奥贝胆酸中液相分析检测方案(液相色谱柱)
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尝试使用资生堂CAPCELL PAK C18 MG S5;4.6mm i.d.×250mm色谱柱在0.02%磷酸/乙腈梯度条件下进行分析,由于奥贝胆酸为末端吸收,在10mg/mL浓度下进样50μL,调整波长后发现主峰中含有一明显杂质峰。
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Nov. 13, 2015LC Application Lab, Shiseido China2 Jing Yuan Street,BeijingEconomic Technological Development Zone,Beijing, China 100176Phone 010-6785-6801,FAX 010-6785-6882 No.31, BDA International Business Park, 奥贝胆酸的液相分析 尝试使用资生堂CAPCELL PAK C18 MG S5;4.6mm i.d.×x250mm色谱柱在0.02%磷酸/乙腈梯度条件下进行分析,由于奥贝胆酸为末端吸收,在10mg/mL浓度下进样50uL,调整波长后发现主峰中含有一明显杂质峰,不同波长分析图如图1图2所示,主峰与杂质峰光谱对比图如图3所示,图4为PDA计算纯度图。 55%(5min)->83%(45min)->100%(50min)->100%(70min)-> 55%(70.1min) 1.0mL / min 35°C 流速温度检测PDA 200nm、240nm浓农度10mg/mL 进样量: 50uL 继续尝试使用金刚烷基键合的与通常 C18有较大分离选先区别的 ADME 色谱柱对该样品进行分析,调整梯度条件后,得到图5、图6结果,杂质光谱对比图如图7,图8为主峰纯度图。 图5 ADME色谱柱样品分析200nm谱图 图6 ADME色谱柱样品分析240nm谱图 图7光谱对比谱图 Total peak purity: 1.000000 图8主峰纯度分析图 HPLC Conditions : 色谱柱: CAPCELL PAKADME S5;4.6mm i.d.×250mm 流动相: A: 0.02%甲酸B:90% CH3CN B%55%(0min)-> 55%(5min)->70%(35min)-> 100%(40min)->100%(45min) -> 55%(45.1min) 流速1.0mL/min温度检测浓度 35°C PDA 200nm、240nm 10mg/mL 进样量: 50 uL 综上所述,通过目前对比,客户所关注杂质峰可能得到分离,但需要单标进行最终确认。 尝试使用资生堂CAPCELL PAK C18 MG S5;4.6mm i.d.×250mm色谱柱在0.02%磷酸/乙腈梯度条件下进行分析,由于奥贝胆酸为末端吸收,在10mg/mL浓度下进样50μL,调整波长后发现主峰中含有一明显杂质峰。
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