毛细管电泳(CE)
sunpengwjh
第1楼2009/11/13
等电点差很大,应该不是很难分离,知道等电点后关键是你选用的pH,您选用的pH是多少?
i_am_ling
第2楼2009/11/13
是什么要求必须是碱性条件的?
chen456
第3楼2009/11/13
我选的是pH10.2的,有连个小山尖,但是在10.15和10.25时是一点也分不开了,又完全合在一起了,只是峰胖了点,矮了点,而且出峰时间也有改变,我目前不知道该怎么做下去了。谢谢您!
第4楼2009/11/13
我试了一下酸性条件,完全分不开,但是不知道是不是我的pH计当时有问题,还是选的缓冲体系不对,反正现在我很迷茫。按常理来说碱性氨基酸,在什么条件下能分开呢?
第5楼2009/11/14
酸性氨基酸:氨基数目少于羧基数目。溶液呈酸性,即PH<7。因此其与中性氨基酸相似,溶液中负离子数目要大于正离子的数目,要想达到等电点,就必须要降低负离子的数目,要向体系中加酸,加H离子。因此其:PI 碱性氨基酸:氨基数目大于羧基数目。溶液呈碱性,PH>7。由于氨基的数目多,因此,溶液中正离子的数目比负离子的数目要多。要想达到等电点,则要减少正离子的数目,可通过加碱来实现。向溶液中加OH-,会消耗掉氨基所结合的H离子,从而使正离子数目降低。因此,碱性氨基酸的等电点与PH之间的关系为:PI>PH>7 。
plf0717
第6楼2009/11/20
等电点相差很大的话,选择合适PH分离应该没啥问题的。建议选择PH介于两氨基酸等电点之间,这样高的带正电,低的带负电,不同电荷样品在CE中迁移速度不同。。。个人小见解,仅供参考!
viernes
第7楼2009/11/22
正解 我的理解也是在两个氨基酸的等电点 之间 取得pH 一个带正电 一个带 负电吧
第8楼2009/11/23
如果是三个呢?等电点基本相差一,八点几,九点几和十点几,怎么选pH呢?
第9楼2009/11/23
说的很对,但是为什么分不开呢?这中间到底是什么原因呢?按说等电点不同,是能分开的,但是是条件很难摸索,我的时间有限,希望大家讨论一下,看看有没有更好的办法。
cpudaxiao
第10楼2009/11/23
还有办法:1:提高分离电压。2: 提高缓冲液的浓度。3; 更换缓冲液种类,或加入环糊精之类的手性拆分试剂。
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