【每周一问】：如何提高检测中喹乙醇的回收（跟帖有积分奖励）

那么我先来个开头，比如尽量的避光等等

我们在做喹乙醇，但从未想过提高回收，因为已经达到了较好的回收率，所以就。。。。。。。

操作过程中避光是肯定的，这么说应该还有样品清洁度吧，出峰时间吧

那您能否说下您的心得吗？

1.样品应尽量粉碎，均质；
2.提取的时间和次数适当增加；
3.浓缩时温度控制在45度以下。

你应该告诉斑竹，你是如何干的，
需要的话，我想他给得起分的。

呵呵，是的

水产品中喹乙醇残留量的测定--液相色谱法(报批稿SC/T 3019—200×)

1 范围
本标准规定了水产品中喹乙醇残留量的测定方法，给出了最低检出浓度。
本标准适用于水产品可食部分中喹乙醇残留量的测定。
2    规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3    原理
水产品中的喹乙醇用乙腈提取，用无水硫酸钠脱水，正已烷脱脂。将乙腈层蒸干，用甲醇溶解残渣，用液相色谱紫外检测器检测，外标法定量。
4    试剂与材料
4.1 乙腈：色谱级。
4.2 正己烷：色谱级，用乙腈饱和。
4.3 甲醇：色谱级。
4.4 无水硫酸钠：分析纯，650℃干燥4h ，冷却后贮存于密封容器中备用。
4.5 喹乙醇标准品：纯度大于99% 。
4.6 喹乙醇标准溶液：精确称取喹乙醇标准品10.0mg ，用少量水溶解，用甲醇稀释至100mL 。取此液10mL ，再用甲醇稀释至100mL 。此标准液需置于棕色容量瓶内避光冷藏保存。保存期为1个月。
4.7 喹乙醇标准使用液：分别取喹乙醇标准溶液1.0mL 、2.0mL 、5.0mL 、10.0mL ，再用15%甲醇水溶液稀释至100mL ，配成浓度分别为0.1μg/mL 、0.2μg/mL 、0.5μg/mL 、1.0μg/mL的标准使用液，此溶液现用现配。
4.8 实验用水：应符合GB/T 6682 一级水指标。
4.9 助滤剂：Celite 545，使用前用甲醇洗净烘干。
5 仪器和设备
5.1 玻璃砂芯漏斗。
5.2 高速匀质器。
5.3 旋转蒸发器。
5.4 离心机。
5.5 高效液相色谱，配有紫外检测器。
6 色谱条件
6.1 色谱柱：ODS-C18，5μm, 4.6mm×250mm。
6.2 流动相：15%的甲醇水溶液（V/V），1.0mL/min 。
6.3 色谱柱温度：35℃。
6.4 检测器波长：380nm 。
6.5 进样量：20μL 。
7 测定步骤
喹乙醇遇光易分解，因此在测定过程中要避开光线的直射。
7.1 工作曲线
在上述工作条件下，分别取标准使用溶液各20μL进样，以峰面积为纵坐标，以标准样品中喹乙醇含量为横坐标，绘制工作曲线. 喹乙醇保留时间为约7.3min 。
7.2 样品测定
7.2.1 样品处理
鱼去鳞沿背脊取肌肉；虾去头去壳取肌肉部分；蟹、中华鳖等取可食部分；样品切为不大于0.5cm×0.5cm×0.5cm的小块后混匀。
7.2.2 提取
称取试样10g（精确到0.01g ）于100mL均质杯中，加入助滤剂1g ，乙腈30mL ，均质1min ，以4000 r/min离心10min ，将上清液倒入150mL锥形瓶中，再向残留物中加入20mL乙腈，同上均质，离心，合并上清液。
7.2.3 净化
向乙腈提取液中加入正己烷10mL ，振荡5min ，静置分层。弃去正己烷相，再加入正己烷10mL ，振荡5min ，静置分层，将乙腈层转移到茄形瓶中，在45℃水浴中旋转蒸发除去溶剂。用1m L15%甲醇水溶液溶解残留物，经0.45μm微孔滤膜过滤后，供液相色谱测定。
7.2.4 色谱测定
取试样滤液20μL进样，记录峰面积，从工作曲线查得样品提取液中喹乙醇的含量。
7.2.5 计算
样品中喹乙醇含量按式⑴计算。
X= C×V / m （1）
式中：
X——试样中喹乙醇含量，单位为毫克每千克（mg/kg） ；
C ——试样溶液中喹乙醇含量，单位为微克每毫升（μg/mL） ；
m ——试样质量，单位为克（g） ；
V——试样溶液体积，单位为毫升（mL） 。
8    方法回收率
本方法的回收率≥70% 。
9    方法批间变异系数
本方法批间变异系数≤15% 。
10 方法检测限
本方法检测限为0.05mg/kg 。

出口肉中喹乙醇残留量检验方法
1 主题内容与适用范围

本标准规定了出口肉中喹乙醇残留量检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。
本标准适用于出口鸡肉中喹乙醇残留量的检验。

2 抽样和制样

2.1 检验批
以不超过2 500件商品为一检验批。
同一检验批的商品应具有相同的特征,如包装、标记、产地、规格和等级等。
2.2 抽样数量

批量(件) 最低抽样数(件)
1～25 1
26～100 5
101～250 10
251～500 15
501～1 000 17
1 001～2 500 20
2.3 抽样方法
按2.2规定的抽样件数随机抽取,逐件开启。每件至少取一包,从每包中抽取肉样不少于50g,其总量不得少于1kg。放入清洁容器内,加封后,标明标记,及时送实验室。
2.4 试样制备
将所取原始样品缩分出0.5kg,取可食部分,经组织捣碎机捣碎,均分成两份,装入洁净容器内,密封,作为试样,并标明标记。
2.5 试样保存
将试样于—18℃冷冻保存。
注：在抽样和制样的操作过程中,必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

3 测定方法

3.1 方法提要
将鸡肉样用乙腈提取,用无水碳酸钾脱水,正己烷洗净。将乙腈层蒸发至干,用甲醇溶解残渣,用液相色谱仪进行测定,外标法定量。
3.2 试剂和材料
3.2.1 乙腈：分析纯,重蒸馏。
3.2.2 正己烷：分析纯,重蒸馏,用乙腈饱和。
3.2.3 甲醇：紫外光谱纯。
3.2.4 助滤剂：Celite 545,使用前用甲醇洗涤,烘干。
3.2.5 无水碳酸钾：分析纯,200℃干燥4h。冷却后贮于密封容器中。
3.2.6 喹乙醇标准品：纯度＞99%。
3.2.7 喹乙醇标准溶液：精确称取喹乙醇标准品10.0mg,以少量水溶解,用甲醇稀释至100mL。取此液50mL,再用甲醇稀释至100mL。此液每毫升含喹乙醇5μg。上述标准溶液需置于棕色容量瓶内避光冷藏保存。保存期一个月。
3.3 仪器和设备
3.3.1 玻璃砂芯漏斗。
3.3.2 高速匀质器。
3.3.3 旋转蒸发器。
3.3.4 离心机。
3.3.5 高效液相色谱仪,配紫外检测器。
3.4 测定步骤
喹乙醇遇光易分解,因此要求在测定过程中避开光线的直接照射。
3.4.1 提取
称取试样约10g(精确到0.1g)于250mL均质杯中,加入助滤剂1g及乙腈100mL,均质1min,以3 000～3 500r/min离心5min。将上清液倒入250mL锥形瓶中,再向残留物中加入50mL乙腈,同样均质、离心后,合并上清液。
3.4.2 净化
向上述乙腈提取液中加入无水碳酸钾20g,振摇并放置30min,用玻璃砂芯漏斗抽滤。然后向滤液中加入正己烷100mL,振摇5min,静置分层。将乙腈层转移到茄形瓶中,在40℃水浴中旋转蒸发以除去溶剂。用甲醇2mL溶解残留物,供高效液相色谱测定。
3.4.3 测定
3.4.3.1 色谱条件
a. 色谱柱：μ-Bondapak C18,10 μm,3.9 mm(id)×300 mm；
b. 流动相：甲醇＋水(10＋90),1.5 mL/min；
c. 色谱柱温度：35℃；
d. 检测器波长：380 nm。
3.4.3.2 色谱测定
根据样液中喹乙醇含量情况,选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中喹乙醇响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。
在上述色谱条件下,喹乙醇保留时间约为4.8min。
3.4.3.3 空白试验
除不加试样外,按上述测定步骤进行。
3.4.4 结果计算和表述
用色谱数据处理机或按下列公式计算：
h×c×V
X＝────-
hs×m
式中：X——试样中喹乙醇的残留量,mg/kg；
h——样液中喹乙醇的峰高,mm；
hs——标准工作溶液中喹乙醇的峰高,mm；
c——标准工作溶液中喹乙醇的浓度,μg/mL；
m——称取的试样量,g；
V——样液最终定容体积,mL。
注：计算结果需扣除空白值。

4 方法的测定低限、回收率

4.1 测定低限：0.05 mg/kg。
4.2 回收率
回收率的实验数据：喹乙醇的添加浓度在0.02～0.15mg/kg范围,回收率为80%～89%。