小不董
第1楼2010/07/20
写好了,发帖,结果说字数超过7000,发帖失败,返回,后果是刚刚写的全没有了。先再写一点,明天再继续吧。
那就长话短说吧。本想比较下中国实验室用水国家标准GB6682-2008和中国电子行业超纯水国家标准GB/T1146.1-1997和美国试药级用水的标准规格(美国临床病理学会CAP,美国材料试验学会ASTM,国家临床检验学会NCCLS),中国实验室用水国家标准从GB6682-92到GB6682–2000再到08版,要求在提高。各标准针对应用对象不同,要求也不一样。
在表述上也有很大的不同,比如ASTM要求的是微生物,而中国国标要求的是细菌。
言归正传,凝胶色谱使用的纯水,我们需要注意哪些?怎么选择呢?
凝聚色谱和HPLC一样,要求其含杂质能尽可能的少,电导率的高低直接代表着水质的好坏,其实色谱纯的纯水可以不用考虑电导的,因为我们用纯水作流动相的时候,往往要添加缓冲盐的,而且是mol/L来计,可想那时的电导是多么的高,但为什么我们要看纯水的电导呢?色谱中很怕Cl根,它对色谱的泵等不锈钢元件的腐蚀是强的,我们一定要避免。可以查看我们使用的缓冲盐几乎没有Cl根的盐,缓冲能力只是一部分原因。能够去除Cl根的同时也就去除了其他的盐,所以电导就作为一个重要的指标了。
论坛里早有人讨论过,很多人推荐用纯水机的纯水,也有人市场上的商业色谱纯水,还有人使用饮用纯净水来代替。各自有他的优缺点。
纯水机的纯水应该是首先。一个是比较新鲜,不容易被污染,滋生细菌。但纯水机会牵涉一些维护,耗材等。市场上的纯水机很多了,生产纯水的工艺都比较成熟,只是在质量上有所不同,大多经过活性碳,超滤,RO(反渗透),阴阳树脂,紫外杀菌,微孔过滤等,有些纯水选择其中几种,但树脂,紫外杀菌,和微孔过滤是必须的,要保证其降低电导率,胶体颗粒,没有细菌。很多纯水机对进水都有要求,水质不好的很容易污染过滤膜和树脂,影响产水质量,树脂等耗材更换频率会增加,故而增加成本。有好的纯水机都能保证其低的电导,有效的过滤微小颗粒和细菌,能够保证即时出水,产水不致以因为存放而产生细菌被污染。
不知道是否有人买过商业的色谱纯纯水没?我们实验室有一瓶墨克的,但几乎不用。不是因为它不好,而是特殊原因,我们是做水处理的,我们一般洗瓶子的水都是二级RO产水,我们作为纯水是用的二级反渗透产水,再经过EDI除盐,水质一般达到17兆左右,然后再进纯水机。所以我们的水很有保障,纯水机的耗材的寿命要比好多单位的要长很多,而瓶装的色谱纯的水价格也不菲。
饮用矿泉水,在一般的企业用的比较多,一个价格可以承受,就以娃哈哈纯净水为例,他的生产工艺就是反渗透过滤,去除悬浮颗粒和盐,再人工添加了少量的矿物质,我们再测定其电导,其实也不高,几个到几十个西门子。Cl根也就几个ppm。能够达到饮用水标准,细菌按理就是达标的。色谱的纯水最怕的就是滋长细菌。
以前大学里用的纯水是自来水通过阳阴阴+阳阴阴离子交换树脂的箱子得到的,这只是去除部分阴阳离子,但很多胶体类的物质和细菌没有去除,是不建议用来做色谱的纯水使用。
现在还有很多朋友再问,我们实验室有蒸馏水,我们是否可以用来做色谱用的纯水呢?我也不建议,为什么?不是蒸馏水电导可以达到一定的要求了,很纯了呀,但是能购蒸馏出来的物质还有很多, 特别是有机物,我们用这样的蒸馏水,如果含有一些挥发性的有机物,在紫外等检测器可能就有干扰,从而带来一些分析误差。在没有比这更好的水时才使用。
总结下,到底什么样的水才能作为色谱,凝胶色谱使用的纯水呢?
我们主要看这些指标:胶体颗粒(可能堵塞柱子的物质),一般过滤来去除;细菌(紫外用的比较多,臭氧也使用);腐蚀性盐(反渗透,EDI,阴阳离子树脂等),电导表征;有机物(活性碳,反渗透等),TOC、COD等来表征。这些指标能过关,就可以用来作为色谱用的纯水了。
二头
第10楼2010/07/30
你的意思是,各个样品用的抑菌剂可能不同?比如一直用叠氮化钠,可能对一些样品效果不好?
还有,水相的流动相回流会不会更容易造成细菌滋生?是不是温度要比较低,25度一下么?