气相色谱法测定保健食品中EPA、DHA和AA的含量

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本文建立了使用GC-2030测定保健食品中EPA、DHA和AA含量的分析方法。结果表明，在0.01~2.0 mg/mL的浓度范围内，EPA甲酯、DHA甲酯和AA甲酯的线性相关系数R均大于0.999，线性关系良好。取浓度为0.01 mg/mL的标准溶液重复进样6次，各目标物和内标物峰面积比的相对标准偏差（RSD%）均小于2%，精密度良好。对实际样品进行加标回收实验，样品加标量为20 mg/g时，各目标物平均回收率在87.6%~102.8%之间。方法灵敏度高、重复性好，满足标准对应指标，可用于测定保健食品中EPA、DHA和AA的含量。SSL-CA22-555Excellence in Science Excellence in ScienceGC-247 岛津企业管理(中国)有限公司-分析中心Shimadzu (China) Co.， LTD. -Analytical Applications CenterEmail： sshzyan@shimadzu.com.cnTel：86(21)34193996http：//www.shimadzu.com.cn 气相色谱法测定保健食品中EPA、DHA和AA的含量 GC-247 摘要：本文使用 GC-2030 建立了保健食品中 EPA、DHA和 AA含量的分析方法。样品经皂化和甲酯化处理后，加入异辛烷提取，氮吹浓缩后上机测试。结果表明，在0.01~2.0 mg/mL 的浓度范围内， EPA 甲酯、DHA甲酯和 AA 甲酯的线性相关系数R均大于0.999。取浓度为 0.01 mg/mL的标准溶液重复进样6次，各目标物和内标物二十三酸甲酯的峰面积比值的相对标准偏差均小于2%。对测试样品进行加标回收实验，各目标组分加标平均回收率在87.6%~102.8%之间。方法稳定可靠，，可用于保健食品中EPA、DHA 和 AA含量的测定。 关键词：：气相色谱仪保健食品 EPA、DHA 和AA 技术特点： 心参考标准方法，使用三氟化硼甲醇溶液对脂肪酸组分进行甲酯化，样品前处理简单。 小使用 SH-FAMEWAXIM专用柱对脂肪酸甲酯类物质进行分离，峰形和分离度均良好。 不饱和脂肪酸是分子中含有一个或多个双键的脂肪酸，是人体必须的营养物质。二十二碳六烯酸 (DHA)、二十碳五烯酸 (EPA) 和花生四烯酸 (AA) 都是常见的多不饱和脂肪酸，，它们具有调节血脂、促进智力发育、免疫调节等作用。但部分不饱和脂肪酸在人体内合成效率低，甚至不能合成。为了满足人体正常代谢需要，必须通过食用某些食品或保健品补充。 实验部分 1.1仪器 气相色谱仪： GC-2030 1.2分析条件 GC参数： 色 谱 柱： SH-FAMEWAXM， 30m 进样口温度： 240℃ ×0.25 mm ×0.25um 柱温程 190℃_2℃ /min_240℃ (10 min) 分流 进样羊： 分流比5：1检量 测 ：FID 量： 1uL 检测器温度：250℃ 进 载 气： 氮气 空气流量： 200mL/min 载气控制方式： 恒流量， 2 mL/min 尾吹气流量： 24 mL/min 氢气流量：32 mL/min 样品前处理 图1样品前处理流程图 结果与讨论 3.1标准品谱图 EPA 甲酯、DHA甲酯、AA甲酯和二十三酸甲酯(内标))标准品色谱图和化合物信息分别见图2和表1。 图2 EPA 甲酯、DHA甲酯、AA甲酯和内标标准溶液色谱图(浓度： 0.5mg/mL) 表1 化合物信息表 峰号 化合物 CAS 号 保留时间(min) 1 AA甲酯 2566-89-4 9.802 2 EPA 甲酯 2734-47-6 11.150 3 二十三酸甲酯 (IS) 2433-97-8 13.934 4 DHA甲酯 2566-90-7 16.701 3.2标准曲线与检出限 用异辛烷分别稀释浓度为0.01、0.02、0.1、0.2、0.5、1.0和 2.0 mg/mL的脂肪酸甲酯标准溶液。以标液中目标物组分和内标物浓度比值为横坐标，以目标物组分和内标物峰面积比值为纵坐标绘制标准曲线。根据0.01mg/mL标样数据，以3倍信噪比计算各目标组分的仪器检出限，各目标物标准曲线见图3，线性方程、相关系数以及检出限见表2。 EPA 甲酯 图3 EPA 甲酯、DHA甲酯和 AA甲酯标准曲线 表2 线性相关系数及仪器检出限 NO. 化合物名称 相关系数 检出限((mg/g) 峰面积比 RSD% 1 AA甲酯 0.9997 0.044 0.65 2 EPA 甲酯 0.9998 0.038 0.79 3 DHA甲酯 0.9999 0.047 1.43 3.3精密度实验 取 0.01 mg/mL EPA 甲酯、DHA甲酯和 AA甲酯混合标准溶液 1 uL进气相色谱仪，连续进样6次，以各目标物和内标物峰面积比值 RSD%考察重复性，结果如表2。 3.4样品测试结果 取 0.02g某品牌鱼肝油，按照步骤2进行处理，样品测试结果见表3，样品色谱图见图4。 图4某鱼肝油样品色谱图 3.5回收率 取上述样品0.02g于试管中，加入EPA、 DHA 和 AA 混合标准溶液 (0.2 mg/mL) 2 mL，按照样品前处理方法平行处理3份，按步骤2进行处理，样品加标量为 20 mg/g， 平行制样3次。回收率结果见表3。 表3加标回收率结果 No 化合物名称 样品测定值 (mg/g) 加标样品测定值 (mg/g) 平均回收率(%) 1 2 3 1 AA甲酯 11.78 29.14 29.38 29.31 87.6 2 EPA 甲酯 158.09 177.90 178.76 178.66 102.8 3 DHA甲酯 107.92 127.52 127.85 127.85 99.6 结论 本文建立了使用 GC-2030 测定保健食品中EPA、DHA 和 AA 含量的分析方法。结果表明，在0.01~2.0 mg/mL的浓度范围内， EPA 甲酯、DHA甲酯和AA甲酯的线性相关系数R均大于0.999，线性关系良好。取浓度为 0.01mg/mL的标准溶液重复进样6次，各目标物和内标物峰面积比的相对标准偏差(RSD%)均小于2%，精密度良好。对实际样品进行加标回收实验，样品加标量为 20 mg/g时，各目标物平均回收率在 87.6%~102.8%之间。方法灵敏度高、重复性好，满足标准对应指标，可用于测定保健食品中EPA、DHA 和AA 的含量。 岛津应用云