【讨论】讨论一下进行药物质谱条件优化的时候使用的流动相

zhufangwei

2009/04/25

私聊

液质联用（LCMS）

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在建立药物残留方法的时候，我们都是要用标准品溶液首先优化药物的质谱条件的，那这个时候流动相是如何选择的，Thermo的操作规程是要求使用50%甲醇50%水作为带动流动相，将蠕动泵注入的标准溶液带入质谱内，但我想也不至于是硬性规定吧，也不知道是否有依据。我做试验药物响应还可以，也是运气好啊，可是其他人做的药物按照这样做响应却很低，即使浓度配的很高，但是怎么调正离子模式响应也达不到e7，那遇到这样的问题应该如何去解决呢，按照这样优化，系统的压力不能高于多少。我想是不能太高的，不然药物很难被带入，是不是有硬性规定呢。其他厂家进行质谱优化的时候是不是也用的三通呢，AB的好像不是的，直接用蠕动泵打进去的，那还有其他的呢，比如Agilent，Waters，岛津的等等。
有没有版友用过这些的，有什么体会，具体的操作是怎样的，能否详加列入。

风之彩 2009/04/27

优化质谱条件，一般先用蠕动泵优化，溶剂不一定，看样品的性质选择合适的溶剂。然后接上柱子优化色谱条件，等流动相基本定下来后，再接上三通，继续优化参数，如源温和气的参数等。质谱响应大小，和化合物的性质很有关系的。不一定浓度高了，就能达到e7。至于系统压力，不过使用蠕动泵，好像看不到系统压力的吧，如果接三通，不接柱子，压力不会太高的，具体多少也不一定，这个和管路长短、内径、使用的流动相组成等很有关系。

ellery 2009/04/25

请教，你说的意思是用药物的标准品作为调谐液来用，进行质谱条件优化吗？

宁馨儿 2009/05/08

[quote]原文由 [B]zhufangwei[/B] 发表: [quote]原文由 [B]lrm[/B] 发表: 我们做药物方法开发的一般步骤是：首先配置1ug/mL或1PPM的50%MeOH/H2O溶液（若药物极性较小，可加大有机相的比例），结上三通，即连接LC和针泵，一般流速300uL/min，TSQ上一般母离子信号在e5-e6比较正常，达到e7说明此化合物信号比较高（只有在仪器校正时会要求母离子信号e7），然后待母离子信号稳定后，确定子离子，按步优化质谱参数（Tublens，CE等）；SRM，质谱参数确定后卸掉三通，连接LC，最后优化LC条件（一般进样20ng/mL左右的样品溶液）。[/quote] 300uL/min应该是30uL/min还有点靠谱哦，一般负离子要求在e6，正离子要求在e7是规程上写的很清楚的啊。[/quote] 恩，是30uL/mL

lrm 2009/05/12

300uL/min是指LC流速，针泵一般为10-20uL/min

happy_horse1126 2009/06/08

ABI的质谱也是推荐使用流动相做方法优化的，但实际操作中，我们往往不用。因为这样就把针泵中的样品稀释了。不过用三通即走流动相又走针泵是最贴近实验实际条件的，这种方法才是最实际的优化方式。只是我们实际做下来发现走不走流动相调谐出的结果都差不多，所以我们通常就不用三通走流动相了。至于流动相的比例，因为现在质谱流动相通常是要走梯度的，这样就中庸一下，选甲醇（或者乙腈）:水=50%了。如果你是走等度的流动相，可以用你以后分析时的流动相做调谐。