肉制品中营养成分检测方案

智能文字提取功能测试中

Norbert Helle and Monika Bzduch. TeLA GmbH BremerhavenRebecca Veeneman. 通过自动样品制备测定三文鱼油中的脂肪酸甲酯(FAMEs) 应用报告区域 前言 本文中使用安捷伦 7696A样品制备工作台对脂肪酸(FAs)进行自动衍生化处理。由于游离脂肪酸在气相色谱上易产生拖尾，通常将脂肪酸转换成脂肪酸甲酯(FAMEs)的形式进行测定。人工样品衍生化既费时重复性又差。而自动衍生化操作不仅节约了大量时间，而且极大地提高了结果的重复性。尤其对某些高度不饱和脂肪酸，人工衍生化过程中，反应温度和时间的微小变化都会对重复性产生负面影响。 三文鱼油是一种生产多不饱和Q-3脂肪酸的优质原料。其中两种主要的脂肪酸-廿碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)已经被确认是影响健康的重要因素，其与心脏的正常功能密切相关。EPA 和 DHA 的浓度是三文鱼油胶囊质量好坏的关键性指标。本应用重点阐述了使用安捷伦 7696A 样品制备平台对三文鱼油胶囊中的 EPA和 DHA 进行衍生化和测定。 材料和方法 在2mL自动样品瓶中称量10 mg 三文鱼油用于样品制备。用500 pL 甲基叔丁基醚(TBME)稀释样品，采用安捷伦 7696A样品制备工作台的液体配制模块，在工作台的涡旋混合器上将样品混和 90 s。将250pL 混匀的样品移移至另一空的样品瓶中，加入125pL三甲基氢氧化硫((TMSH)衍生化溶液[MachereyNagel， Duren]， 再将此样品瓶在工作台的涡旋混合器上混匀。将混合液在单瓶位加热器上80°℃加热5 min。安捷伦7696A 样品制备工作台的自动化操作流程图见图1。 文中使用的气相色谱条件如表1所所。 表1 GC/FID 工作条件 色谱峰 C14：0 肉豆蔻酸 C16：0 棕榈酸 C16：1 棕榈油酸 C18：0 十八烷酸 C18：1 油酸 C18：2 亚油酸 C20：0 花生酸 C18：3 y-亚麻酸 C20：1 顺9-二十碳烯酸 C18：3 亚麻酸 C22：1 芥酸 C20：4 花生四烯酸 C20：5 廿碳五烯酸 C24：1 神经酸 C22：6 二十二碳六烯酸 GC色谱条件 仪器 安捷伦 6890系列 GC 色谱柱 HP 88， 100 mx250 pm， 0.20 pm 进样体积 2pL 进样口 分流/不分流，分流比50：1 载气 H2 柱箱温度 70°C-260 °C 载气流速 1.4 mL/min 检测器 250°C， FID H2： 40 mL/min 安捷伦工作台操作程序 图1 安捷伦7696A 样品制备工作台制备样品的流程图 图2为7696A自动化制备三文鱼油样品后分析得到的 FAMEs分离谱图。该谱图的分离度可明确识别出所有 FAMEs。最受关注的两种主要脂肪酸的保留时间分别为 35.07 min (EPA)和40.55min (DHA)。除了含有23.7% EPA 和20.0% DHA外，三文鱼油中还含有不饱和脂肪酸油(12%))，，亚油酸(11%)和棕榈油酸(8%)，饱和脂肪酸的含量相对较低，棕榈酸和硬脂酸的含量分别为4%和5%。 重复性检验：将10个独立的三文鱼油样品分别进行衍生化和测定，以验证自动样品制备和色谱分析的重复性。正如图3所示，均获得了良好的重复性结果。 EPA 和 DHA 几次测定的绝对峰面积的标准偏差均小于1%(EPA 0.51%， DHA 0.78%)。此外， EPA和 DHA 的相对浓度差别比较恒定，得到相对标准偏差分别为EPA， 0.85%和DHA， 1.22%。10个样品中均未测定到离群值。 使用安捷伦 7696A样品制备工作台制备样品的总过程仅耗时20 min， 而人工衍生化过程根据实验室工作人员的熟练程度不同最长可达2个小时。 图3 三文鱼油中 FAME 自动化测定的重复性数据 图4 EPA甲酯(左)和DHA甲酯(右)的结构图 图2 使用安捷伦 7696A 工作台制备三文鱼油样品后经 GC/FID 检测得到的色谱图 表2 三文鱼油样品脂肪酸的构成 结论 自动化样品衍生是一种简便、快速并可靠的处理方法。尤其对那些多不饱和脂肪酸含量较高的样品，自动样品制备比人工样品制备更加可靠。 ( 参考文献 ) ( 1. A nimal and vegetable fats and oils - Gas c h romatogra- phy of fatty acid methyl esters- P a rt 3 ： Preparation o f methyl esters using trimethylsulfonium hydroxide(TMSH) (ISO 12966-3：2009) ) 更多信息 有关我们产品和服务的更多信息，请访问www.agilent.com/chem/cn。 www.agilent.com/chem/cn 安捷伦科技公司对本资料中所包含的错误，以及由于使用本资料所引起的相关损失不承担责任。 本书中的信息、说明和性能指标如有变更，恕不另行通知。 C安捷伦科技(中国)有限公司 2012年1月30日，中国印刷 5990-9799CHCN Agilent Technologies C C C C C C C C C C C C C C C . . . . . . . . . .