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【讨论】便携式近红外定量检测酶力肽的蛋白质含量的模型建立及问题

  • 闲鹤野云
    2010/03/22
  • 私聊

近红外光谱(NIR)

  • 最近使用新买的便携式近红外设备,对酶力肽进行了蛋白质的湿化学方法检测,然后对样品光谱进行采集,通过定量分析模型的建立、优化,尝试对样品进行回归测定。

    蛋白质采用凯氏定氮法,按同一标准,粉碎蛋白有一定差异的样品(同一粉碎机、粉碎时间),测定出样品蛋白质含量的真值:70-90%(主要是含水量不同造成的差异)。

    光谱采集分粉碎样品和原始样品两种类型,分别建模。

    结果:总体不错。但有几个问题需要大家注意。

    1. 粒度对模型和检测结果影响非常大,一定要粉碎一致。不同粒度下建立的模型检测结果误差很大,尤其是未粉碎的,误差更大。粉碎的样品结果一致性很好

    2.由于采用漫发射光谱,光源直接贴近样品照射,同一位点进行定量检测时如果不移动,每次的检测结果都会变化,但按绝对值增大约1%的幅度增加。我感觉可能与长期一直照射的情况下,样品内部温度发生变化导致水分发生移动,或漫反射的能量加强导致检测结果不稳定。但哪个是主要原因呢???
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  • 闲鹤野云

    第1楼2010/03/22

    不知其它类型的近红外设备,如果样品在样品池内放置,多次检测,结果会如何?

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  • 闲鹤野云

    第2楼2010/03/23

    需要说明的是酶力肽是一种以动物源性的饲料原料为主的饲料制品,产品原料粒度不同,因此检测时需要均匀的粒度。

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  • 王俊强 聚光科技

    第3楼2010/05/07

    可能的问题,个人看法

    1、粒度均匀肯定更好,而且达到细化更理想,因为有间隙。
    还有你的便携式仪器的光斑应该不是很大,采集的样本代表性一致性可能不是很怜惜。
    传统近红外仪器,几个厂家都是旋转样品盘,能够均匀化采集光谱。

    2、本身近红外统一地点检测,是会存在一定的波动,这个符合光谱预测的数学理论,关键是你的模型预测偏差是否大了。
    温度是会有影响,但是检测快的化,基本没大问题。液体物品,温度有些时间检测时做成恒温测定。

    闲鹤野云(ruojun) 发表:最近使用新买的便携式近红外设备,对酶力肽进行了蛋白质的湿化学方法检测,然后对样品光谱进行采集,通过定量分析模型的建立、优化,尝试对样品进行回归测定。

    蛋白质采用凯氏定氮法,按同一标准,粉碎蛋白有一定差异的样品(同一粉碎机、粉碎时间),测定出样品蛋白质含量的真值:70-90%(主要是含水量不同造成的差异)。

    光谱采集分粉碎样品和原始样品两种类型,分别建模。

    结果:总体不错。但有几个问题需要大家注意。

    1. 粒度对模型和检测结果影响非常大,一定要粉碎一致。不同粒度下建立的模型检测结果误差很大,尤其是未粉碎的,误差更大。粉碎的样品结果一致性很好

    2.由于采用漫发射光谱,光源直接贴近样品照射,同一位点进行定量检测时如果不移动,每次的检测结果都会变化,但按绝对值增大约1%的幅度增加。我感觉可能与长期一直照射的情况下,样品内部温度发生变化导致水分发生移动,或漫反射的能量加强导致检测结果不稳定。但哪个是主要原因呢???

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  • 闲鹤野云

    第4楼2010/05/08

    光斑就2厘米吧,所以样品的均匀性应该很重要,多谢建议.

    王俊强 聚光科技(jackey27) 发表:可能的问题,个人看法

    1、粒度均匀肯定更好,而且达到细化更理想,因为有间隙。
    还有你的便携式仪器的光斑应该不是很大,采集的样本代表性一致性可能不是很怜惜。
    传统近红外仪器,几个厂家都是旋转样品盘,能够均匀化采集光谱。

    2、本身近红外统一地点检测,是会存在一定的波动,这个符合光谱预测的数学理论,关键是你的模型预测偏差是否大了。
    温度是会有影响,但是检测快的化,基本没大问题。液体物品,温度有些时间检测时做成恒温测定。

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  • 闲鹤野云

    第5楼2010/05/20

    最近发现,使用未粉碎的样品检测结果偏差较大,检测粉碎的样品结果比较稳定。看来还是处理样品有好处

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