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【求助】硅胶柱层析

薄层色谱(TLC)

  • 找了很久,确实没发现有硅胶柱层析的版块,于是就到了最为相近的薄层色谱来求助了。
    今天主要想咨询下大家几个经验性的问题:
    1.硅胶在柱层析使用前,一定要活化吗?这样做有什么作用啊?
    2.硅胶还有所谓的吸附溶胀的现象吗?或者1g硅胶在有机溶剂中的体积大概多少?好像这叫视密度吧?
    3.湿法装柱一定要加压吗?因为没有加压泵,本来就会在常压下洗脱.
    4.洗脱的流速大概多少?比如2个柱体积每小时啊,或者线速度之类的具有一定量化标准的参考值(我准备使用15cm*1.7cm的柱子),这个对于分离影响大吗?.
    5.对于几个比较相近的物质,可以通过几次柱层析来实现分离吗?比如一次去掉1-2种,那么多次之后就能把杂质去掉了?
    不好意思,刚接触这个,问题比较多,大家多多指教!想到几个就回答几个,先谢谢大家了!
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  • 幽灵龙猫

    第1楼2010/11/05

    1不一定要活化,我曾经比较过,效果差不多,活化后能稍微好点
    2硅胶吸附溶胀现象不明显,凝胶更明显一些,通常硅胶可以忽略
    3湿法装柱不一定要加压,自然沉降即可
    4这个自己掌握,别太快就行,快了容易影响分离效果
    5对于相近的物质,上一次柱子分开可能性比较小,可以考虑进行PTLC,即制备薄层。

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    第2楼2010/11/05

    有问题,还有分离纯化版块也可以~
    哈哈哈,这算不算广告?

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  • geebzbz

    第3楼2010/11/05

    感谢这么全面、及时的回答!
    如果溶胀不明显的话,那他的体积和质量怎样对应上?

    幽灵龙猫(xiaodu2007693) 发表:1不一定要活化,我曾经比较过,效果差不多,活化后能稍微好点
    2硅胶吸附溶胀现象不明显,凝胶更明显一些,通常硅胶可以忽略
    3湿法装柱不一定要加压,自然沉降即可
    4这个自己掌握,别太快就行,快了容易影响分离效果
    5对于相近的物质,上一次柱子分开可能性比较小,可以考虑进行PTLC,即制备薄层。

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  • geebzbz

    第4楼2010/11/05

    谢谢指导,以后也经常去分离纯化版块!

    环烯醚萜(kaikaifeng) 发表:有问题,还有分离纯化版块也可以~
    哈哈哈,这算不算广告?

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  • 幽灵龙猫

    第5楼2010/11/05

    欢迎啊,我也是分离纯化版滴,嘿嘿

    geebzbz(geebzbz) 发表:谢谢指导,以后也经常去分离纯化版块!

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  • It`s me

    第6楼2010/12/20

    1.硅胶在柱层析使用前,一定要活化吗?这样做有什么作用啊?
    新买的不用活化的,活化后吗分离效果更好点。
    2.硅胶还有所谓的吸附溶胀的现象吗?或者1g硅胶在有机溶剂中的体积大概多少?好像这叫视密度吧?
    应该有点吧,不过这个在视觉上不太明显吧,没太仔细观察过。
    3.湿法装柱一定要加压吗?因为没有加压泵,本来就会在常压下洗脱.
    加压吗分离效果会好点,没有加压泵就手动加压呗,我们以前都是手动加压,后来嫌太累,做了个氮气加压的装置,省力,哈哈!
    4.洗脱的流速大概多少?比如2个柱体积每小时啊,或者线速度之类的具有一定量化标准的参考值(我准备使用15cm*1.7cm的柱子),这个对于分离影响大吗?
    流速会有影响,不过这个还要看你硅胶目数、载体高度、洗脱剂等等对分离效果都有影响的。
    5.对于几个比较相近的物质,可以通过几次柱层析来实现分离吗?比如一次去掉1-2种,那么多次之后就能把杂质去掉了?
    当然是可以,有钱的话买个制备色谱会更爽。

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  • geebzbz

    第7楼2010/12/21

    谢谢这么仔细的回答!
    手动加压,怎么做的啊?对这种自己改进的实验方法,我非常感兴趣,望不吝赐教啊!

    艺泰安邦(foumy) 发表:1.硅胶在柱层析使用前,一定要活化吗?这样做有什么作用啊?
    新买的不用活化的,活化后吗分离效果更好点。
    2.硅胶还有所谓的吸附溶胀的现象吗?或者1g硅胶在有机溶剂中的体积大概多少?好像这叫视密度吧?
    应该有点吧,不过这个在视觉上不太明显吧,没太仔细观察过。
    3.湿法装柱一定要加压吗?因为没有加压泵,本来就会在常压下洗脱.
    加压吗分离效果会好点,没有加压泵就手动加压呗,我们以前都是手动加压,后来嫌太累,做了个氮气加压的装置,省力,哈哈!
    4.洗脱的流速大概多少?比如2个柱体积每小时啊,或者线速度之类的具有一定量化标准的参考值(我准备使用15cm*1.7cm的柱子),这个对于分离影响大吗?
    流速会有影响,不过这个还要看你硅胶目数、载体高度、洗脱剂等等对分离效果都有影响的。
    5.对于几个比较相近的物质,可以通过几次柱层析来实现分离吗?比如一次去掉1-2种,那么多次之后就能把杂质去掉了?
    当然是可以,有钱的话买个制备色谱会更爽。

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    第8楼2010/12/21

    最后一条,分离是一个慢过程,很难一步完成的,呵呵

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  • 阿三

    第9楼2010/12/21

    没有活化过 照样使用

    幽灵龙猫(xiaodu2007693) 发表:1不一定要活化,我曾经比较过,效果差不多,活化后能稍微好点
    2硅胶吸附溶胀现象不明显,凝胶更明显一些,通常硅胶可以忽略
    3湿法装柱不一定要加压,自然沉降即可
    4这个自己掌握,别太快就行,快了容易影响分离效果
    5对于相近的物质,上一次柱子分开可能性比较小,可以考虑进行PTLC,即制备薄层。

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  • It`s me

    第10楼2010/12/26

    柱子不是有磨口吗,可以买一个叫做加压头的玻璃器具,然后用一根软管连接,再买个双链球,接上就可以了,记着塑双链球和软管之间配个放气阀(我们以前叫放气阀),这样压力大了就可以手动缓慢放气。不至于一下子崩掉造成柱子里的硅胶开裂。

    geebzbz(geebzbz) 发表:谢谢这么仔细的回答!
    手动加压,怎么做的啊?对这种自己改进的实验方法,我非常感兴趣,望不吝赐教啊!

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