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【求助】求助:液相 怎么样才能提高理论塔板数问题?

  • zhangcsno114
    2010/10/13
  • 私聊

液相色谱(LC)

  • 检测样品:地塞米松磷酸钠注射液(含量)

    色谱条件和系统适用性试验 :
    色谱柱:C18
    流动相:三乙胺溶液(量取三乙胺7.5ml加水至1000ml,用磷酸调PH至3.0+/_0.05):甲醇:乙腈=55:40:5
    检测波长:242nm
    以地塞米松磷酸钠计理论塔板数一般为7000,地塞米松磷酸钠与地塞米松之间分离度大于4.4
    样品先用水溶解,再用流动相稀释。20ul进样

    我用的是150cm的柱子(新柱),柱温25度,流速1.0ml/min
    检测结果:理论塔板数 5660
    分离度 3.7
    拖尾因子1.033
    RSD% 0.16%
    请教一下怎么样才能提高理论塔板数和分离度呢?谢谢!!!
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  • windy1987

    第1楼2010/10/13

    换条长柱!可以增加理论塔板数和分离度

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  • 〓猪哥哥〓

    第2楼2010/10/13

    是药典的条件还是自己摸索的方法。如果是药典的方法,调节流动相比例或者更换一根色谱柱。方法摸索可以更改流动相组成,提高柱温,减低流速等

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  • 21kgtan

    第3楼2010/10/14

    理论塔板数取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。你柱子固定的话,要改善理论塔板数和分离度只能往流动相方面下工夫

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  • 有水有渝

    第5楼2010/10/14

    应助达人

    同意此方法,能不调节就不要调节其它参数。

    windy1987(windy1987) 发表:换条长柱!可以增加理论塔板数和分离度

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  • zhangcsno114

    第6楼2010/10/14

    您好,方法和条件都是药典上的,就是柱温和流速都没有明确规定,所以我选择了常温和1.0ml/min 的流速

    在没有规定柱温和流速的情况下,一般选多少呢?这样的话这两个条件就可以随便调整了,对吗?

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  • 有水有渝

    第7楼2010/10/14

    应助达人

    没有规定的情况下,一般默认流速为1.01.0ml/min ,可适当调整至符合系统适应性要求。柱温为常温10-30度。

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  • windy1987

    第8楼2010/10/14

    如果老是考虑流动相比例的话太浪费时间,直接换柱子比较简单!为什么有简单的不去做而去做复杂的呢?我一般想出峰时间加快,才会考虑改变流动相比例!

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  • naranjo

    第9楼2010/10/14

    药典的参数除柱子填料种类、检测器类型、流动相组成不能变其他的参数如流动相比例、流速、柱温、进样量都可以做相对的调整的,看你的结果踏板5000多分离度还可以那就换根长柱子吧。

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  • Derek lee

    第10楼2010/10/16

    提高塔板数比较容易,提高柱温或改变流动相比例使出峰时间提前,要改善分离度要从流动相上调节比较有效。

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