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【讨论】色谱柱中的流动相会排干吗?

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  • 刚刚在一篇资料上看的,贴出来大家讨论下


    色谱柱中的流动相会排干吗?
    不少做色谱分离试验的人遇到过这样的情形:不慎未及时补充流动相,泵将溶剂瓶中的流动相吸干了,HPLC系统由此而停止工作了。如此情况是否会损坏色谱柱?泵是否已将色谱柱中所有流动相都排干了?色谱柱还能使用吗?事实上,如果泵将溶剂瓶中的流动相吸干,并不会造成色谱柱的损坏。即使泵中充满了空气,泵也不会将空气排入色谱柱。因为泵只能输送液体,而不能输送空气。相比之下,另一个更可能发生的情况是忘记盖上色谱柱两端的密封盖或盖子太松而使色谱柱变干。同样,整个色谱柱干涸的情况不太容易发生,多半可能只是色谱柱两端的几个毫米变干了,因挥发掉所有溶剂使色谱柱变干需要相当长的时间。即使色谱柱真的变干了,也不一定就不可救药了。可以尝试用一种完全脱气的、表面张力低的溶剂(如经氦气脱气的甲醇)冲洗色谱柱以除去气体。较低的表面张力有助于浸润填料表面;已脱气的溶剂应该能够溶解并去除滞留在填料中的气体。色谱柱大约需要(以1mL/min的流速)冲一个小时或更多的时间被彻底浸润,恢复到正常状态。

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  • xiaohui9804

    第1楼2010/10/20

    好帖子,受益了,我把我的帖子跟过来一起分享吧

    纯水流动相冲洗反相C18色谱柱对柱子的伤害?经常有人提出这个问题,并为此而担心,我来释疑下:
    反相C18色谱柱(即憎水柱子)如果用纯水冲洗后,如果立即停泵则由于其憎水(疏水)的缘故使得柱子内的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷(也说成是失去支撑倒下),柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢?诶!不要惊慌,只要你不停泵,上述情况不会立即发生,我们只要保证最后用有机相冲洗柱子,停泵后使柱子内留存的是有机相,就无大碍,记住若遇到这种情况请不要停泵或者不要长时间停泵,而应立即过渡到有机相既可,另外还有长时间保存柱子是建议填料中充满乙腈,用乙腈保存C18反相柱子是最佳的,因乙腈为非质子型极性溶剂,为什么就不用我解释了吧?

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  • happy王子矜

    第2楼2010/10/20

    有争议的内容,嘿嘿,有人说乙腈会聚合。

    反正我的意见是,最后一个样品或者最常用的有机相是什么就用什么保存。我想很少有人做个样品,然后柱子就收好三年后再用吧。

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  • liuliuhui

    第3楼2010/10/20

    以前把柱子冲干过,当时很紧张。
    早看到这个就不用紧张了

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    第4楼2010/10/20

    晕,这边发贴了啊,汗~

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    第5楼2010/10/20

    帮打听打听,汗,乙腈怎么个聚合法~

    王子矜(wangzijin) 发表:有争议的内容,嘿嘿,有人说乙腈会聚合。

    反正我的意见是,最后一个样品或者最常用的有机相是什么就用什么保存。我想很少有人做个样品,然后柱子就收好三年后再用吧。

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  • samanthalas

    第6楼2010/10/20

    “如果立即停泵则由于其憎水(疏水)的缘故使得柱子内的水因而流失掉,长时间停泵使得柱子干掉(变干),会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷”
    这句话好拗口啊!并且感觉没有说明白。

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    第7楼2010/10/20

    反相C18,我是不会用纯水冲洗的,呵呵~

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  • liuliuhui

    第8楼2010/10/20

    是不会用纯水长时间冲洗吧!
    处理缓冲盐的时候不是可以用纯水吗?

    环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:反相C18,我是不会用纯水冲洗的,呵呵~

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  • samanthalas

    第9楼2010/10/20

    如果不是AQ柱的话,有缓冲盐也不能用纯水冲啊。

    liuliuhui(liuliuhui) 发表:是不会用纯水长时间冲洗吧!
    处理缓冲盐的时候不是可以用纯水吗?

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  • liuliuhui

    第10楼2010/10/20

    哦,原来如此,谢谢版主明示啊!

    samanthalas(samanthalas) 发表:如果不是AQ柱的话,有缓冲盐也不能用纯水冲啊。

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