【讨论】关于这几天做的液相问题

你先测下流动相的PH，跟柱子是有一定的关系，最好在连续做样的时候能让柱子休息一段时间，后来的峰柱效明显低了。

同意楼上!!

那不同牌子的甲醇提取液，其他的都一摸一样。为什么图谱差别那么大，就是倒数第二个和第三个图。

一般的色谱柱都能耐pH2.0以上的磷酸，0.1％（体积比）的磷酸大概pH值在2.0～2.2左右。我们使用的色谱柱整年都接在仪器上，一年350天，每天24小时，一直不停的使用0.1％的磷酸，柱子也没有因为用酸损伤。
柱子跟机器一样，休息没有太大必要，定期保养是需要的。
我们的柱子用完磷酸放上几天甚至一周也没有太大关系的，只有长时间不用才有必要冲洗。
我觉得还是考虑一下你的样品前处理问题

应助达人

最好把系统和色谱柱都清洗一下，可能是色谱柱污染了，最好加保护柱，减小对色谱柱的损害。

偶考虑主要有以下几个原因：
1. 0.05%磷酸一般不会影响柱效的（本人实验室常年用），根据色谱图看，出现了双峰，考虑分析物的稳定性（存在异构体否？）不稳定或有异构体就会出现此类情况；
2. 分析过程中有没有动过柱子，若分析柱被碰撞，可能造成柱子塌陷，出现双峰现象；
3. 柱子被污染，可采用反向采用甲醇、乙腈冲洗1小时。
以上仅供参考。

hehe 呵呵，我不知道您的是什么牌子色谱柱。我的是依利特的，去年十月份买的，一直用的是0.05%磷酸。稍大一点都不敢用。不过这次确实 是晚上lostprime没冲柱子，第二天柱效立马降低了。前处理是用甲醇超声提取的，按说第二个甲醇有些问题，但进样量只有10ul，应该没有影响那么大吧？

柱子清洗过了，压力没有高，应该没堵，还有我们一直有保护住。谢谢您的指点。

谢谢您的指点
1 这个出现双峰的原因不是柱子问题，是提取液甲醇问题，我换了另一种甲醇，出的色谱图没有双峰，只是柱效低了，倒数第二张图。分析物是稳定的，我去年做的样品，今年又过滤了一下，进样，峰很好。
2 没有动过柱子
3柱压没有高，强保留物质？昨晚冲了很久，用甲醇。今天没进样，想直接活化得了。