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要获取全球办事处的完整列表,请访问http://www.perkinelmer.com.cn/AboutUs/ContactUs/ContactUs版权所有 ◎2016, PerkinElmer, Inc. 保留所有权利。PerkinElmer° 是PerkinElmer, Inc. 的注册商标。其它所有商标均为其各自持有者或所有者的财产。 前言 磺胺类药物((Sulfonamides, SAs) 是指一类具有对氨基苯磺酰胺结构、用于预防和治疗细菌感染性疾病的化学药物,是当 前畜禽生产中常用的抗菌、抗原虫药物, 具有抗菌谱广、价格低、化学性质稳定、使用方便等优点。但是摄入大量磺胺类药物会破坏正常免疫机能,破坏人的造血系统,造成溶血性贫血症、粒血细胞缺乏症等症状。并且人体长期摄入含磺胺类药物的动物性食品后,药物不断在人体内蓄积,当积累到一定程度后,就会对人体产生毒性作用,同样可引起肾损害,所以针对磺胺类药物的监控是一项刻不容缓的工作。 目前关于磺胺类药物的标准已出台《GB/T 21316-2007 动物源性食品中磺胺类药物残留量的测定》,方法中涉及肌肉、内脏、鱼、虾和肠衣、牛奶中磺胺脒、甲氧苄啶、磺胺醋酰、磺胺嘧啶等几十种磺胺类药物的前处理方法及液质检测方法。本文用蜂蜜作为目标样品,研究了并优化磺胺类药物在此类基质中的检测方法。 样品前处理方法提取 称取5g(精确至0.01 g)混匀的蜂蜜试样,置于150mL三角瓶中,加入 25 mL磷酸溶液(pH=2),涡旋混匀,使试样完全溶解。 净化方法 将上述样液倒入玻璃贮液器中,在减压情况下使样液以小于3 mL/min 流速通过苯磺酸型阳离子交换柱,待试样完全流出后,分别用5mL磷酸溶液和5mL水洗柱,弃去全部洗液。最后用40 mL 磷酸二氢钾缓冲液(0.2mol/L, pH=8)洗脱,收集洗脱液于100 mL 平底烧瓶中。在洗脱液中加入1.5mL庚烷磺酸钠溶液(0.5mol/L),然后用磷酸调节 pH=6. 将上述收集液通过 HLB或相当的 SPE小柱,调节流速小于3mL/min,待洗脱液完全流出后,再用3mL水洗柱,在负压下抽干小柱,最后用10mL甲醇洗脱,将洗脱后的甲醇旋蒸至干,准确加入1mL流动相定容,供LCMSMS测定。 LC-MS/MS 仪器方法 液相色谱参数: 液相色谱仪: PerkinElmer AltusTM A-30 UPLC系统,条件如下: 色谱柱: Perkinelmer Brownlee SPP C18, 100 mm*2.1 mm,2.7 um(货号:N9308404) 流速:0.4mL/min 柱温:35℃; 梯度洗脱:洗脱程序,见表1。 表1液相色谱洗脱程序 Time A/%乙青 B/% 0.1%甲酸水 0.00 10 90 1.00 10 90 4.00 30 70 5.00 30 70 6.00 90 10 6.50 90 10 7.00 10 90 9.00 10 90 以下参数以 PerkinElmer QSight 210TM 系列为例,磺胺类化合物质谱参数见表2和表3。 表2化合物质谱参数 序 号 化合物 英文名 RT MRM EV/V CE/ eV 1 磺胺嘧啶 Sulfadiazine 1.34 251.2/156.1 28 -21 251.2/92.2 22 -40 2 磺胺噻唑 Sulfathiazole 1.63 256.1/156.1 26 -20 256.1/108.1 25 -40 3 磺胺吡啶 Sulfapyridine 1.77 250.2/156.1 24 -24 250.2/184.1 28 -24 4 磺胺二甲异噁唑 Sulfisoxazole 2.65 268.1/156.1 27 -21 268.1/113.2 26 -29 5 磺胺甲噻二二唑 Sulfamethizole 2.86 271.1/156.1 19 -20 271.1/108.0 25 -38 6 磺胺二甲嘧啶 Sulfamethazine 3.02 279.2/186.1 18 -24 279.2/156.1 18 -25 7 磺胺氯哒嗪 Sulfachloropyidazine 3.66 285.1/156.1 23 -23 285.1/108.1 21 -37 8 磺胺甲基异噁唑 Sulfamethoxazole 3.79 254.2/156.1 29 -23 254.2/108.1 28 -36 9 磺胺间甲氧嘧啶 Sulfamonomethoxine 4.15 281.0/155.8 19 -24 281.0/108.0 30 -38 10 磺胺间二甲氧嘧啶 Sulfadimethoxine 5.11 311.3/156.1 35 -27 311.3/218.1 24 -26 11 磺胺喹噁啉 Sulfaquinoxaline 5.18 301.1/156.1 22 -23 301.1/108.0 18 -40 表3质谱离子源参数 ion source ESI+ ElectroSpray/V 4500 Heating Gas Temp/℃ 500℃ HSID Temp/℃ 320℃ Dry Gas 200 Nebulizer Gas 180 实验结果 按照上述建立的实验条件,获得磺胺类药物的总离子流图(TIC),见图1。磺胺类药物 0.02 ng/mL的信噪比及添加回收率结果见表4。 图1磺胺类药物总离子流色谱图 表4磺胺类化合物在浓度在 0.02 ng/mL 下的信噪比 S/N 及回收率 序号 化合物 在浓度为0.02 添加 0.02 ug/kg 的回收率/% ng/mL下S/N 1 磺胺嘧啶 18 81.6 2 磺胺噻唑 40 85.9 3 磺胺吡啶 30 83.2 4 磺胺二甲异噁唑 50 86.2 5 磺胺甲噻二唑 100 90.1 6 磺胺二甲嘧啶 400 91.5 7 磺胺氯哒嗪 30 79.8 8 磺胺甲基异噁唑 30 81.1 9 磺胺间甲氧嘧啶 20 77.5 10 磺胺间二甲氧嘧啶 25 78.0 11 磺胺喹噁啉 40 80.7 将标准溶液配制成工作液,使各个化合物浓度为0.01~10 ng/mL,在本方法确定的实验条件下,获得标准曲线数据。以进样浓度为横坐标,定量离子的峰面积为纵坐标,建立标准曲线(表5)。由表5可见,各分析物标准曲线的相关系数均大于0.99,相关性良好。定量限 (LOQ)采用逐级降低标准品浓度的方法来确定,通过实验获得各个分析物的LOQ, 其范围在0.001-0.01 ng/mL之间,见表5。在低浓度水平下0.01 ng/mL 进行重现性实验,在连续6针进样下,获得优异的重现性结果,见表5。 表5磺胺类化合物的标准曲线、线性关系、LOQ以及重现性数据(0.01ng/mL) 化合物 标准曲线范围ng/mL 相关系数R LOQ (ng/mL) 在0.01ng/mL 浓度下重现性1% n=6 磺胺嘧啶 0.01~10.0 0.9943 0.01 5.41 磺胺噻唑 0.01~10.0 0.9950 0.01 6.25 磺胺吡啶 0.01~10.0 0.9936 0.01 4.77 磺胺二甲异噁唑 0.01~10.0 0.9958 0.01 4.90 磺胺甲噻二唑 0.01~10.0 0.9943 0.002 3.22 磺胺二甲嘧啶 0.01~10.0 0.9950 0.001 2.15 磺胺氯哒嗪 0.01~10.0 0.9948 0.01 6.54 磺胺甲基异噁唑 0.01~10.0 0.9934 0.01 7.03 磺胺间甲氧嘧啶 0.01~10.0 0.9972 0.01 6.05 磺胺间二甲氧嘧啶 0.01~10.0 0.9958 0.01 7.12 磺胺喹噁啉 0.01~10.0 0.9959 0.01 5.79 结论 PerkinElmer QSight 210系统完全满足动物源性食品中磺胺类药物的日常检测工作。QSight 210 系统,离子源具有自清洁功能以及质谱接口 HSID热源去溶剂技术,提高仪器抗污染能力,从而获得更低的噪音,更低的检测限,从容应对复杂基质的食品安全检测。 ( 1 . GBT 18932.17-2003 蜂蜜中16种磺胺残留量的测定方法液相色谱-串联质谱法 ) ( PerkinElmer SPP 系列色谱柱订购信息: : 1 色谱柱采购直线:021- 60645658,021-60645659 ) ( 电子邮件: consumable.china@perkinelmer.com。 ) 珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司 地址:上海每江高科技园区张衡路1670号 邮编:201203 电话:021-60645888 传真:021-60645999 www.perkinelmer.com.cn 样品前处理方法提取称取5 g( 精确至0.01 g) 混匀的蜂蜜试样,置于150mL 三角瓶中,加入25 mL 磷酸溶液(pH=2),涡旋混匀,使试样完全溶解。净化方法将上述样液倒入玻璃贮液器中,在减压情况下使样液以小于3 mL/min 流速通过苯磺酸型阳离子交换柱,待试样完全流出后,分别用5mL 磷酸溶液和5mL 水洗柱,弃去全部洗液。最后用40 mL 磷酸二氢钾缓冲液(0.2 mol/L,pH=8)洗脱,收集洗脱液于100 mL 平底烧瓶中。在洗脱液中加入1.5 mL 庚烷磺酸钠溶液(0.5 mol/L),然后用磷酸调节pH=6。将上述收集液通过HLB 或相当的SPE 小柱,调节流速小于3 mL/min,待洗脱液完全流出后,再用3 mL水洗柱,在负压下抽干小柱,最后用10 mL 甲醇洗脱,将洗脱后的甲醇旋蒸至干,准确加入1 mL 流动相定容,供LCMSMS 测定。
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珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司为您提供《食品中磺胺嘧啶检测方案(液质联用仪)》,该方案主要用于畜禽肉及副产品中兽药残留检测,参考标准《暂无》,《食品中磺胺嘧啶检测方案(液质联用仪)》用到的仪器有珀金埃尔默三重四极杆液质联用仪PerkinElmer QSight 。
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