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【求助】单标出现裂分峰是否与PH有关?如何改善?

毛细管电泳(CE)

  • 最近试验发现PH的改变会影响单标的出峰情况,但是混标的出峰又不存在这样的问题,这是为什么?用的是硼砂和磷酸二氢钠的体系,当PH在9.05时其中只有一个单标会出现裂分,但是混标分离很好,样品分离却很差!!!当PH变为9.8时,单标有两个出现裂分,混标分离良好,样品分离也可以,但是样品分离的时候后面几个峰出峰时间比混标的提前了,这是为什么?我要如何优化PH才可以使单标出的是一个单峰而无裂分???而且样品分离和混标的分离总是不同步???为什么呢??一般来说,混标分开了样品应该也可以分开的~~~~~
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  • sunpengwjh

    第1楼2010/10/07

    楼主改变缓冲溶液的pH单标出峰情况改变,混标不改变?单标和混标的背景溶液是一种么?

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  • tbw113

    第2楼2010/10/08

    是的~~~~都是一样的条件~~

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  • cpudaxiao

    第3楼2010/10/08

    把你的溶解样品的溶液写出来看一下,存在你的这种情况很有可能是背景缓冲液和样品溶解用溶液的差异太大。

    tbw113(tbw113) 发表:是的~~~~都是一样的条件~~

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  • tbw113

    第4楼2010/10/08

    都是用50%甲醇溶解的
    缓冲液是50mmol硼砂用磷酸二氢钠调节PH9.80。

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  • cpudaxiao

    第5楼2010/10/08

    这个条件下你的电流稳定吗?甲醇浓度这么高,并且硼砂和磷酸盐都很容易析出。
    “用磷酸二氢钠调节PH9.80”这个方法很少见啊

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  • tbw113

    第6楼2010/10/09

    电流有时会波动5uA这样,用磷酸二氢钠调节PH9.80主要是因为要调节PH ,所以先用这样的方式调节,得出最佳PH 后在考虑其的浓度,这样的方式调节是不是不可行?和直接以摩尔比的方式来调节有什么不同么?

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  • tbw113

    第7楼2010/10/10

    我是不是应该将样品和标准品的溶解液都改为水而不是50%甲醇水???急求解答~~~

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  • cpudaxiao

    第8楼2010/10/10

    其实硼砂缓冲液直接用HCL和NAOH调PH就好了,用量很少的没关系,用硼酸也可以。
    即使引入其它的离子也是很少量的,基本没影响的。用摩尔比是配磷酸缓冲液时用的。

    tbw113(tbw113) 发表:电流有时会波动5uA这样,用磷酸二氢钠调节PH9.80主要是因为要调节PH ,所以先用这样的方式调节,得出最佳PH 后在考虑其的浓度,这样的方式调节是不是不可行?和直接以摩尔比的方式来调节有什么不同么?

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  • cpudaxiao

    第9楼2010/10/10

    这个根据个人经验甲醇的比例不超过20%为好。

    tbw113(tbw113) 发表:我是不是应该将样品和标准品的溶解液都改为水而不是50%甲醇水???急求解答~~~

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  • sunpengwjh

    第10楼2010/10/10

    楼主可以按着这个比例试一下,看看效果怎么样!

    cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:这个根据个人经验甲醇的比例不超过20%为好。

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