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【求助】峰面积减少，但内标的没变，怎么回事啊？

suiyou2011

2010/07/22

液相色谱（LC）

我用的内标法检测胡萝卜素，但是感觉最近液相不太正常，有时候做着做着压力突然上升或是突然下降，明明是浓度很高的，用内标计算后浓度很低，而且峰面积也明显很低，但内标的峰面积则没有什么太大的改变
我想问问大家，是因为压力的问题还是主子的问题啊，我用的柱子是一根很老的柱子，所以怀疑它都不行了
谢谢各位了

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有水有渝

第1楼2010/07/22

应助达人

压力逐渐上升可能是色谱柱的原因，压力突然上升或是突然下降可能是单向阀污染，需要清洗。内标不变，胡萝卜素变化，那要考察一下胡萝卜素溶液的稳定性。柱子行不行看柱效，如果能达到系统适应性规定一要求，一般都可以使用。

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coffee8

第2楼2010/07/22

峰面积的减小，应该与胡萝卜素稳定性有关系吧？！

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lanlan409

第3楼2010/07/22

我觉得应该是你的胡萝卜溶液有问题！可能配错了！

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suiyou2011

第4楼2010/07/23

理论塔板数，内标的能达到9000多，胡萝卜素的只能达到3000到4000
我用的是C18的
胡萝卜素的稳定性本身是不好的，但是根据颜色是能初步判定其浓度的大小的，而目前我之所以怀疑，就是因为颜色深的那个样品结果和颜色浅的一样
有水有渝(xky0230699) 发表:压力逐渐上升可能是色谱柱的原因，压力突然上升或是突然下降可能是单向阀污染，需要清洗。内标不变，胡萝卜素变化，那要考察一下胡萝卜素溶液的稳定性。柱子行不行看柱效，如果能达到系统适应性规定一要求，一般都可以使用。

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suiyou2011

第5楼2010/07/23

胡萝卜素确实不稳定，会导致峰面积减少
但是，颜色深浅可以反映浓度
coffee8(coffee8) 发表:峰面积的减小，应该与胡萝卜素稳定性有关系吧？！

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suiyou2011

第6楼2010/07/23

应该没什么问题的，选择的溶剂是可溶的
lanlan409(lanlan409) 发表:我觉得应该是你的胡萝卜溶液有问题！可能配错了！

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有水有渝

第7楼2010/07/23

应助达人

对照品与样品都是一样的吗？建议重新配制一份对照品试试。

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