羧甲司坦中氯乙酸检测方案(离子色谱仪)

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赛默飞世尔科技(中国)有限公司 关键词 羧甲司坦、氯乙酸、离子色谱 Keywords： Carbocistein； Monochloroacetic acid； lon Chromatography； 引言 羧甲司坦[S-(羧甲基)-半胱氨酸]是黏痰溶解药，能减少支气管的粘液分泌，使痰的粘稠度下降而易于咳出”。临床上用于慢性支气管炎，支气管哮喘等引起的痰液稠厚、咳痰困难、肺通气功能不全。羧甲甲坦是由L-半胱氨酸和氯乙酸在氢氧化钠催化下缩合而成，目前的生产工艺不可避免含有少量氯乙酸残留。氯乙酸有毒，半致死剂量为76mg/kg。有心脏毒性和血液毒性，还有可能致癌，因此必须严格控制其含量。2010版中国药典标准提高项目中，对羧甲司坦的氯乙酸含量提出了检测要求。 羧甲司坦及其杂质的检验方法为液相色谱法，但无法检测低含量的氯乙酸。氯乙酸的检测方法有气相色谱法和离子色谱法。但气相色谱法需要衍生，操作麻烦。离子色谱法则直接进样就可以达到比较高的灵敏度，因此选用离子色谱法进行检测。 结果与讨论 1.色谱条件的选择 1)分析柱的选择： 测试条件 仪器：ICS系列离子色谱系统带淋洗液发生系统。 分析柱： lonPac AS11-HC (4mmx250mm) 浓缩柱： lonPac AG11-HC (4mmx50mm) 已有文献资料显示，广西柳州市食品药品检验所使用ASSUP 7柱，碳酸盐淋洗液进行过相关分析。按照以往经验，氯乙酸是很容易分析的，出峰在CI离子之前，因此常规柱子对于此分析均不存在困难。但羧甲司坦含双羧基一氨基，这种物质比较难形成良好峰型，因此适合选用亲水性比较好的柱子。药检系统已有方法的两根柱子为AS11-HC及AS22，因此选用这两根进行方法开发，最终选定AS11-HC。 流动相组成：10mmol/L KOH， 1.0mL/min 2)分析条件的选择： 进样量：25uL 柱温：30℃ 检测方式：抑制型电导检测 样品前处理 选用不同浓度的淋洗淋洗，测定氯乙酸与氯离子及之前杂质的分离能力，同时兼顾羧甲司坦主峰的出峰时间，最终选定10mmol/L KOH， 此条件下，氯乙酸前后分离度都在1.5以上，羧甲司坦主峰出峰时间在20 min内，见图1。 羧甲司坦原料药，称取0.10g，用纯水定容到100mL，摇匀溶解。片剂则研碎，根据标识量溶解定容到羧甲司坦约1000ppm。如果溶解比较慢可加入适量氢氧化钠溶液调节PH至11左右，帮助溶解。 图1.1000ppm样品色谱图 2.线性与检出限 配制浓度分别为0.08、0.24、0.48、0.96、3.2、8.0mg/L的标准溶液，分别进样。以标准溶液的质量浓度为横坐标，相应峰面积为纵坐标绘制标准曲线。其标准曲线如图2所示。相关系数为99.97%，具有极好的线性。以3倍基线噪音算，直接进样的检测限为0.01 mg/L。 图2.标准曲线 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 免费服务热线：800810 5118 3.精密度 1000ppm样品连续7次进样测定，保留时间的RSD为0.20%，峰面积的RSD为1.28%，表明样品连续进样保留时间及峰面积均可保持较好的重复性。 4.实际样品的分析及加标回收率 利用上述方法，我们对实际样品进行分析，结果如表1所示。加标回收率为95.04%，准确性良好。 表1.样品分析结果 样品名称 样品测定值mg/L 加标浓度mg/L 加标样品测定值mg/L 加标回收率% 羧甲司坦原料药 0.6838 0.80 1.4441 95.04 羧甲司坦片 0.4529 羧甲司坦口服液 0.2419 结论 使用lonPac AS11-HC柱， 10mmol/L KOH做淋洗液淋洗，可以分析羧甲司坦药品中mg/kg级别的氯乙酸，检测限可达10mg/kg，完全满足杂质检测要求。 ( 11 杨晓云，杨志。羧甲司坦合成工艺改进。齐鲁药 事， 2 004， 2 3：43-44 ) ( [2]中华人民共和国药典2010版二部：1086-1087 ) ThermoFisherS GIENTIFIC 支持手机用户)