仪器信息网APP
选仪器、听讲座、看资讯

【讨论】求助:液相在检测氨基酸中平衡色谱柱时出现的怪异图谱

液相色谱(LC)

  • 如附件图示,该图是检测氨基酸中平衡色谱柱出现图谱,非常的困惑,求解!
    在发帖前做了以下措施,(甲醇,乙腈,水,流动相均是1周前用过的)但是结果依然不理想。
    1 之前色谱柱被不小心装反了方向,所以用小流速0.2ml的乙腈:水60:40 活化色谱柱,至少是4个小时以上。
    2 怀疑检测池进入气泡,纯甲醇小流速冲洗检测池 2个小时
    3 怀疑色谱柱的污染物进了检测池,又反冲检测池,甲醇,水每十分钟交替冲洗,至少5个小时以上。
    4 磷酸清洗检测池
    5 灯校正和诊断正常。
    6 取下过滤头再次平衡,出现同样的图谱。
    +关注 私聊
  • 青橙

    第1楼2010/08/02

    觉得是进气泡了 排气泡应该用大流速冲洗

0
    +关注 私聊
  • tangxz

    第2楼2010/08/02

    打了电话问了仪器厂家的工程师的,说是要用小流速冲

0
    +关注 私聊
  • 有水有渝

    第3楼2010/08/02

    应助达人

    先咨询一下色谱柱厂反冲时入口处的填料会不会被冲出来,你用检测方法是不是梯度,如果是的话,以甲醇,水代替流动相,不含盐,以梯度清洗一下色谱柱。

0
    +关注 私聊
  • aalabs03

    第4楼2010/08/03

    背景基质是不是很复杂我的建议别用HPLC检测氨基酸了可以考虑下LCMSMS优势在于速度快效率高检测精度高检测范围广可检测42种氨基酸(内标)不用考虑背景基质的复杂情况如果有需要可以咨询下北京艾米诺医学研究有限公司的小丁

0
    +关注 私聊
  • tangxz

    第5楼2010/08/03

    quote原文由b有水有渝xky0230699b发表:先咨询一下色谱柱厂反冲时入口处的填料会不会被冲出来你用检测方法是不是梯度如果是的话以甲醇水代替流动相不含盐以梯度清洗一下色谱柱quote


    已经咨询过WATERS的工程师了说是反冲是没有问题的并且在排除柱子因素的时候我换了三根色谱柱来试过的所以不是柱子问题
    检测方法是梯度的昨天下午依据工程师提供的方法进行了纯甲醇纯乙腈乙腈+水60:40等度的走了曲线的但是依然有锯齿一样的峰出来

0
    +关注 私聊
  • amoeba1982

    第6楼2010/08/04

    1、灯校正能量是多少?拆除检测池后能量多少?
    2、零流速,监测基线,查看这种情况是否存在?
    3、室内温度变化是否剧烈,空调出风口是否正对检测器?
    3、排除室内环境因素后,零流速基线不稳定,可能需要拆洗检测池,WATERS2996PDA检测池拆洗一般需要厂家上门的。
    4、若氘灯使用时间比较长,有时还需更换氘灯。

0
    +关注 私聊
  • tmh

    第7楼2010/08/05

    这是高压梯度方式的结果,如果改为一个通道这个现象就没有了.还有就是有机相质量不好也有这现象.我认为更多的是仪器本身的问题,我现正为些头大着.以前我用低压方式没有这种现象.

0
    +关注 私聊
  • 有水有渝

    第8楼2010/08/05

    应助达人

    如果检测池是因为色谱柱反装被强保留物质污染,建议用四氢呋喃清洗检测池试试。压力有波动吗?

0
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
举报帖子

执行举报

点赞用户
好友列表
加载中...
正在为您切换请稍后...