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【第三届原创参赛】发酵罐出现问题与解决方案 记

  • 省部重点实验室
    2010/11/25
    • 私聊

仪器检定/校准/计量

  • 维权声明：本文为gl19860312原创作品，本作者与仪器信息网是该作品合法使用者，该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为，我们将追究法律责任。
    本实验室主要工作就是:微生物发酵与代谢调控 、蛋白的分离纯化 、生物材料的研发与生产（ 化妆品 、面膜、人工血管 、人工骨................)


    发酵用实验仪器设备一览主要仪器
    12.8L    、30L、 50L、 500L等规格国际知名品牌（瑞士比欧、德国贝朗）全自动控制发酵罐，并带有尾气分析仪，用于微生物高密度发酵从实验室小试研究到工业化生产。

    【第三届原创参赛】秀秀我们的实验室 SHOW一下(11月)共有 570 人关注过本贴

    http://bbs.instrument.com.cn/shtml/20101108/2913004/

    曾经出现问题与解决方案
    第一例、 在暑期的实验中，我们发现发酵失败的次数较多

    现象：在上罐3到6个小时内，到某一时间，溶氧突然升高，为其中二氧化碳的含量降低。

    失败原因：① 接种染菌 ；

    ② 上罐时染菌；

    ③ 上罐前已经染菌。（ √ ）

    改进前的试验流程：

    第一天上午配料等→→ 第一天下午实消等 →× → 第二天早上上罐发酵


    改进后的试验流程：



    第一天上午配料等 → → 第一天下午空消等 →→ 第二天早上实消，上罐



    流程改进后的结果： 目前很少有放罐记录。



    分析原因：因为改进前的试验流程：第一天下午实消等 这一步结束以后，有一个晚上的时间，罐子的使用太久，会气密性不好，导致晚上温度一降下来，外界的菌体可能通过细微的孔径进入到发酵罐子中！！从而导致染菌！！



    第二例：最近连续三次放罐（发酵失败，放出菌体）



    现象：在上罐2到3个小时内，到某一时间，溶氧突然升高，发酵液中溶解氧浓度（DO值）从30%一下子上升到80%~~90% 甚至是达到了99%！！


    失败原因：①开始留的原始的种子（-20°C保存的）染菌；( √ )

    ②     划一级平板或二级平板时接种染菌；

    ③一级摇瓶或二级摇瓶接种时染菌；

    ④ 上罐前已经染菌；

    ⑤上罐时染菌。

    验证方案：



    时间

    培养OD



    2h



    4h



    6h(诱导)



    9h（诱导结束）



    12h







    正常



    3.31



    5.04



    5.67



    6.54



    6.76







    验证



    1.27



    2.95



    3.61



    3.81



    4.02









    并且，验证实验的摇瓶发酵起始OD为3.84，而正常情况下OD应该为5.00~~5.40左右。再者，验证实验的生长缓慢，菌体老是生长不起来。



    然后，重新划平板。这次发酵成功！！



    菌种的培养：

    -70°C保藏→→-20°C保藏→→4°C保藏→→一级平板→→二级平板→→一级摇瓶→→二级摇瓶→→上罐发酵！



    后记：如有此类情况，可以直接从新划平板，接新的菌种进行发酵！
  • 精
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相关话题
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  • titi

    第1楼2010/11/25

    原创大赛要求作品必须达到500字以上~~~
    楼主完善补充后在分享哦~~~
    本作品暂时不收录到参赛列表中，楼主完善后再进行收录！！

0
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  • xing-xing

    第2楼2010/11/25

    楼主赶快补充啊

0
    +关注 私聊

  • titi

    第3楼2010/11/26

    楼主啊~不是补充一些摘抄的该属性内容就可以的啊！
    大赛规定引用部分超过文章篇幅1/3就视为非原创啦~~

0
  • 精
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  • xing-xing

    第4楼2010/11/26

    还要再努力啊

    titi(carollee) 发表:楼主啊~不是补充一些摘抄的该属性内容就可以的啊！
    大赛规定引用部分超过文章篇幅1/3就视为非原创啦~~

0
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  • 青林

    第5楼2010/12/01

    有加个附件,应该可以通过评分了

0
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  • nje2nx

    第6楼2010/12/07

    就是该多发点 发酵方面的
    强烈支持

0
  • 精
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  • 回头无岸

    第7楼2010/12/22

    我是为看你们实验室来的~~
    很漂亮滴实验室~

0
  • 精
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  • xing-xing

    第8楼2011/01/01

    同意，加精了。

    青林(wyqql2060) 发表:有加个附件,应该可以通过评分了

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