木薯中粗淀粉检测方案

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旋光法测定木薯粗淀粉的含量 木薯粗淀粉的测定由国标GB5009. 9- 85 规定。在实际操作中HCl水解温度和时间对测定结果影响很大,操作繁琐,偶然误差大,重现性较差。我们借鉴了谷物籽粒粗淀粉的测定方法GB5006- 85, 利用淀粉具有旋光这一特性,选择氯化钙—乙酸作液化剂,对木薯淀粉测定进行了研究，得出了GB5006- 85 国标法同样适用于木薯粗淀粉的测定这一结论。 1　材料与方法 1. 1　材料与仪器 CaCl2- HAc 溶液　溶解5份重的CaCl2·2H2O于6份水中,调节其比重( 20℃) 为1. 30, 用pH 计测定pH 至2.3,过滤至清澈为止; 30%ZnSO4溶液; 15%亚铁氰化钾溶液。 全自动旋光仪。 1. 2　实验方法 1. 2. 1 木薯淀粉纯品的制取　 将制得的木薯淀粉粗品用3%的NaOH溶液洗涤,搅拌几分钟,上离心机离心, 抽去上清液,重复3～4 次要抽去的上清液显无色纯净为止。再用无水甲醇清洗, 搅拌几分钟, 上离心机离心, 抽去上清液, 重复3 次, 放入真空干燥箱中( 55～56℃) 干燥, 即得木薯淀粉纯品。 称取0.1000g制得的木薯淀粉纯品,入10ml,0.5mol/ L NaOH在85℃水浴中加热分散, 再加入21.5ml,2mol/ L盐酸溶液, 在沸水浴中回溶回流水解2h。用费林氏液法( GB5509. 9- 85) 测定淀粉含量。表1 是平行测定淀粉的几组数据。 测得制取的木薯纯品淀粉含量94.8%, 由上表也可以看出, 费林氏液法弊端, 重复性较差。 1. 2. 2　木薯比旋值[ A]D　 称取木薯淀粉纯品1.000于250ml三角瓶中,加60ml CaCl2-HAc溶液,放在120±1℃恒温油浴中,使之沸腾,恒温半小时,取出冷却,用水洗至100ml容量瓶中, 加1ml 30% ZnSO4 溶液充分摇匀后再加1ml 15% 亚铁氰化钾溶液,再摇匀,用水定容,用慢速滤纸过滤,滤液用于测定。同时作几次平行实验。将滤液倒入旋光仪的旋光管中上旋光仪, 读其旋光度, 代入公式： 得出木薯淀粉的比旋值。表2是几组平行实验数据: 本实验测得[ A]20D ≈203, D 为钠光源 589nm, 此数值与谷物类在同样实验条件下的比旋值是一致的。 1. 2. 3　样品的测定　 称取磨细的烘干样品2.5000g于离心管中,取鲜样测水份,先用石油醚脱脂, 后加入86% 酒精150ml搅拌几分钟,上离心机离心,抽掉上清液。再用石油醚150ml 分三次搅拌几分钟,上离心机离心,去掉上清液,将离心管底部沉淀物用60mlCaCl2-HAc 溶液完全洗入250ml三角瓶中, 在118±1℃的恒温甘油浴中恒沸半小时,取出冷却,完全洗入100ml 容量瓶中,加1ml ZnSO4 溶液摇匀,再加1ml 亚铁氰化钾溶液,摇匀,用水定容。用慢速滤纸过滤, 滤液倒入旋光仪旋光管中, 在旋光仪上读出旋光度, 代入以下公式求出淀粉的百分含量: 式中: W 为样品重量( g ) , L 为旋光管长度( dm) 此步骤和计算公式与谷物籽粒粗淀粉测定方法是一致的。 1. 2. 4　回收率的测定　 精密称取烘干样品2.5g ,加入一定量的木薯淀粉纯品, 按样品测定过程的操作步骤, 测定淀粉含量, 计算其回收率, 本实验回收率为101.7% 。 2　实验结果讨论 2. 1　本方法原理是利用淀粉旋光这一特性,借鉴国标法GB5006-85谷物籽粒粗淀粉的测定法,用木薯淀粉纯品测定其比旋值,得出的[ A]D为203,与谷物类在实验条件相同的条件下的[ A]D相吻合。所以,木薯粗淀粉的测定可以用国标GB5006-85方法来测定。 2. 2　木薯粗淀粉测定用GB5006-85, 结果重复性好,操作简便, 比国标法GB5009.9-85 数据稳定, 步骤少。 2. 3　木薯中可溶性糖含量较高, 用80%的酒精脱糖, 用石油醚脱脂。 PAGE - 1 -