人参粉中人参皂甙检测方案(液相色谱仪)

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LC-5510检测人参产品中人参皂甙分析的应用 人参是多年生草本植物，是众所周知的名贵药材。有强身健体、益寿延年的功效。经现代医学研究及化验分析表明，人参内含有一种叫人参皂甙(Ginsenoside，简称GS)的化学物质，它对调节人的中枢神经系统、强心、抗疲劳、调节物质代谢等有明显功效，是人参的主要活性成分。现已明确知道的 GS单体约有40余种，如Re、Rg、Rf、Rb、Rc等。因此人参皂甙的含量是评价人参质量的重要指标。《中国药典》和 GB/T 22996-2008 均采用液相色谱法对人参中人参皂甙的成分及含量进行测定，有利于全面、有效的评价人参的质量。 本文对比了《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》两种分析方法对6种主要人参皂甙的测定。 实验设备和试剂 LC-5510液相色谱 P-101A高压输液泵 LC-5510 紫外检测器 LC-5510 柱温箱 DM-101线线脱气机 人参皂甙对照品(Re，Rg1，Rf， Rb1， Rc， Rb2) 人参粉样品 甲醇(色谱纯) 乙腈(色谱纯) 样品处理： 准确称取人参粉末样品 1g 左右(精确至0.0001g) 于50mL容量瓶中，加入甲醇超声 45min， 定容，过 0.45um滤膜，待测。 色谱条件1： 参照《GB/T22996-2008 人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》 色谱柱：C18柱，250 mmx4.6 mm， 5 um 流速：：1mL/min 柱温：45℃ 检测波长：203nm 进样量：20uL 流动相：A：乙腈；B：水，按表1梯度洗脱 表1梯度洗脱程序 时间(min) 0 5 10 20 25 30 流动相A(%) 30 30 35 45 90 30 图1 色谱条件1一人参皂甙标样谱图 图2 色谱条件1一人参样品谱图 表2色谱条件1人参皂甙的保留时间列表 组分名称 保留时间(min) Re 7.55 Rg1 7.82 Rf 16.76 Rb1 17.34 Rc 18.31 Rb2 19.20 色谱条件2： 参照2015版《中国药典》 色谱柱： Ci8柱，250mmx4.6 mm， 5 um 流速：1mL/min 柱温：35℃ 检测波长：203nm 进样量：20uL 流动相： A：：乙腈；B：水，按表2照梯度洗脱 表3梯度洗脱程序 时间(min) 0 35 55 70 100 图3 色谱条件二人参皂甙标样谱图 图4 色谱条件2一人参样品谱图 表4色谱条件2人参皂甙的保留时间列表 组分名称 保留时间(min) Re 43.46 Rgl 45.26 Rf 63.64 Rb1 80.25 Rc 83.40 Rb2 87.03 实验讨论： 《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》标准中的分析方法， Re 和Rgi尽管不能完全分离，但分析方法时间短，仅需 30min. 《中国药典》的参考方法各组分离度良好，但是分析时长需要 100min。 通过实验结果与《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》中的方法比较，说明： 一、提高柱箱温度可以缩短分析时间； 二、不同厂家的色谱柱对人参皂甙的分离有差异； 三、增加有机相(乙腈)比例，可明显缩短分析时间； 四、在增加乙腈比例缩短分析时长的同时，会影响到人参皂甙各组分的分离度，并且人参样品中的其他组分会影响目标组分的分离； 五、《GB/T22996-2008人参中多种人参皂甙含量的测定液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》中的分析方法还可进行优化，在保证满足分离度的情况下，通过调整流动相梯度程序和柱温，可进一步改善分析方法，缩短分析时间。 人参是多年生草本植物，是众所周知的名贵药材。有强身健体、益寿延年的功效。经现代医学研究及化验分析表明，人参内含有一种叫人参皂甙（Ginsenoside，简称GS）的化学物质，它对调节人的中枢神经系统、强心、抗疲劳、调节物质代谢等有明显功效，是人参的主要活性成分。现已明确知道的GS单体约有 40余种,如Re、Rg、Rf、Rb、Rc等。因此人参皂甙的含量是评价人参质量的重要指标。《中国药典》和GB/T 22996-2008均采用液相色谱法对人参中人参皂甙的成分及含量进行测定，有利于全面、有效的评价人参的质量。本文对比了《GB/T22996-2008 人参中多种人参皂甙含量的测定 液相色谱-紫外检测法》和2015版《中国药典》两种分析方法对6种主要人参皂甙的测定。