仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯
立即体验
APP内打开
回版面
1
1
点赞
拍砖
举报
取消
发布
当前位置:
仪器社区
>
基础知识专区
>
分析化学
>
帖子详情
【转帖】粗多糖含量测定中标准品的选择之二
btcputus
2008/10/16
私聊
分析化学
苯酚-硫酸法是一种常用的检测粗多糖含量的方法,其原理是苯酚-硫酸试剂可与游离的寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸起显色反应,在480-490 nm处有最大吸收值,吸收值与糖含量呈线性关系。此法是先用标准品多糖制作标准曲线后,再通过多糖的显色反应测定吸光度,然后根据其在曲线上的位置推算出多糖的浓度从而推算其含量。此法操作简单、快速、灵敏、重复性好,对每种多糖仅需制作一条标准曲线[1]。
目前大家研究较多的、生物活性较高的一些真菌多糖,如香菇多糖、灵芝多糖、姬松茸多糖、猴头菇多糖、灰树花多糖等[2],在结构上大多是以β-(1→3)、β-(1→4)或β-(1→6)糖苷键连接的葡聚糖,另外,分子量也一般分布在十几万到几十万之间。因此,由北京卫生防疫站建立,经中国预防科学院营养与食品卫生研究所验证的《粗多糖含量的测定方法》中建议使用50万分子量的葡聚糖作为标准品[3]。为行业内粗多糖含量的测定统一了标准,使各企业之间多糖类产品更具有可比性。
燕麦β-葡聚糖是一种β-(1→3)-(1→4)键接的线性葡聚糖,在结构、粘度等其他物理性质上与常见的植物和真菌多糖很相似,适合作为植物、真菌来源多糖含量测定的标准品。但由于多糖纯化困难,市面上不少葡聚糖纯度较低,不适合作为标准品。下面,我们来比较两种不同纯度的燕麦β-葡聚糖产品作为多糖标准品的区别。
1 材料与方法
1.1 实验材料
高纯度燕麦β-葡聚糖PS-Con-Ⅰ由武汉百特纯大分子科技有限公司提供,纯度大于97%(其中,另外3%主要是结合水),低纯度燕麦β-葡聚糖由某食品研究所提供,纯度约50%,苯酚、浓硫酸均为化学纯。
1.2 实验方法
样品溶解:高纯度燕麦β-葡聚糖经70℃水浴,15min后完全溶解。低纯度燕麦β-葡聚糖70℃水浴,30min后仍有不溶物,升高溶解温度至90℃后继续溶解30min,仍有少量不溶物,过滤。
溶液配制:配制0.1mg/ml葡聚糖标准溶液,50mg/ml苯酚溶液备用。
标准曲线的制作:精密吸取葡聚糖标准液0.10,0.40, 0.80,1.20,1.60,2.00ml(分别相当于葡聚糖0.01,0.04,0.08,0.12,0.16,0.20mg),补充水至2.0mL,加入苯酚溶液1.0ml,混匀,再加入浓硫酸5ml,混匀,沸水浴2分钟,混匀,冷却后用分光光度计在485nm波长处以试剂空白溶液为参比,测定吸光度值(A),以A为横坐标,葡聚糖含量C为纵坐标绘制标准曲线。
2 结果与分析
2.1 样品溶解
高纯度燕麦β-葡聚糖溶解速度较快,溶液澄清透明,说明此产品溶解性良好。低纯度燕麦β-葡聚糖难以溶解,且溶解1h后仍有不溶物存在,说明此产品溶解性差,杂质较多。
2.2 标准曲线
下表为两种标准品分别配制不同葡聚糖浓度(含量)反应后得到的吸光值:
葡聚糖含量(mg) 0.01 0.04 0.08 0.12 0.16 2.00
高纯度标样吸光值 0.053 0.080 0.200 0.262 0.353 0.450
低纯度标样吸光值 0.001 0.055 0.113 0.173 0.240 0.320
通过数据处理,得到标准曲线如下:
高纯度燕麦β-葡聚糖 C=0.4657A-0.0068 (R=0.9955)
低纯度燕麦β-葡聚糖 C=0.609A+0.0101(R=0.9985)
比较这两个标准曲线发现,当待测样品吸光值一定,使用低纯度葡聚糖作为标准品得到的标准曲线计算葡聚糖含量值时,明显高于高纯度标准品。
究其原因,低纯度葡聚糖所含杂质较多,在作为标准品时,部分杂质不能溶解,却计入了标准品葡聚糖总量,因此,使得结果偏高。另外,即使溶解的物质中,也有可能存在部分不能参加反应的蛋白等杂质,同样会造成结果偏高。
由以上数据和分析可以得出,测定粗多糖含量不能使用低纯度葡聚糖作为标准品,应尽量选用高纯度葡聚糖标准品,按照国家建议方法和行业标准进行检测,这样才能保证各企业多糖系列产品在含量和纯度上的可比性,有利于规范企业行为和保健品市场。
参考文献
[1] 胡居吾,范青生,肖小年. 粗多糖测定方法的研究. 江西食品工业. 2005, 1
[2] 李明元. 真菌粗多糖测定方法的研究. 食品研究与开发. 2007, 5
[3] 粗多糖的测定方法. 北京卫生防疫站建立,经中国预防科学院营养与食品卫生研究所验证. 食品伙伴网
分
该帖子已被
版主-小H
加3积分,加2经验;加分理由:感谢分享,有空多来关注一下
相关话题
1
混凝烧杯实验时,混凝剂是直接加入还是需要先混合成液体加入呢?
2
标准曲线的浓度梯度怎么确定
3
纯化水硝酸盐的检测
4
关于玫瑰红钠颜色变化
5
注射用透明质酸钠含量测定
+关注
私聊
btcputus
第1楼
2010/01/27
中国仪器信息网
0
发表回复
近期热榜
赛默飞实验室产品焕新计划有奖调研!
【七月征文】不一YOUNG实验“猿”
报名开启:ICS2024第十三届光谱网络会议!
推荐收藏!盘点中药材及饮片检测解决方案
热门活动
甄选国优仪器,助推设备更新
采购咨询618活动:1000元奖励等你拿
猜你喜欢
最新推荐
热门推荐
更多推荐
求一些解决高招
讨论
2012/07/26
化学界的“暗语”
分享
2015/08/18
【分享】化验室常用毒物的中毒症状及防护知
2009/05/26
【求助】要求用蒽酮鉴定糖,用钼酸铵鉴定磷。不知该怎么做?
2011/03/02
【资料】增塑剂知多少
2009/08/22
【求助】锌焙砂中可溶锌的测定手续。请哪位高手帮帮忙吧,紧急!
2009/12/01
【求助】钴离子溶液的配置
2008/11/24
【讨论】不用的化学试剂如何处理?
2008/02/29
磷酸盐标准曲线的斜率和截距在哪个范围?
求助
2024/07/05
不同方法检测磷酸盐和总磷,磷酸盐浓度比总磷高正常吗?
原创
2024/07/05
关于化学试剂MSDS编写问题
原创
2024/07/03
乳品检测硝酸盐
求助
2024/07/01
买的镀铜镉粒
求助
2024/07/01
有机酸提取
求助
2024/07/01
如何判定水质
已应助
2024/07/01
求助求助
已应助
2024/07/01
检测报告一定要有判定结果吗?
求助
2024/07/01
气相FID重现性不好原因
求助
2024/07/01
求助,非甲烷总烃测定中,除烃空气0.4mg/m3,怎么计算的呢?是按总烃计算公式吗?
已应助
2024/06/29
求助安捷伦GC7890B,EPC无响应解决办法
求助
2024/07/01
HJ1332便携非甲实际应用问题
讨论
2024/07/01
衍射斑点标定求助
已应助
2024/06/30
EI源的灯丝镉厂家通用吗?
求助
2024/07/03
‘有奖问答’对错题’:用抽样方案(30,0)对产品批进行连续验收,当批不合格品率为1%时,方案的接收概率为73.97%,则平均检出质量为( )。
讨论
2024/07/05
【求助】有谁做过通宣理肺丸中盐酸麻黄碱测定吗?
2008/10/16
【求助】晚上要停电,不知道仪器和实验室备用电源能用多久啊???
2008/10/16
【求助】百思不得其解的信纸格式,请高手指点!!
2008/10/16
【求助】哪些种类的色谱柱可以用纯水走呀?
2008/10/16
【原创】举报帖子“【求助】那里有进口欧洲电液伺服疲劳试验机?”
2008/10/16
【求助】(已应助)再次求助英文文献两篇(谢谢!)
2008/10/16
【原创】举报帖子“【原创】显微镜软件免费下载”
2008/10/16
【系统公告】Vip用户 walterbai 在 全站 被禁止发帖 3 天
2008/10/16
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器(上海)有限公司(PerkinElmer)
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁
举报帖子
执行举报
点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...