小麦中霉菌毒素检测方案(液相色谱仪)

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LAAN-A-LC-C031岛津SHIMADZUHigh Performance Liquid Chromatography ApplicationnMNo.L484Newshttp：//www.shimadzu.com.cn用户服务热线电话： 800-810-0439第一版发行行：2015年2月 高效液相色谱 使用 Prominence-i 测定小麦中的瓜萎镰菌醇和脱氧瓜萎镰菌醇 No.L484 Analysis of Nivalenol and Deoxynivalenol in Wheat Using Prominence-i 瓜萎镰菌醇和脱氧瓜萎镰菌醇是镰刀菌属真菌产生的赤霉素中的一种霉菌毒素。日本相关部门在2002年5月21日颁布的《关于小麦脱氧瓜萎镰菌醇的暂定基准值设定》(食安发第0521001号)中，将脱氧瓜萎瓜菌醇的暂定标准值设定为 1.1 ppm。 应用报告No.L362对使用超快速LC系统的分析示例进行了介绍。本次分析中，我们在《关于脱氧瓜萎镰菌醇的试验方法》(食安发第0717001号，2003年7月17日)规定的基础上，又增加了清洗色谱柱的工序。 新一体化高效液相色谱仪 Prominence-i 的检器器可对样品池和光学系统进行温度调节。在短波长长域下的 UV检测中，虽然温度容易受到环境影响而发生变化，但仍然得到了良好的重复性。 ■标准溶液的分析 Analysis of Standard Mixture 图1为注入 10 pl瓜萎镰菌醇和脱氧瓜萎镰菌醇标准溶液(各4.0ppm)的测定结果；表1为分析条件。虽然试验方法规定采用等度分析，但是本次分析在脱氧瓜萎镰菌醇洗脱后，增加了色谱柱清洗工序。另外，因为一体化高效液相色谱仪 Prominence-i标准配置低压梯度单元，所以在目标成分洗脱后，可简单地输送高有机溶剂比例的流动相。 我们对暂定标准值约1/10 的 0.1 ppm标准溶液重复分析了6次。表2为保留时间和峰面积的相对标准偏差(%RSD)，图2为得到的色谱图。 色谱柱 Analytical Conditions ： Shim-pack GIS C18 (250 mm L.x4.6 mm I.D.，5 pm) 流动相A ：水/乙腈/甲醇=90/5/5(v/v/v) 流动相B ：乙腈/甲醇=50/50(v/v) 时间程序 ： B Conc.0 % (0-20 min)-50 %(20.01-25 min) -0%(25.01-45 min) 流速 ： 1.0 mL/min 柱温 ：40℃ 进样体积 ：10pL 检测器 ： UV220nm(池温45℃) Repeatability (0.1 ppm，n=6)保留时间%RSD 峰面积%RSD 瓜萎镰菌醇脱氧瓜萎镰菌醇 0.090.06 0.68 图1标准溶液的色谱图(各4.0ppm) Chromatogram of a Standard Mixture (4.0 ppm each) 图2标准溶液的色谱图(各0.1ppm) Chromatogram of a Standard Mixture (0.1 ppm each) ■标准曲线Calibration Curve Linearity 图3为分析得到的标准曲线；表1为分析条件。根据各成分在0.1~4 ppm 浓度范围内绘制的标准曲线可知，回归系数R?在0.9999以上，表示线性良好。 图3a)瓜萎镰菌醇 b)脱氧瓜萎镰菌醇的标准曲线 Linearity of Calibration Curves for a) Nivalenol and b) Deoxynivalenol ■小麦的分析 Analysis of Wheat 图4为小麦的预处理步骤。使用多功能色谱柱“MultiSep#227”(Romer Labs公司制) 和“Autoprep MF-T”(昭和电工株式会社制)对2种小麦进行了制备。 图5 小麦A的色谱图(各添加1.0ppm))((MultiSep #227) Chromatogram of Wheat A (Spiked with 1.0 ppm each)(MultiSep#227) 图4预处理Pretreatment 岛津企业管理(中国)有限公司岛津(香港)有限公司 ( 400-650-0439 ) 瓜萎镰菌醇和脱氧瓜萎镰菌醇是镰刀菌属真菌产生的赤霉素中的一种霉菌毒素。日本对脱氧瓜萎镰菌醇限量为1.1ppm。本文介绍使用一体化高效液相色谱仪Proinence-i在洗脱脱氧瓜萎镰菌醇后增加色谱柱清洗工序。在0.1-4ppm范围回归系数大于0.9999。