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【讨论】Tris buffer 能用作酸性缓冲么

毛细管电泳(CE)

  • 请问 Tris base是碱性的,pK在8.0左右,但是师兄曾用Tris-HCl做酸性的电泳缓冲液pH=2.5。
    疑惑中,既然是buffer,就要有缓冲能力,偏离pK这么远,岂不是没有缓冲了?
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  • i_am_ling

    第1楼2009/12/21

    应该是可以的,好多文献上也是这样使用的,TRIS-HCl,楼主可以测试一下缓冲能力!

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  • 老化验工

    第2楼2009/12/21

    Tris的化学式为 (HOCH2)3CNH2,共轭酸碱的定义,它是一元弱碱,只能构成一种缓冲溶液溶液,即Tris+HCl(Tris质子化后成为共轭酸),它的有效缓冲范围应该是pKa±1=8.21±1,控制PH范围偏碱,7.21-9.21,如果调到PH2.5,它完全质子化,几乎没有了共轭碱,也就没有缓冲作用了。这不需要试验,理论计算一下PH2时的缓冲容量就知道了。pKa±1是教科书上明白无误的原则。
    如果将Tris加酸至PH1,这时也具有缓冲作用,但此时已经不是Tris的功劳了,因为强酸、强碱也可作缓冲溶液,例如,在PH1.0的硝酸溶液中用EDTA来滴定铋,就是强酸的缓冲作用。

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  • cpudaxiao

    第3楼2009/12/21

    估计要加很多盐酸了,PH2用醋酸盐好了,但是TRIS的电流确实够小!

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  • 老化验工

    第4楼2009/12/21

    醋酸也不合适,可选磷酸/磷酸二氢钾(pKa1=2.12)、氨基乙酸-HCl(pKa1=2.35),选择的原则是所选的弱酸的PKa最接近要求的PH值,这样可保证达到要求的缓冲溶液中共轭酸碱摩尔比最接近1:1,缓冲容量最大(恒C时)。

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:估计要加很多盐酸了,PH2用醋酸盐好了,但是TRIS的电流确实够小!

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  • 老化验工

    第5楼2009/12/21

    楼主提到在PH2.5下的“Tris/HCl”缓冲溶液,我对此作了一个缓冲容量与PH的关系图(总浓度设为0.2mol/L):


    从图上可看出,左边PH<2.0和PH>12.0,都有强烈的缓冲作用,但这时分别是由溶液中的盐酸(PH<2.0)和氢氧根(PH>12.0)在缓冲,并不是tris的。Tris/HCl的缓冲范围是中间的峰形范围(淡绿色区域有缓冲)。

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  • viernes

    第6楼2009/12/22

    人才呀 你的回帖我珍藏了去

    zlhuang0132(zlhuang0132) 发表:楼主提到在PH2.5下的“Tris/HCl”缓冲溶液,我对此作了一个缓冲容量与PH的关系图(总浓度设为0.2mol/L):

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  • sunpengwjh

    第7楼2009/12/22

    zlhuang0132确实回答的很好很充分,也很负责任,这也是值得我们大家学习的!

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  • spying

    第8楼2009/12/23

    谢谢五楼的杰作,学习了!

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  • yonkoyuki

    第9楼2010/11/10

    人才,又热心,值得学习

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  • sunpengwjh

    第10楼2010/11/10

    您是从事区带电泳方向研究好事电色谱方向?

    yonkoyuki(yonkoyuki) 发表:人才,又热心,值得学习

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