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美国怀雅特技术公司北京代表处公司网址： www.wy com www.wyatt.com.cn公司邮箱： info@wyatt.com.cn 热休克蛋白/分子伴侣 当受到外界压力刺激时，包括高温，氧化剂以及毒素等，所有细胞都会产生一种热休克蛋白 (HSPs)。大部分热休克蛋白都是分子伴侣，在蛋白折叠、装配、跨膜转运以及降解的过程中，可与蛋白发生键合并协助蛋白保持稳定。 根据分子量大小和同源程度， HSPs可分成四类高分子量 HSPs 和一个小分子量 HSPs (sHSPs)家族。sHSPs (12-43kDa)很容易形成多聚体复合物。尺寸排阻色谱(SEC) 常用来表征这些复合物。 为了更好的理解温度升高时 HSPs 的应激反应，在与体内环境类似的条件下，我们使用 SEC 测定了不同温度下的一种sHSPs， 该 sHSPs 来自一种超嗜热细菌，詹氏甲烷球菌。传统的 SEC 方法，是通过蛋白标准品做柱校正，测样品的分子量，但是当标样变性或者随着温度逐渐升高，沉降在柱子上时，这一方法就不再适用。 要测定 Mj sHSP 在不同温度下的绝对分子量，我们在 SEC 系统中接入多角度激光检测器。SEC 系统包含 shodex 804KW蛋白色谱柱， wyatt 公司的帕尔贴加热制冷DAWN EOS，以及 wyatt 公司的 OptilabDSP 示差折光检测器。 Mj sHSP 复合物在三个不同测试温度，25度，40度和75度下的绝对分子量完全一致，均为375KD，如图所示。该结果也表明，随着温度逐渐升高， MjsHSP复合物没有受到损坏，与 HSP的性质相符。 图2展示的是 Debye 图，与y轴的截距可得到多角度激光的摩尔质量，当分子半径大于10nm时，它的斜率可得到均方根半径。 图125度，40度和75度下 MALS 测得的 MW随洗脱体积的叠加图。25度时的样品浓度是其他两个温度下的两倍。 图2 MjsHSP 复合物在75度下得到的 SEC色谱峰，其中的一个光散射数据切片对应的 debye 图。 MjsHSP 复合物的这些结果表明， MALS 检测器是测定蛋白，尤其是不同温度下的 HSP 绝对分子量的便捷且有力的工具，测定过程中不需要任何标样且无需对柱子进行柱校正。
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美国怀雅特技术公司北京代表处为您提供《热休克蛋白中分子量、变温检测方案(凝胶色谱仪)》，该方案主要用于治疗类生物药品中其他检测，参考标准《暂无》，《热休克蛋白中分子量、变温检测方案(凝胶色谱仪)》用到的仪器有null。
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