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【讨论】又没有人做过真菌毒素的分析? 大家交流下~

液相色谱(LC)

  • 要做中药中真菌毒素的检测,国内这方面的研究还比较滞后,在食品方面有规定,检测方法还是TLC和酶联免疫法。国际研究非常多,相关法规也非常多,因真菌毒素强大的毒性(黄曲霉素B1的毒性是氰化钾的10倍),但在分析方法上大多没有做过规定,本来想用GC/MS来做的,但GC如不经衍生化只能用来检测一类毒素,大大限制了它的应用,通过看文献发现LC/MS/MS是比较适合的方法。总的来说分析过程没什么难度,难的是在样品的净化富集方面,由于是痕量检测,受基质干扰很严重,而且一份样品中不只含有一种真菌毒素,所以同时测定多种类的真菌毒素也是研究的难点,希望做过相关东西的朋友大家一起来交流下在样品制备及分析方面有没有什么好的经验~~


    该帖子也可以发在LC-MS版面
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  • 雪妖

    第1楼2009/03/10

    这个没有做过,不过现在有很多的方法,比如:过柱,氮吹浓缩,
    只能帮你顶顶了

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  • ge-ge-lgp

    第2楼2009/03/27

    谢谢, 这个在国内做的真是不多,但在国外已经相当成熟了。国内在这方面还不重视,这应该是个很有前景的研究方向。

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  • Mix_Grey

    第3楼2009/03/28

    可以用免疫亲和柱做样品富集.LC/MS/MS检测.

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  • richies

    第4楼2009/03/28

    好像这个方法是目前最先进的了

    冒昧的问一句,您用哪家的免疫亲和柱

    wuyinghao 发表:可以用免疫亲和柱做样品富集.LC/MS/MS检测.

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  • symmacros

    第5楼2009/03/29

    应助达人

    immunoassays
    TCL
    GC
    HPLC
    GC/MS & LC/MS


    LC/MS of Mycotoxins

    Mycotoxin     Ionization

    Aflatoxin     APCI
    Don,T2,Zearalenone  APCI
    Fumonisin ES
    Patulin GC/MS
    Ochratoxin ES or APCI

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  • symmacros

    第6楼2009/03/29

    应助达人

    供参考

    ELISA method for Fumonsins

    Procedure (ELISA)
    1. extract with methanol:water (70:30)
    2a. dilute 10X with binding buffer no conjugate (confirmation)
    2b. dilute 10X with binding buffer/conjugate (quantitation)
    3. add to well, mix for 20 minutes
    3. wash five times with distilled water
    5a. add 100% methanol and remove (MS confirmation)
    5b. add substrate solution (TMB-peroxide)
    6. after 10 minutes add dilute sulfuric acid

    LC/Fluorescence (OPA)

    sample preparation
    1.extract sample (25g) with methanol:water (70:30)
    2.dilute 1:4 with water
    3.apply extract (60%) to C18 or SAX column
    4.wash and elute
    5.evaporate elute to dryness
    6.dissaolve residue in 50:50 water:acetonitrile
    7.add OPA reagent, mix and analyze

    Experimental
    Fluorescence detector (ex.335, em.440)
    C18 column (4.6 X 150mm, 3um particles)
    Flow rate: 1ml/min
    Mobile phase: 48:52 water:acetonitrile
    1% acetic acid in mobile phase

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  • small-stone

    第7楼2012/08/29

    用免疫亲和柱结合LC-MS分析是不错的,如果没有MS,HPLC也可以

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  • 小虾米

    第8楼2012/11/03

    这个没有接触过

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