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【讨论】液相色谱柱使用注意事项

yongw

2010/05/20

1、注意正确地使用和存放色谱柱，不锈钢柱色谱柱可选用以下的溶剂保存：正相柱用烃类溶剂，反相柱用甲醇，离子交换柱用水或甲醇/水。某些专用分析色谱柱要注意制造商规定的保存条件。另外，要注意溶液的PH值，一般控制在PH2－8范围内，其硅胶柱PH＞8时会发生硅胶溶脱的情况，键合型柱PH＜2时会发生键合相断裂。

2、注入色谱柱的溶剂、标液、样品溶液都必须严格过滤，以去除杂质，防止堵塞色谱柱。当用反冲洗方法无效时，可将柱口过滤装置取下，用弱酸溶液处理，去除污物或定期更换。

3、建议：为了保护色谱柱，避免给分析带来不必要的麻烦，请使用保护柱！！

4、大多数反相色谱柱的pH稳定范围是2－8，尽量不超过该色谱柱的pH范围

5、避免流动相组成及极性的剧烈变化及流速短时间内有较大的变化

6、流动相使用前必须经脱气和过滤处理，有机相最好也抽滤

7、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在实验完毕柱子冲洗干净，先用低浓度的有机项冲洗30分钟，最好保存在有机相中

8、压力升高是需要更换预柱的信号

9、柱子在任何情况下不能碰撞、弯曲或强烈震动；
10、当柱子和色谱仪连接时，阀件或管路一定要清洗干净；

11、避免使用高粘度的溶剂作为流动相；
12、每天分析工作结束后，要清洗进样阀中残留的样品；每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱；若分析柱长期不使用，应用适当有机溶剂保存并封闭；

13、色谱柱污染后可采用合适的溶剂冲洗，使柱效再生。

⑴硅胶柱可以使用正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水按顺序冲洗色谱柱，经过净化的色谱柱必须进行水活化，即按上述相反的顺序冲洗。柱再生时所需要的有机溶剂要严格进行脱水处理。

⑵反相柱可以用甲醇、氯仿、正庚烷冲洗，键合C18柱一般用甲醇冲洗，必要时可用0.5 M EDTA钠盐溶液冲洗，然后用水冲洗，以达到去除柱内盐类。

⑶键合型的离子交换柱可以用缓冲溶液、水、甲醇冲洗。

14、对污染严重的色谱柱在冲洗无效时，需将柱内填料取出进行处理或更换新的填料，还可以用更换柱头填料的方法即将柱头入口处的被污染的填料取出，重新补装和柱内同类型的填料，然后在改变柱流向进行再生。这种逆流再生柱的方法，可以救活大部分柱子。

分
该帖子已被版主-月旭科技--小S加10积分，加2经验;加分理由:感谢分享啊！

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快乐

第1楼2010/05/20

应助达人

谢谢分享。

0

yongw

第2楼2010/05/20

像快乐版主学习！送人玫瑰手留余香
快乐(ynsfeed) 发表:谢谢分享。

0

lxx5052

第3楼2010/05/20

都值得学习，呵呵，经验很丰富

0

毛毛儿

第4楼2010/05/20

应助工程师

介绍得很详细了，看起来一目了然！

0

快乐

第5楼2010/05/20

应助达人

13、色谱柱污染后可采用合适的溶剂冲洗，使柱效再生。

⑴硅胶柱可以使用正庚烷、氯仿、乙酸乙酯、丙酮、乙醇和水按顺序冲洗色谱柱，经过净化的色谱柱必须进行水活化，即按上述相反的顺序冲洗。柱再生时所需要的有机溶剂要严格进行脱水处理。

水活化是什么意思？

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雪妖

第6楼2010/05/29

反过来冲洗一遍
为什么叫水活化呢？

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小卢

第7楼2010/06/09

总结的不错,好好研究一下啊！

0

小卢

第8楼2010/06/09

13、色谱柱污染后可采用合适的溶剂冲洗，使柱效再生
楼主是平时怎么处理的呢？

0

yongw

第9楼2010/06/09

反冲即可
小卢(luxw) 发表:13、色谱柱污染后可采用合适的溶剂冲洗，使柱效再生
楼主是平时怎么处理的呢？

0

yongw

第10楼2010/06/09

不是本人总结，以前在网上看到的资料
小卢(luxw) 发表:总结的不错,好好研究一下啊！

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