色谱柱： Phenomenex Synergi 4u Fusion-PR 雾化气流速：：1 1.5L/min 80A(2.0mmI.D.x150mmL.) 干燥气压力：0.1MPa 流动相：5mM甲酸铵缓冲液(Ph3.0)/乙腈 CDL 温度：250℃ =20/80 加热块温度：200℃ 流速：0.2mL/min CDL， Qarray 电压：默认值进样体积：2uL 扫描范围：m/z 100-500 柱温：40℃ SIM： m/z329(孔雀石绿) 电压：+4.5kV(ESI-Negative mode) m/z331(隐形孔雀石绿) CDL 温度：250℃ ( 注：数据出自日本 CSC )

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