【求助】【易变坏的物质高效液相怎样测定？】

1818 2010/06/04

[quote]原文由 [b]草鸟の上路(hbnu1025)[/b] 发表: 该化合物有以下性质： 1.物质在甲醇和水中易坏，能否换成乙醇做流动相 2.该物质容易被氧化，在TLC过程就能变坏，碱性条 件下加速变质，生成TLC上面的点，（如附件图）有没有较好的[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]条件 3.以前[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]条件是甲醇和三氟乙酸水溶液，结果纯度只能测到80%左右，有一个很大宽峰，杂质，应该是产物变坏。 4.核磁和质谱都很纯，有没有其他的方式表征纯度 分子结构如下： [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/01/201701191654_640021_1923809_3.jpg[/img] 板如下：二氯甲烷：乙醇=5:1（展开剂），下面主点是产物，上面的是杂质（疑是氧化变坏的） [img]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/10/201006041544295016_01_1923809_3.jpg[/img] 凡参与讨论者都有金币，意见较好的给予重谢，谢谢各位网友！ 如果200金币不够用，再请版主额外从本处转金币重谢。。 希望大家积极参与。。[/quote] 1、当然可以换成乙醇作流动相啊，有些品种的流动相就是用乙醇啊！！不过乙醇一定要用色谱级的！ 2、如果你的样品容易氧化，那你可以尝试在酸性条件下啊！ 3、应该是太酸了，改用冰醋酸可能会好些！！

lijin79833313 2010/06/04

该物质为5,6-二羟基吲哚溴酸盐，个人感觉该物质被氧化的可能性不大，测定过程中分解，可能跟溶剂及流动相的PH值关系较大，该物质为盐，用C18进行分离的话，必须使该物质电离，否则不保留，因此，流动相的PH值可能要低一些，但PH太低可能导致了样品的分解，楼主正好提到了三氟乙酸，酸性很强，可以尝试用三氟乙酸调不同的PH进行实验，范围不要太宽，很可能，样品只适合较窄的PH范围，如果正跟PH有关，流动相里最好加上缓冲盐。

青橙 2010/06/09

我觉得这种物质极性很强，可以用离子对试剂试试

初晶古恒 2010/06/10

这个物质应该是用“硅胶柱+反相”来进行分离。封端的C18保留很弱，未封端的又峰形很差劲。还有pH调节很重要，最好是在不同pH值条件下查看该物质的紫外吸收图谱有没有明显的变化。 另外：纯度你一定要用2种不同原理的方法证明其纯度才可以，可以考虑熔点法、元素分析等等来考察其纯度。

有水有渝 2010/07/01

1、流动相选酸性没错，这个物质已成盐稳定性已大大提高。如果易氧化可以加入抗坏血酸，以外标法定量。 2、这个可能极性有点强，甲醇与乙醇的性质差不多，我觉得流动相没有必要改成乙醇，操作中可以避光操作，参考儿茶酚类物质的分析。 3、可以考虑一下能不能用化学滴定法测含量，配合[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/5p][color=#3333ff]液相[/color][/url]检测杂质。