【luxw实验，我指导2】说说薄层色谱试验的过程和注意事项

小卢

2009/08/25

私聊

综合仪器采购

赏
悬赏金额:60积分状态:已解决

这么长时间，续集终于写完剧本了，现在来欣赏吧！
资料回顾：
薄层色谱法：thin layer chromatography ，即TLC，是将供试品溶液点样于涂布有固定相的薄层板上，经展开、检视后所得的色谱图，与适宜的对照物按同法操作所得的色谱图进行比较。
用途：
药品鉴别、杂质检查
按照分离原理分类：
吸附色谱法、分配色谱法、分子排阻色谱法、胶束薄层色谱法等。本实验为吸附色谱法，即固定相为吸附剂的薄层色谱法。
题目：
以某个药品的鉴别或杂质检查为例，以实验前后的顺序为主线，从固定相种类、薄层板的制备、点样注意事项、展开注意事项、检视的方法等方面阐述本实验，发表自己的看法。
回答详细、独到者有双重奖励（版主加分、悬赏得分）！

羽香 2009/08/25

具体步骤： ⑴制板（以硅胶板为例）选择合适的玻璃板（经常使用显微镜上的载玻片），依次用水和乙醇洗净，晾干。取适量薄层色谱用的硅胶，加适量蒸馏水调成糊。调制时慢慢搅拌，勿使产生气泡。将糊倒在玻璃板上，摇动摊平，晾干。使用前放入烘箱内，在105-115oC左右烘干40-50分钟。冷却后使用。 ⑵点样将试样用最少量展开剂溶解，用毛细管蘸取试样溶液，在薄层板上点样。在样点上轻轻画出一条平行于玻璃板底边的细线。薄层色谱板载样量有限，勿使点样量过多。 ⑶展开吹干样点，竖直放入盛有展开剂的有盖展开瓶中。展开剂要接触到吸附剂下沿，但切勿接触到样点。盖上盖子，展开。待展开剂上行到一定高度（由试验确定适当的展开高度），取出薄层板，再画出展开剂的前沿线。 ⑷显色，计算Rf值挥发干展开剂，选择合适的显色方法显色。量出展开剂和各组分的移动距离，计算各组分的相对移动值。

土老冒豆豆 2009/08/27

这里提到粘合剂CMC，我们的经验是先用溶剂浸泡过夜，第二天再加入硅胶当中混匀，因为CMC在水中不容易溶解，所以要浸泡过夜，使其充分溶散。

怪侠一点红 2009/08/29

[quote]原文由 [B]luxw[/B] 发表: 拿出你的意见来，我们又可以来篇作品了！[em09502][/quote] 大家讨论很积极，不论是自己的经验所得，还是从文献上学来的方法，都值得学习讨论和交流。[em09505][em09505]

chemistryren 2009/08/29

[quote]原文由 [B]luxw[/B] 发表: [quote]原文由 [B]chemistryren[/B] 发表: 爬板还是挺有意思的,几的刚参加工作时合成农药,嘧啶类除草剂,是和德国拜尔合作的项目.用的展开剂是石油醚和乙酸乙酯.扳子是自己做的.用玻璃板,尺寸是25厘米见方,上面涂硅胶和CMC混合后的蔫呼呼的东西作为固定相.点不能点太大,展开完后要及时撤板.完了再放到紫外灯下照着把轮廓画出来.再把要的部分的固定相用刻刀刻下.用乙酸乙酯浸泡搅拌提取后过滤,旋转蒸发浓缩,达到提纯的目的.[/quote] 一个帖就提到了好几个想说的问题： 1.跑板，应该跑到什么程度呢？ 2.铺板，固定相的配制注意事项有哪些？ 3.点样后的板处理，这应该有好几种情况，比如：105°烘后观察、晾干后喷显色剂、晾干在紫外下看荧光，当然还有上面提到的再提取（我还没遇到过呢）等等，这其中有什么要点吗？ [/quote] 跑板一般展开剂跑到板子上端就可以结束了。铺板前的硅胶配制是关键。。。要充分搅拌均匀，不能出现结块的硅胶。铺的时候要均匀，每块板子铺的硅胶量应接近。再提取没什么特别的，刻下来后装到小烧瓶里，在磁力搅拌机上用乙酸乙酯提取。当然这是我做的实验。。别人实验的提取就不一样了。

老多_小多 2009/08/25

[quote]原文由 [B]shenyan1981[/B] 发表: 1、铺板时一定要铺匀，特别是边、角部分，晾干时要放在平整的地方。 2、点样时点要细，直径不要大于2mm,间隔0.5cm以上，浓度不可过大，以免出现拖尾、混杂现象。 3、展开用的烧杯要洗净烘干，放入板之前，要先加展开剂，盖上表面皿，让烧杯内形成一定的蒸气压。点样的一端要浸入展开剂0.5cm以上,但展开剂不可没过样品原点。当展开剂上升到距上端0.5－1cm时要及时将板取出，用铅笔标示出展开剂前沿的位置。 [/quote] 应该说自己的经验 [U][color=#DC143C]有道理！来一段吧，期待中！[/color][/U]