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【原创】容易忽视的问题--关于吸光度和浓度的切换问题???

  • 初学者&九点虎
    2008/07/21
  • 私聊

紫外可见分光光度计(UV)

  • 今天突然发现,在测定样品时,吸光度和浓度在切换的过程中存在一点点小问题。(我用的是老仪器7230,类似721那样的仪器,带工作站的仪器估计没这个问题)
    举个简单的例子说明,比如样品吸光度为0.425,当你切换成浓度时,其对应浓度为1.968,但我天做了一个,吸光度为0.425,浓度为2.012,后来我发现,2.012对应的吸光度为0.426,也就是说,在你切换的一瞬间,吸光度变化了0.001。
    追究其原因,我觉得有一下三种可能:
    1 仪器瞬间发生波动引起的吸光度变换
    2 仪器的几下基线漂移引起的吸光度变化
    3 溶液的性质发生了微小的变化
    没准还有别的情况,欢迎大家一起讨论。
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  • 阿du

    第1楼2008/07/21

    仪器测定的波动还是有的,可以测几次取平均值计算。

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  • 小鸟飞翔

    第2楼2008/07/21

    会不会是换算,小数位取舍的问题?

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  • 初学者&九点虎

    第3楼2008/07/21

    只能这样了,我们一般是做平行试验的

    duliuhui 发表:仪器测定的波动还是有的,可以测几次取平均值计算。

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  • 初学者&九点虎

    第4楼2008/07/21

    不是,就是吸光度发生了变化

    tonyding 发表:会不会是换算,小数位取舍的问题?

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  • 夕阳

    第5楼2008/07/22

    应助达人

    这种现象就是紫外可见分光光度计的特点,也可以说是弱点。
    根据朗伯比尔定律,当通过率变化1%时,吸光度相应变化0.0044Abs,即:
    Abs=Log100/99=0.0044。
    那么楼主测量的吸光值变化了0.001Abs,其透过率仅仅变化了0.3%。
    对仪器而言不要说国产仪器,就是进口仪器,0.3%透过率的变化也是很正常的,所以说紫外可见分光光度计灵敏度不高的原因也就是在此。
    顺便说一句,象楼主所测的样品,如果可能的话(有荧光物质)可以改用荧光分光光度计来测。否则要采用其他测试手段了,因为在紫外上测,说句行话,“动态范围”太窄了。

    zhouyuhu 发表:今天突然发现,在测定样品时,吸光度和浓度在切换的过程中存在一点点小问题。(我用的是老仪器7230,类似721那样的仪器,带工作站的仪器估计没这个问题)
    举个简单的例子说明,比如样品吸光度为0.425,当你切换成浓度时,其对应浓度为1.968,但我天做了一个,吸光度为0.425,浓度为2.012,后来我发现,2.012对应的吸光度为0.426,也就是说,在你切换的一瞬间,吸光度变化了0.001。
    追究其原因,我觉得有一下三种可能:
    1 仪器瞬间发生波动引起的吸光度变换
    2 仪器的几下基线漂移引起的吸光度变化
    3 溶液的性质发生了微小的变化
    没准还有别的情况,欢迎大家一起讨论。

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  • 900426

    第6楼2008/07/22

    肯定是有变化的!!!每次实验的比色皿架落的位置是不可能一样的!

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  • 活到九十 学到一百

    第7楼2008/07/22

    这种变化是可以接受的,我觉得不是什么大问题!

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  • 小鸟飞翔

    第8楼2008/07/22

    0.001/0.425=2.35‰

    wangboxzzjs 发表:这种变化是可以接受的,我觉得不是什么大问题!

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  • 初学者&九点虎

    第9楼2008/07/22

    可以接受,但问题总是存在的

    wangboxzzjs 发表:这种变化是可以接受的,我觉得不是什么大问题!

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  • S K

    第10楼2008/07/23

    仪器的精密度确定了其测试,变化只能说尽量减小,吸光度变化0.001 以内还能接受,超过了可能就要找问题了。

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