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【求助】UPLC柱压异常,急

液相色谱(LC)

  • 昨天用waters的uplc做中药提取物的样品,流动相是0.1%的甲酸和乙腈,走梯度程序,样品我过了0.45的滤膜,做完了几个样品之后,柱压略有升高,我就冲柱子了,先用90%的水,然后过渡到50%的乙腈水,最后是纯乙腈,因为下班了,所以调了流速为0.02ml/min冲了一夜,今天早上过来柱压就不太正常,往常柱压波动大概在10psi之内,今天却在20多个psi波动,于是我把流速调到0.2ml/min,柱压一直升到4000多psi,而且一直在往上升,而之前一般在3800左右。之后我又分别换成50%乙腈水和10%乙腈水冲,柱压似乎稳定些了,但都比之前升高了几百psi,但是等我换回纯乙腈时,柱压还是升到了4500psi,并且一直有往上升的趋势。
    我估计是昨天的样品前处理不够干净,原先做的时候是高速离心之后再过滤膜,我想明天换成流动相再冲冲看,或者换成甲醇冲,我的样品是用甲醇水溶液溶解的。
    今天忙了一天也没什么效果,很着急,希望大家给我点意见,关于冲柱子的心得,我刚接触uplc,对仪器还是不了解,也不敢冒然拆仪器,还有会不会预柱有问题了,在这里先谢谢了。
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  • 阿帕

    第1楼2010/11/04

    用uplc的话应该也用到筛板了吧,换个筛板试试,可能是筛板脏了

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  • andyerlee

    第2楼2010/11/04

    冲了一夜有冲干吗?
    样品的溶剂是甲醇水溶液,而用的流动相是乙氰水溶液,对柱子的影响很大

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  • dfldxt

    第3楼2010/11/05

    没有冲干,我们以前这个流动相条件也做过很多样品的,应该跟流动相和溶剂条件没关系
    我现在把预柱拆下来了,单接柱子看看压力如何,很担心柱子堵了,如果柱子堵了大家一般怎么处理呢

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  • dfldxt

    第4楼2010/11/05

    筛板是在哪个位置,我这里就这一根柱子,估计没法换

    阿帕(gabriellaalex) 发表:用uplc的话应该也用到筛板了吧,换个筛板试试,可能是筛板脏了

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  • ballooning

    第5楼2010/11/05

    筛板在柱头啊,把柱头那边的柱套拆下来,(小心填料,如果你没有填料的话),里面的就是筛板,拿下来超声下,还是有点效果的。如果真是柱头问题的话。还有就是把填料挖掉一点,再添点新的。不过要填好才行。

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  • jhylc1976

    第6楼2010/11/05

    感觉柱压变化也不是很大,一般柱压一直往上的话,很有可能是过滤芯或预柱堵了,可以考虑更换就解决。如果柱压忽上忽下,很有可能是流通池里有气泡,需要用100%异丙醇冲洗(先拆掉色谱柱后冲洗),应该可以解决。

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  • dfldxt

    第7楼2010/11/05

    早上仪器的柱压到了两千多,用的是纯乙腈,0.04ml/min,我今天把柱子拆下来,分别排查看是柱子还是在线过滤器的问题,后来发现单接在线过滤器时压力都有1700psi,估计是在线过滤器脏了,用水超声之后接上柱子,现在压力是3800psi,感觉还算稳,不过还是有点缓慢上升的趋势,要多观察一下。
    其实想想问题也不是很复杂,自己因为刚接触UPLC,心里没有底,当时也不敢拆,其实昨天要是早点把这些部件拆下来排查,就好了。不过也给工程师打了很多电话,因为那些零件不熟悉,今天之前连在线过滤器是什么样子都不知道。

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