乳粉中抗坏血酸的含量测定 高效液相色谱法

智能文字提取功能测试中

一、摘要本文使用Wooking K2025高效液相色谱仪测定乳粉中抗坏血酸的含量。色谱条件：C18色谱柱（4.6×250mm，5μm），流速为0.7mL/min，柱温为25℃，进样量为20μL，检测器为紫外-可见光检测器，检测波长为245nm。实验结果：L（+）-抗坏血酸的理论塔板数为10816，D（-）-抗坏血酸的理论塔板数为11070，L（+）-抗坏血酸和D（-）-抗坏血酸的分离度为1.83；重复性测试中，抗坏血酸混合标准溶液连续进样7针，L（+）-抗坏血酸保留时间的RSD为0.203%，峰面积的RSD为0.501%；D（-）-抗坏血酸保留时间的RSD为0.222%，峰面积的RSD为0.300%；L（+）-抗坏血酸的仪器检出限为0.015μg/mL，仪器定量限为0.049μg/mL；D（-）-抗坏血酸的仪器检出限为0.017μg/mL，仪器定量限为0.056μg/mL；L（+）-抗坏血酸和D（-）-抗坏血酸在测定浓度范围内均呈现良好的线性关系，确定系数R2均在0.999以上；对乳粉试样进行测定，L（+）-抗坏血酸的含量为61mg/100g，D（-）-抗坏血酸未检出，L（+）-抗坏血酸总量为59mg/100g，抗坏血酸的加标回收率范围为75.2%~81.2%。因此，Wooking K2025高效液相色谱仪满足《GB 5009.86-2016 食品安全国家标准 食品中抗坏血酸的测定（第一法）》乳粉中抗坏血酸含量测定的需求。二、背景抗坏血酸可分为L（+）-抗坏血酸和D（-）-抗坏血酸。L（+）-抗坏血酸，又称为维生素C，是一种天然存在的具有抗氧化性质的有机化合物，也是一种维持人体正常活动不可缺少的营养物质。D（-）-抗坏血酸常作为抗氧化剂、防腐剂、发色助剂用于食品工业，但摄入过多也会使白细胞的抗病能力明显下降，会引起尿酸结石、腹泻、多尿及皮疹等。因此，分离并同时测定乳粉中L（+）-抗坏血酸和D（-）-抗坏血酸具有重要意义。LC-K2025-01-220910 GB 5009.86-2016 Wooking K2025 C 1 1 8 5pm 0.7mL/min 25 4.6×250mm 245nm L + 20pL 10816 D 11070L L十 D 1.83 7 L 十 RSD 0.203% RSD 0.501% D 一 RSD 0.222% RSD 0.300%%L 0.015pg/mL 0.049pg/mL D- 0.017ug/mL 0.056pg/mLL + D R² 0.999 L+- 61mg/100g D L 十 59mg/100g 75.2%~81.2% Wooking K2025 GB 5009.86-2016 L 十 D L + C D L 十 D 1 2 L D-- 245nm L L- 245nm L 十 L 十 L 3 3.1 GB/T 6682 3.2 HPOs 3 HPOs ≥38% 3.3 200g/L 200g 0.1g 3.2 1L 2 3.420g/L 50mL 200g/L 3.3500mL 3.5 NagPOJ12H2O 3.6 100g/L 100g 0.1g 3.5 1L 3.7 KH2PO4 3.8 HPO4 3.9L- CH，NO，S 3.10 L- 40g/L 4g L- 3.9 100mL 3.11 CH3OH 3.12L 一+十 CHgOs ≥99% 3.13 D D -一 CeHgO。≥99% 3.14L 十 1.000 mg/mL L 十 3.12 20g/L 3.4 1.000 mg/mL L十 3.15 D D - 1.000 mg/mL D 3.13 20g/L 3.4 1.000 mg/mL D 3.16 L 十 3.14 D 3.15 20g/L 3.4 Opg/mL 0.5pg/mL -1.0pg/mL 5.0pg/mL 10.0pg/mL 25.0pg/mL 50.0pg/mL 3.17 A 6.8g 3.7 1L 3.8 pH 2.5~2.8B100%A：B=98：20.45pm 4 4.1 K2025 P2 K2025 AS K2025 CO UVD Wookinglab 4.2 0.0001g 4.3 4.4 pH 0.01 4.5 ≥4000r/min 4.6 4.7 50mL 4.8 10mL 50mL 4.9 50mL 5.0 0.45um 5 5.1 2g 0.001g 50mL 4.9 20g/L 3.4 50mL 50mL 5min 4000r/min 5min 0.45pm L L 十 D 一 5.2 20mL 5.150mL 10mL 40g/L L-3.10100g/L 3.6pH 7.0~7.2 200/min 5min 3.8pH 2.5~2.850mL 0.45pm L + 5.3 a C18 4.6×250mm n 55pm b 3.17 C 0.7 mL/min d 20 pL e 25 千 245nm 6 6.1 5.3 1.0pg/mL 1 1 50 1 / min mAU.s mAU L+- 5.463 33.331 4.053 10816 1.34 D-- 5.858 31.354 3.553 11070 1.83 1.28 1L 十 10816D 11070 L L 十 D 1.83 2 2 120 2 7 2 7 1 2 3 4 5 6 7 RSD% L +- 5.448 5.438 5.435 5.430 5.425 5.422 5.415 5.430 0.203 74.736 74.563 74.282 74.175 74.453 74.914 75.248 74.624 0.501 D-- 5.838 5.832 5.827 5.820 5.815 5.812 5.800 5.821 0.222 69.239 69.085 68.871 68.748 68.791 69.124 69.233 69.013 0.300 7 L RSD 0.203% RSD 0.501% D 一 RSD 0.222% RSD 0.300% 6.2 3 3 50 3 3 3 L 十 0.015pg/mL 0.049ug/mL DD- 0.017ug/mL 0.056pg/mL 6.36.3.15.3 3.164~ 5 4~ 5L D- R² 0.999 6000 5000 4000 3000 L(+)-抗坏血酸 2000 1000 口 -1000 10 20 30 40 50 60 标准含量[pg/mL] L+- y=82.80604*x+3.41388(R) 0.9999(R2) 0.9999 4L +-一 D - y=75.64816*x+3.64433 (R) 0.9999 (R2) 0.9999 5 D - 6 6.3.2 5.1~5.2 1 L 一 十 [D 1 L + X--- L 十 [ D - L 十 二1 mg/100g Cr---- L [D - ug/mL Co--- L 十 D ug/mL V---- mL m---- g 1000---- ug/mL mg/mL F----6.32.5100----mg/mL mg/100g 7~ 11 7 9 1 L 十 D 十 L 十 61mg/100g D - L 十 59mg/100g 75.2%~81.2% L 十 10816 D 一 11070L L D 1.83 7 十 RSD 0.203% RSD 0.501% D RSD 0.222% RSD 0.300% L 十 0.015pg/mL 0.049pg/mL D 0.017pg/mL 0.056pg/mL L + D R² 0.999 L 十 0.610mg/g D - L 十 59mg/100g 75.2%~81.2% Wooking K2025 GB 5009.86-2016 K2025 A) Pump Unit 1 62MPa 2 1L 3 4 5 B) Sample Injector 1 2 2mL 3 4 100pL C) Column Oven 1 10 85 2 Kromasil 100-5-C18 4.6× 250mm55pm D) Detector 1 一 E) Workstation 1 Wookinglab 2 Wooking K2025