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【资料】整体柱在毛细管电色谱中的应用
dengfang1988
2010/11/03
私聊
生命科学仪器综合讨论
整体柱
在毛细管电色谱中的应用
毛细管电色谱(CEC)是近年来建立在电泳技术不断发展和
液相色谱
理论日趋完善的基础上,利用电渗流或电渗流结合压力来推动流动相移动的微分离法。由于它结合了毛细管电泳及高效
液相
两种分离机制,因而具有快速,高效,使用范围广等特点,不管是中性物质还是带电物质都可以达到理想的分离效果。
CEC的毛细管柱主要有3种类型:填充柱、开管柱和
整体柱
。填充柱是发展最快使用最多的一类,95%的据报道都是使用填充柱进行分析,灵敏度高,重现性好。但填充柱需要在柱尾制作塞子,由此带来柱塞效应,引入了非均匀性因子引起气泡的产生,进而使谱带展宽。同时,塞子的制备具有一定的难度,条件控制不好将影响填充的均匀性,孔隙若太大流动相渗出,太小则易被污染甚至被样品中的“脏物”阻塞。开管柱虽没有塞子问题,固定相均匀,可使用较高的电压,但相比小,柱容量低,检测困难。整体柱不需要封口,避免了塞子制作的困难以及产生的气泡问题,且具有更好的多孔性和渗透性,即具有流动相的流通孔又有便于溶质进行传质的中孔,利于实现生物大分子的快速分离。
溶胶-凝胶技术是指溶胶的凝胶化过程,光聚合法制备溶胶凝胶整体柱有许多优点,如可控制孔径,柱渗透性好,低温制备避免柱体变形,柱效高等。光聚合
整体柱
的进一步修饰,对于生物大分子而言具有更强的分析能力。Kato等采用两种方法修饰光聚合溶胶-凝胶
整体柱
,分离氨基酸混合物。一是与二甲基十八烷基氯硅烷反应,二是与二甲基十八烷基氯硅烷反应后,用氯三甲基硅烷进行封端反应。为提高检测灵敏度,将氨基酸衍生化,4-氟-7-硝基-2,1,3苯并二唑为荧光试剂。用第二种方法修饰的封端整体柱在流动相为 50 mmol·L
-1
醋酸铵(pH2.5)-水-乙腈(1:1:8)条件下,天冬氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、丙氨酸在7 min内得到了很好的分离,柱效在每米58000~105000,亮氨酸与异亮氨酸具有相同的相对分子质量,在此条件下也得到了很好的分离。而使用未封端的
整体柱
由于吸附氨基酸,柱效比封端柱低 50%~67%。
微型化是未来分析仪器的发展方向,由于微芯片具有分析速度快,携带方便等优点越来越受到人们的关注,学者们已开始将
整体柱
制备技术应用于微芯片中。Daniel等将丙烯酸酯有机
整体柱
通过光聚合作用蚀刻到微芯片通道中作为固定相分离肽和氨基酸。
整体柱
技术与微芯片技术的结合将为生物大分子的分离分析带来极大的便利。
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版主-dong3626
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私聊
dong3626
第1楼
2010/11/09
应助达人
了解一下。。
目前有成型的毛细管电色谱仪器么?
0
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