食品中甜蜜素检测方案(毛细管柱)

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北京豫维科技有限公司联系人：水先生电话：1891184992380 化学分析计量2010年，第19卷，第6期 北京豫维科技有限公司联系人：水先生电话：1891184992381王宏萍：Rtx-1毛细柱气相色谱法测定食品中的甜蜜素 Rtx- 1毛细柱气相色谱法定定食品中的甜蜜素 王宏萍 (临汾市质量技术监督检验测试所，临汾 041000) 甜蜜素化学名为环己基氨基磺酸钠，白色针状、片状结晶或结晶状粉末，易溶于水，无臭、味甜，其稀溶液的甜度约为蔗糖的30倍。甜蜜素的价格低廉，在食品中多作为蔗糖的代用品，是国家批准使用的添加剂。如果经常食用甜蜜素含量超标的食品，就会因摄入过量对人体的肝脏和神经系统造成危害，特别是对代谢排毒能力较弱的老人、孕妇、儿童危害更明显。因此我国国家标准 GB2760-2007《食品添加剂食品卫生标准》格规定了添加剂的使用范围及用量。 GB /T 5009. 97-2003中第一法为气相色谱(填充柱)法测定食品中的甜蜜素含量，在实际应用中发现国标中的标准曲线的制作不科学，计算公式只适于液体试样，另外填充柱法易造成峰型拖尾给积分结果带来了一定的不确定性等问题。笔者结合以上问题对该测试方法进行了改进，改进后方法的原理是甜蜜素在硫酸介质中与亚硝酸反应，生成的环己醇亚硝酸酯经正己烷提取后用Rtx-1毛细柱气相色谱直接进样测定，外标法定量。 1 实验部分 1.1 主要仪器与试剂 气相色谱仪：GC-2010型，附带FD检测器和自动进样器，日本岛津公司； 甜蜜素：纯度98%以上； 正己烷、亚硝酸钠：优级纯； 硫酸、氯化钠：分析纯： 亚硝酸钠溶液：50g/L； 硫酸溶液：100g/L； 甜蜜素标准溶液：10 mg/mL，精确称取1.0000g甜蜜素，加入水溶解并定容至100mL，低温保存。 1.2 试样的制备及处理 试样按 GB/T5000.97进行处理。。在测定含乳饮料、豆乳饮料等含蛋白样品时，由于基质中的蛋白质可能会把甜蜜素键合包裹起来，直接用溶剂提取时难以把甜蜜素充分提取出来，且加入正己烷后较难分层，此时可以先加入蛋白沉淀剂使蛋白质变性沉淀后再加入亚硝酸钠和硫酸溶液处理 1.3 色谱条件 色谱柱：Rtx-1(30 m X0. 25 mm，0. 25 um)，350℃Max；柱温：80℃；汽化温度：150℃；检测器温度：250℃；氮气流速：1.00 mL /m in；氢气流速：47.0mL/m in；空气流速：400.0mL/min；尾吹气流速：30.0mL/m in；分流比：251. 1.4 标准曲线的绘制 准确吸取甜蜜素标准溶液 0.5、1.0、2.0、3.0、5.0mL(相当于含5、10、20、30、50mg甜蜜素)分别置于50mL带塞的比色管中，加水 20mL。置冰浴中，加入5mL的亚硝酸钠溶液，5mL的硫酸溶液，摇匀，在冰浴中放置30min，并经常摇动，然后准确加入10 mL正己烷，摇匀，加入5g氯化钠，然后置漩涡混合器上振动1min(或振摇80次)，静置30min，取各浓度标准系列上清液1uL注入气相色谱仪，以甜蜜素含量x为横坐标，峰面积y为纵坐标进行线性回归，得线性方程 y=1644 964x2880154，线性相关系数 r=0.99966，线性范围为0~50mg. 1.5 样品溶液的测定 按1.3色谱条件，取按标准曲线制作同样处理的样品液(上清液)1uL注入气相色谱仪，测得峰面积响应值，由线性方程计算出甜蜜素的含量。 1.6 结果计算 液体试样的含量按式(1)计算。 式中：X——试样中甜蜜素的含量， g/kg M——由线性方程计算出的试样中甜蜜素含量，mg； M——试样的质量，g. 固体试样的的含量按式(2)计算。 式中：V——试样液定容的总体积，mL； —-测定用的试样液吸取的体积，mL。 ( 收稿日期：2010-09-30 ) 2 结果与讨论 2.1 色谱图 按 1.3色谱条件，对甜蜜素标准溶液进样分析，色谱图见图1. 图1 甜蜜素标准溶液色谱图 由图1可知，甜蜜素标准品进样后出现一大一小两个色谱峰(=4099，6=4.320)，且峰形很好，大、小峰的峰面积之比不定，同时以大峰的峰面积或两峰的峰面积之和分别定量以考察对测定结果的影响，以大峰的峰面积或两峰的峰面积合并计算，线性方程的线性相关系数均大于0.999，两峰均可以作为定量的依据。由于小峰的峰面积很小，不会对定量结果产生影响，可以忽略，因此以大峰的峰面积作为定量的依据。含甜蜜素的果汁饮料样品色谱图见图2。 图2 含甜蜜素的果汁饮料样品色谱图 2.2 样品处理 试剂的纯度会影响色谱峰，实验中所用的试剂不纯杂峰会很多，因此建议亚硝酸钠使用优级纯试剂，正己烷使用优级纯以上试剂。 样品放置时间和样品的冰水浴温度对样品测定结果有影响。试验结果表明，如果样品在冰水浴中的温度降至2℃~4℃，则色谱图中的小峰的峰面积很小。样品处理后的放置时间越长，则色谱图的小峰越大。因此，在试验过程中应尽量将冰水浴温度降到最低，样品处理后尽快测定。 2.3 精密度试验与检出限 对处理后的同一样品，在1.3色谱条件下进行测定，结果见表1.由表1可知，测定结果的相对标 准偏差为 0.798%，表明方法的精密度良好。 表1 精密度试验结果 甜蜜素含量/g·kg 平均值/g·kg1 RSD/% 2.8679 2.8708 2.84902.8314 2.8400 2.8110 2.8450 0.798 以3倍的信噪比计算检出限，液体试样中甜蜜素的检出限为0.005 ug/g，固体试样检出限为0.25ug/g. 2.4 回收试验 对同一果汁饮料(未检出甜蜜素)进行了加标回收率试验，在20.00g样品中加入甜蜜素标准溶液0.5、1.0、2.0mL，按照实验方法进行测定，测得值及加标回收试验结果见表2 表2 回收试验结果 添加标准值/g·kg 实测值/g·kg 1 回收率/% 0.25 0.2652 106.1 0.25 0.2408 96.3 0.50 0.4932 98.6 0.50 0.4767 95.3 1.0 0.9816 98.2 1.0 0.9452 94.5 由表2可知，样品加标回收率为94.5%~106.1%，表明方法准确度良好。 2.5比对实验 对3种食品按本方法及国标方法进行测定，结果见表3。由表3可知，本法测定结果与国标法无明显差异。 表32本方法与国标方法测定结果的比较 样品 本法测定值/g·kg 国标法测定值/g·kg 蜜饯 含乳饮料 果汁饮料 0.56 0.42 0.80 0.53 0.40 0.81 3 结语 采用Rtx-1毛细柱气相色谱法测定食品中的甜蜜素，在国标的基础上对标准曲线的绘制进行了改进，对计算公式进行了细化。该方法具有省时、易操作、易控制、更科学规范等特点，适于批量样品的检测，准确度满足测定要求。本方法不适于测定白酒中的甜蜜素。 ( 参考文献 ) ( ]G GB 2760-2007 食品添加剂使用卫生规范[S]. ) ( GB /T 5009. 97-2003 食品中环己基氨基磺酸钠的测定方法 [ S ]. ) ( [3 ] 沈伟健、黄娟、沈崇钰，等，气质联用法测定含蛋白食品中的甜 蜜素[J].分析实验室，2007，26(6)：95-95. ) 欢迎订阅《化学分析计量》，欢迎投稿，欢迎刊登广告! 网址www. yuweichina.com Email： watercom 敬请登录中国分析计量网：www. camcom，期待加盟!欢迎合作!网址：www. yuweichina.com Email.swatercom Rtx-1毛细柱气相色谱法测定食品中的甜蜜素甜蜜素化学名为环己基氨基磺酸钠,白色针状、片状结晶或结晶状粉末,易溶于水,无臭、味甜,其稀溶液的甜度约为蔗糖的30倍。甜蜜素的价格低廉,在食品中多作为蔗糖的代用品,是国家批准使用的添加剂。如果经常食用甜蜜素含量超标的食品,就会因摄入过量对人体的肝脏和神经系统造成危害,特别是对代谢排毒能力较弱的老人、孕妇、儿童危害更明显。因此我国国家标准GB 2760 - 2007《食品添加剂食品卫生标准》严格规定了添加剂的使用范围及用量[ 1 ] 。